No abstract

Introducción. Dado el reiterado hallazgo de adultos y formas inmaduras de Triatoma maculata capturados en domicilios y peridomicilios en la localidad de Xaguas (Venezuela), se analizó la viabilidad de una colonia de laboratorio de esta especie alimentada con sangre humana y su estructura espacial. Objetivos. Analizar la viabilidad del ciclo de T. maculata alimentado con sangre humana en condiciones de laboratorio y caracterizar la estructura espacial de una población de T. maculata proveniente de ambientes domiciliarios y peridomiciliarios del centro-occidente de Venezuela. Materiales y métodos. La alimentación con sangre humana se llevó a cabo en lotes por estadio, utilizando un alimentador artificial, y la estructura espacial de los insectos por sexo y ambiente fue analizada mediante morfometría geométrica. Resultados. Los hallazgos fueron: fecundidad promedio, 27,70 huevos/hembra/vida, tiempo promedio de postura de huevos, 32,74 días, y longevidad promedio de la hembra, 39,15 días; el mayor tiempo en V estadio fue de 45,9 días y el menor en I estadio, 18,41 días; la mayor mortalidad fue de 77,78% y el menor porcentaje de muda en V estadio, de 22,23%. No se encontraron diferencias en el tamaño de alas y cabezas; sí se encontraron diferencias de conformación entre las cabezas de un mismo sexo de diferentes hábitats; sólo se encontraron diferencias de conformación de alas entre los machos del domicilio y peridomicilio. Conclusiones. T. maculata de la localidad de Xaguas podría encontrarse en un estado de adaptación al domicilio con fuentes sanguíneas diferentes al humano y en un estado incipiente de adaptación al domicilio con la sangre humana como fuente de alimentación.Palabras clave: Triatoma, adaptación biológica, caracteres sexuales, supervivencia, reproducción, enfermedad de Chagas.Viability and spatial structuring in a Triatoma maculata (Hemiptera: Reduviidae) laboratory colony fed with human blood Introduction. Immature and adult forms of Triatoma maculata have been captured repeatedly in and around the homes in the town of Xaguas, Venezuela. Because of its potential as a Chagas disease vector, a study was undertaken to evaluate the effect of human blood feeding on the viability and spatial structuring of a laboratory colony of this species . Objective. The effect of human blood feeding was determined for the viability of a T. maculata laboratory colony, as well as its spatial structuring. Material and methods. Insects were fed with human blood on artificial feeder. Spatial structuring was undertaken by the generalized analysis of by geometric morphometry. Results. The average fecundity of 27.7 eggs/female/lifetime was found, with a mean time to oviposition of 32.7 days, and a female longevity of 39.2 days. The longest inter-molt period was at the fifth nymphal stage (45.9 days), whereas the shortest was at 18.4 days, during the first nymphal stage. The highest mortality of nymphs was observed at the fifth nymphal stage (77.8%). The lowest molting percentage was observed in the fifth nymphal stage (22.2%...

<p><strong>Introducción.</strong> Las extensiones cuticulares de los insectos han sido estudiadas y se han propuesto clasificaciones para utilizarlas como herramienta taxonómica. A pesar de los diversos estudios morfológicos adelantados en Triatominae, el conocimiento que se tiene sobre la distribución y tipos morfológicos de estas estructuras en la subfamilia, aún es escaso y fragmentario.</p><p><strong>Objetivo.</strong> Describir las setas de diferentes regiones de la cutícula externa de varias especies de triatominos mediante microscopía electrónica de barrido.</p><p><strong>Materiales y métodos.</strong> Los triatominos fueron lavados, secados, se disecaron diferentes regiones del cuerpo de <em>Eratyrus mucronatus</em>, <em>Triatoma maculata</em>, <em>Panstrongylus geniculatus</em> y <em>Belminus ferroae</em>, se montaron sobre cinta doble adhesiva de grafito en soportes metálicos, fueron metalizadas con oro y se tomaron las micrografías para su posterior análisis.</p><p><strong>Resultados.</strong> Se realizó la descripción de 9 tipos de setas cuticulares. En <em>B. ferroae</em> y <em>T. maculata </em>se encontraron 5 tipos de setas, en <em>P. geniculatus</em> cuatro tipos y en <em>E. mucronatus</em> un sólo tipo. Según la tipología propuesta, la seta tipo 3 fue la más común en cada especie, excepto en <em>B. ferroae </em>donde predominó la seta tipo 1a.</p><p><strong>Conclusión.</strong> La seta más común en las especies que se incluyen en la tribu <em>Triatomini </em>(<em>T. maculata</em>, <em>E. mucronatus</em> y <em>P. geniculatus</em>) fue la tipo 3 y la seta tipo 1a es particular para la especie <em>B. ferroae, </em>taxón de la<em> </em>tribu Bolboderini, esto permite suponer que la morfología superficial de las setas podrían tener valor taxonómico a nivel de tribu.</p>

Leishmania braziliensis is the main causative agent of Tegumentary Leishmaniasis in the Americas. However, difficulties related to genome manipulation, experimental infection, and parasite growth have so far limited studies with this species. CRISPR-Cas9-based technology has made genome editing more accessible, and here we have successfully employed the LeishGEdit approach to attenuate L. braziliensis. We generated a transgenic cell line expressing Cas9 and T7 RNA polymerase, which was employed for the targeted deletion of centrin, a calcium-binding cytoskeletal protein involved in the centrosome duplication in eukaryotes. Centrin-deficient Leishmania exhibit growth arrest at the amastigote stage. Whole-genome sequencing of centrin-deficient L. braziliensis (LbCen−/−) did not indicate the presence of off-target mutations. In vitro, the growth rates of LbCen−/− and wild-type promastigotes were similar, but axenic and intracellular LbCen−/− amastigotes showed a multinucleated phenotype with impaired survival following macrophage infection. Upon inoculation into BALB/c mice, LbCen−/− were detected at an early time point but failed to induce lesion formation, contrary to control animals, infected with wild-type L. braziliensis. A significantly lower parasite burden was also observed in mice inoculated with LbCen−/−, differently from control mice. Given that centrin-deficient Leishmania sp. have become candidates for vaccine development, we propose that LbCen−/− can be further explored for the purposes of immunoprophylaxis against American Tegumentary Leishmaniasis.

In this study, we generated a transgenic strain of Leishmania braziliensis, an etiological agent associated with a diversity of clinical manifestations of leishmaniasis ranging from localized cutaneous to mucocutaneous to disseminated disease. Transgenic parasites expressing reporter proteins are valuable tools for studies of parasite biology, host-pathogen interactions, and anti-parasitic drug development. To this end, we constructed an L. braziliensis line stably expressing the reporters eGFP and luciferase (eGFP-LUC L. braziliensis). The integration cassette co-expressing the two reporters was targeted to the ribosomal locus (SSU) of the parasite genome. Transgenic parasites were characterized for their infectivity and stability both in vitro and in vivo. Parasite maintenance in axenic long-term culture in the absence of selective drugs did not alter expression of the two reporters or infection of BALB/c mice, indicating stability of the integrated cassette. Infectivity of eGFP-LUC, L. braziliensis, both in vivo and in vitro was similar to that obtained with the parental wild type strain. The possibility of L. braziliensis tracking and quantification using fluorescence and luminescence broadens the scope of research involving this neglected species, despite its importance in terms of public health concerning the leishmaniasis burden.