As amilases fazem parte do grupo de enzimas mais utilizadas nas indústrias de alimento, farmácia, bioetanol, têxtil e outros. Esses biocatalisadores são produzidos por vegetais, animais e microrganismos, especialmente por fungos. O objetivo deste trabalho foi bioprospectar linhagens fúngicas produtoras de amilase e caracterizar suas atividades enzimáticas. Para isso, 10 linhagens isoladas de amostras de solo foram disponibilizadas pela micoteca do IFMT Campus Avançado Lucas do Rio Verde foram selecionadas e reativadas. Dessas, 09 apresentaram viabilidade e foram submetidas ao teste atividade amilolítica (meio BDA a 2% de amido), onde foi determinado o Índice Enzimático (IE), obtido pela relação entre o diâmetro do halo de hidrólise e o diâmetro da colônia. As linhagens com maior IE (A25, A12, S01 e D12) foram selecionadas para a avaliação das condições ideais de temperatura e pH dos extratos enzimáticos. As linhagens selecionadas pertencem ao gênero Aspergillus e os melhores resultados obtidos foram observados em temperatura de 50º C e com pH 5,0. Nessas condições, os extratos enzimáticos amilolíticos apresentaram maior desempenho de hidrólise do amido, sendo capazes de degradar o substrato em 42,3% (D12), 44,7% (A12), 47,8% (A25) e 60,1% (S01), enquanto amostras de alfa-amilase comercial promoverams atividade relativas de até 86%. Considerando os resultados observados, pode-se concluir que entre as linhagens estudadas, quatro apresentaram considerável potencial para produção de amilases (S01, A25, A12 e D12), com destaque para a linhagem S01, que apresentou maior capacidade em produzir enzimas amilolíticas com potencial para exploração biotecnológica.