RESUMO: Objetivou-se com este estudo comparar diferentes métodos complementares de diagnóstico (macroscópico, histopatológico, sorológico e molecular) da tuberculose, em bovinos naturalmente infectados. O trabalho deu-se por meio de amostras colhidas em abate sanitário de 40 bovinos reagentes no teste cervical comparativo (TCC) para tuberculose. A inspeção macroscópica post mortem das carcaças foi acompanhada de colheita de amostras de muco nasal, sangue e tecido (fígado, pulmão e linfonodo mediastínico) para realização do exame de reação em cadeia pela polimerase (PCR), de Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) e histopatológico com colorações de hematoxilina-eosina (HE) e Ziehl-Neelsen (ZN), respectivamente. Dos 40 bovinos inspecionados no abate, 22 (55%) animais apresentaram algum tipo de lesão macroscópica sugestiva de tuberculose. Nos achados histopatológicos visualizados em HE, 13 (32,5%) carcaças apontaram alterações histológicas, sendo 6 (15%) nos linfonodos mediastínicos, 5 (12,5%) no fígado e 3 (7,5%) no pulmão. Não foi observada a presença de bacilos álcool-ácido resistentes em nenhuma das amostras avaliadas. O ensaio sorológico de ELISA/IDEXX(r) identificou um (2,5%) animal reagente, e o teste de PCR detectou DNA de Mycobacterium bovis em uma (2,5%) amostra. Concluiu-se que entre os exames complementares de diagnóstico avaliados nenhum foi capaz de detectar todos os animais que estavam positivos na tuberculinização, porém a associação de diferentes métodos pode garantir a confiabilidade do diagnóstico.
Leptospirosis is a zoonotic disease of world importance, and its transmission depends on the interaction between humans and animals. Given the necessity to investigate potential hosts of Leptospira spp., this study verified the prevalence of different serovars in the species of Rhipidomys spp., a widespread sigmodont rodent in Brazil. The studied population originates from a semi-evergreen forest located in the county of Uberlândia, in the state of Minas Gerais. The microscopic agglutination test (MAT) was performed with 14 serovars. Thirteen out of the 43 wild rodents captured showed a positive agglutination reaction, with a greater prevalence of the serovars Pyrogenes, Copenhageni, and Canicola. This study found a prevalence of 30.3% anti-Leptospira spp. antibodies; all positive animals were reactive to more than one serovar.
RESUMO:O objetivo deste trabalho foi analisar a frequência de lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose em carcaças de bovinos reagentes ao teste intradérmico de tuberculose. Os animais do estudo foram provenientes de rebanhos de exploração leiteira, localizados nos municípios de Perdizes, Patos de Minas, Lagoa Formosa e Uberlândia, Minas Gerais. Foram avaliadas 140 carcaças de bovinos positivos no teste cervical comparativo. Durante o abate sanitário foi realizada inspeção post mortem das carcaças, e as lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose foram registradas. Foram avaliados os linfonodos mediastínicos, fígado, pulmão e carcaça. Dos 140 bovinos examinados, 78 (55%) apresentaram algum tipo de lesão macroscópica sugestiva de tuberculose, 38 (49%) ocorreram exclusivamente nos linfonodos mediastínicos, 22 (28%) no fígado e 11 (14%) no pulmão; 5 (6%) carcaças apresentaram lesões no fígado, pulmão e linfonodo mediastínico, e 2 (4%) tiveram lesões no pulmão e linfonodo. Concluem-se que as lesões não visualizadas em bovinos reagentes ao teste tuberculínico podem ocorrer e estariam relacionadas principalmente ao estágio de evolução da doença, tempo insuficiente na inspeção post mortem para detecção, bem como reações inespecíficas para outras micobactérias. PALAVRAS-CHAVE: ABSTRACT:The aim of this study was to analyze the frequency of macroscopic lesions suggestive of tuberculosis in cattle reacting to the tuberculin test. Cattle of this study were from dairy herds located in the cities of Perdizes, Patos de Minas, Lagoa Formosa and Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. We evaluated 140 cattle carcasses positive to the cervical comparative intradermal tuberculin test. During the slaughter a post-mortem inspection of carcasses was done, and the lesions suggestive of tuberculosis were recorded. We evaluated the mediastinal lymph nodes, liver, lung and carcass. Of the 140 cattle examined, 78 (55%) carcasses had some kind of macroscopic lesions suggestive of tuberculosis, 38 (49%) occurred only in the mediastinal lymph nodes, 22 (28%) in the liver and 11 (14%) in the lungs; 5 (6%) carcasses showed lesions in liver, lungs and lymph node, and 2 (4%) showed lesions in lung and lymph nodes. We concluded that lesions that were not visualized in bovine tuberculin skin test reagents may occur and are related mainly to the stage of the disease, insufficient time to detect the lesions, and nonspecific reactions to other mycobacteria.
