Diethynyl phosphinates were developed as bisfunctional electrophiles for the site-selective modification of peptides, proteins and antibodies. One of their electrondeficient triple bonds reacts selectively with a thiol and positions an electrophilic moiety for a subsequent intra-or intermolecular reaction with another thiol. The obtained conjugates were found to be stable in human plasma and in the presence of small thiols. We further demonstrate that this method is suitable for the generation of functional protein conjugates for intracellular delivery. Finally, this reagent class was used to generate functional homogeneously rebridged antibodies that remain specific for their target. Their modular synthesis, thiol selectivity and conjugate stability make diethynyl phosphinates ideal candidates for protein conjugation for biological and pharmaceutical applications.

Diethinylphosphinate wurden als bisfunktionelle Elektrophile für die ortsselektive Modifikation von Peptiden, Proteinen und Antikçrpern entwickelt. Eine ihrer elektronenarmen Dreifachbindungen reagiert selektiv mit einem Thiol und positioniert eine elektrophile Einheit für eine nachfolgende intra-oder intermolekulare Reaktion mit einem anderen Thiol. Die erhaltenen Konjugate erwiesen sich im menschlichen Plasma und in Gegenwart kleiner Thiole als stabil. Wir zeigen weiter, dass diese Methode für die Generierung von funktionellen Proteinkonjugaten für den intrazellulären Transport geeignet ist. Schließlich wurde diese Reagenzklasse verwendet, um funktionale, homogen verbrückte Antikçrper zu generieren, die spezifisch für ihr Ziel bleiben. Ihre modulare Synthese, Thiol-Selektivität und die Stabilität der Konjugate machen Diethinylphosphinate zu idealen Kandidaten für die Proteinkonjugation für biologische und pharmazeutische Anwendungen.