RESUMO: Leucose e tuberculose são doenças que acometem o rebanho bovino e acarretam consideráveis prejuízos econômicos, em virtude do impacto na produtividade, porém há poucos relatos de que elas ocorram concomitantemente. Diante disso, objetivou-se avaliar a intercorrência entre essas doenças em bovinos abatidos no município de São Gotardo, MG, sendo que esses animais foram reagentes à tuberculinização e apresentaram lesões características da doença durante o abate sanitário. Cento e trinta e três amostras de soro sanguíneo, todas oriundas de bovinos positivos para tuberculose, foram analisadas pela técnica de imunodifusão em gel de ágar (IDGA), e a prevalência de bovinos que apresentaram positividade ao teste de IDGA foi de 55,64% (74/133). Os resultados obtidos nesta pesquisa permitiram concluir que a tuberculose e a leucose são doenças presentes nas regiões estudadas e encontram-se disseminadas na população avaliada, com níveis significativos, causando risco à saúde dos animais e das pessoas, dado o caráter zoonótico da tuberculose bovina.
Background: Leptospirosis is a zoonosis that affects many species of mammals and occurs endemically in Brazil. The biofilm matrix provides structure and protection to the biofilm cells working as a physical barrier to antibiotic agents, which are attached or consumed by the matrix components. However, this attribute varies according to the matrix, antimicrobial agent and biofilm age. Leptospira may change morphologically according to environmental conditions, including cell aggregation and biofilm formation. Leptospira can colonize the ducts of kidney from hosts for a long time, forming a biofilm, which is believed to be an important factor for their maintenance in animals and in the environment. Thus, the objective of this research was to determine the biofilm formation capacity of four strains of Leptospira interrogans.Materials, Methods & Results: The strains were typified by WHO/FAO/OIE and National Collaborating Center for Reference and Research on Leptospirosis (Kit Biomedical Research, Amsterdam, Netherlands). Leptospira interrogans strains, two isolated from cattle and two isolated from dogs were biofilms tested for adhesion on polystyrene plates, extracellular matrix composition and confocal microscopy. In the plating adhesion test, the suspension was inoculated into 96-well sterile polystyrene microplates with flat bottom at a ratio of 1:200 in EMJH medium, followed by 24 h incubation at 28°C, with medium renewal after 12 h. After this period the wells were washed three times with sterile PBS and following incubation; the plates were dried in the oven at 60°C for 30 min and added 200 μL of 1% violet crystal for five min. Subsequently, the plates were washed with distilled water, after complete removal, 200 μL of acetic acid 33% was added and the readings were performed at 570 nm in the ELISA reader. The proteins and polysaccharides were quantified in a scraped pooled sample diluted in 0.85% sterile saline solution to achieve an optimal amount for testing used reagents of the BCA kit. The polysaccharide content was determined by adding into a tube, an aliquot of 0.5 mL from the pooled sample, 0.5 mL of phenol and then immediately 2.5 mL of sulfuric acid. The solution was homogenized and left to react for 15 min at room temperature. The reading was performed at 490 nm in ELISA reader. The strains were compared regarding polysaccharides and protein matrices using analysis of variance (ANOVA) and Tukey test. At confocal microscopy the strains were incubated with the tested polypropylene material for 24 h. The materials were washed with sterile phosphate buffer and stained with propidium iodide. The reading was performed using a Laser Scanning Confocal Microscope (Zeiss 710) with laser excitation (488 nm) and 580-680 nm emission filters for propidium iodide (red marking). All strains displayed strong adherence on microplate and the amount of polysaccharides in biofilm was not statistically different among the studied strains, but the amount of protein was significantly different in strain 4 (P > 0.5). The confocal microscopy showed the adherence of the Leptospira spp. strains to polypropylene material after washing.Discussion: Biofilm production plays an important role in the maintenance of a chronic infection by Leptospira interrogans with renal colonization. The exopolysaccharide (EPS) has various functions, such as checking insolubility in water; giving the three-dimensional conformation of the biofilm; protecting cells from physical (mechanical action, irradiation and temperature variations), chemical.
<p>Os <em>Staphylococcus, </em>principais agentes causadores da mastite, quando em biofilmes, estão relacionados a uma série de mecanismos de resistência em diferentes tipos de infecções. O presente trabalho avaliou a susceptibilidade e resistência dos <em>Staphylococcus aureus</em>, isolados de casos de mastite bovina e do ambiente de ordenha, em condições de biofilme, frente a três antimicrobianos distintos em diferentes concentrações. Foram utilizadas trinta e duas estirpes de <em>S. aureus </em>testadas frente aos testes de inibição da concentração mínima de erradicação de biofilmes, utilizando cefalexina, amoxicilina e rifampicina, nas concentrações de 30 mg/mL, 50 mg/mL e 100 mg/mL, por doze horas de contato, e a eficiência dos testes avaliada pela contagem das unidades formadoras de colônias e pelo teste de microplacas. Os resultados revelaram que, entre os antimicrobianos testados, a cefalexina foi o que apresentou melhor eficiência nas três concentrações testadas, e a rifampicina e amoxacilina tiveram maior eficiência nas concentrações de 50 e 100 mg/ mL. Esses dados demonstram a importância sobre antibioticoterapia orientada associada com a correta higienização dos equipamentos de ordenha, evitando-se, assim, a formação de biofilmes, a adesão microbiana persistente em equipamentos, e a difusão dos microrganismos pelo canal ascendente dos tetos entre os animais do rebanho.</p>
A prevalência da mastite por Staphylococcus aureus em rebanhos leiteiros ocorre devido à sua alta infectividade associada a fatores de virulência que conferem ao micro-organismo a capacidade de se instalar no parênquima mamário. Objetivou-se avaliar o perfil de sensibilidade e resistência de estirpes de Staphylococcus aureus produtoras de biofilmes isoladas de casos de mastite bovina e ambiente de ordenha. Foram avaliadas 32 estirpes, sendo 28 isoladas de leite de vacas com mastite, duas isoladas de insufladores, uma isolada de mangueira condutora de leite e uma do leite do tanque de expansão. Após o isolamento e caracterização das estirpes como Staphylococcus aureus foram realizados testes para avaliar a capacidade de produção de biofilmes pelo teste de microplacas, e o perfil de sensibilidade e resistência de estirpes em modelo de adesão em biofilmes frente ao antimicrobiano cefalexina nas concentrações de 30mg/mL e 100mg/mL no tempo de 12 horas de contato das bactérias com o antimicrobiano. Os resultados revelaram que após a produção de biofilmes de 32 estirpes, 2 (6,25%) foram resistentes a cefalexina na concentração de 30mg e 8 (25,00%) foram resistentes na concentração de 100mg. A alta concentração de cefalexina tornou ineficaz a penetração do antimicrobiano pela matriz do biofilme dificultando sua atuação, sabendo-se que as bactérias quando em biofilmes estão mais resistentes do que na forma livre. Por isso, é importante realizar uma correta avaliação do uso e da concentração dos antimicrobianos para o adequado tratamento das infecções, principalmente das mastites estafilocócicas.
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