141Материалы V Всероссийской конференции с международным участием «Пренатальная диагностика и генетический паспорт -основы профилактической медицины в век нанотехнологий» ТОМ LXI ВЫПУСК 3/2012 ■ Методом флуоресцентного мечения одно-и двунитевых разрывов ДНК (TUNEL) проанализирована доля сперматозоидов с фрагментированной ДНК в образцах эякулята доноров спермы и у пациентов с нарушением фертильности. Доля сперматозоидов с фрагментированной ДНК в эякуляте пациентов со структурными перестройками кариотипа была повышена. Корреляции между долей сперматозоидов с фрагментированной ДНК и параметрами спермиологического анализа не выявлено. Показано наличие прямой линейной корреляции между долей сперматозоидов с фрагментированной ДНК и сперматозоидов с вакуолизированной формой головки. Для грушевидных, аморфных форм головок сперматозоидов или головок с патологией акросомы такой корреляции не выявлено.■ Ключевые слова: сперматозоиды человека; фрагментация ДНК; параметры спермограммы; морфологические формы головок сперматозоидов. ВВеДеНИеСреди супружеских пар детородного возраста частота бесплодия во многих странах, в том числе и в России, до-стигает 15 %, то есть каждый 5-6 брак является бесплодным [1,8]. Этиологическим фактором отсутствия беременности более чем в 50 % случаев являются нарушения мужской ре-продуктивной функции, при этом на долю изолированного мужского фактора приходится 25-30 %, в 20-30 % случаев заболевания выявлены у обоих супругов (сочетанный фак-тор) [24].В настоящее время одними из основных критериев оцен-ки мужской репродуктивной функции являются показатели параметров спермиологического анализа (концентрация, подвижность и доля морфологически нормальных форм сперматозоидов в эякуляте). Однако в 10-15 % случаев этио-логия супружеского бесплодия неизвестна (идиопатическое бесплодие) [24], что делает необходимым дальнейшее разви-тие лабораторных методов диагностики мужского бесплодия и оценки качества эякулята. Так, дискутируется введение в практику как одного из способов, оценивающих мужской репродуктивный потенциал, различных методов оценки це-лостности ДНК сперматозоида. Фрагментация ДНК сперма-тозоида связана с появлением одно-и двунитевых разрывов молекулы ДНК, некоторое количество которых необходимо для нормального сперматогенеза [32]. Однако при различ-ных нарушениях сперматогенеза степень повреждения ДНК увеличивается. Описано 6 основных причин, приводящих к возникновению разрывов в ДНК: 1. Апоптоз в процессе сперматогенеза, 2. Разрывы нитей ДНК в процессе компак-тизации хроматина в спермиогенезе, 3. Фрагментация ДНК в процессе транспорта сперматозоидов по семенным каналь-цам и придатку яичка, 4. Фрагментация ДНК, вызванная ак-тивностью каспаз и эндонуклеаз, 5. Действие химио-и ради-отерапии, 6. Действие факторов окружающей среды [5,21].Исследования показывают, что нарушение целостности ДНК сперматозоида не сказывается на его оплодотворяющей способности, однако является одной из основных причин, приводящих к остановке развития и элиминации эмбриона на ранних этапах эмбриогенеза [19,18]. Также на...
123Материалы V Всероссийской конференции с международным участием «Пренатальная диагностика и генетический паспорт -основы профилактической медицины в век нанотехнологий» ТОМ LXI ВЫПУСК 3/2012 ■ Описаны принципы отбора единичных сперматозоидов для оплодотворения, представлены данные литературы о взаимосвязи между морфофункциональными и биохимическими параметрами мужских половых клеток и структурно-функциональными особенностями организации их генома.■ Ключевые слова: вспомогательные репродуктивные технологии; ИКСИ морфологическая форма сперматозоида; хромосомный комплемент; целостность ДНК. Список сокращениймтДНК -митохондриальная ДНК Словарь ИМСИ (IMSI -motile sperm organellar morphology examination) ИКСИ с морфологическим отбором сперматозоидов.ПИКСИ (PICSI) -(physiologic ISCI) -ICSI с использова-нием гиалуроновой кислоты.FISH -fluorescent in situ hybridization -флуоресцентная гибридизация in situ. ВведениеАктивное развитие вспомогательных репродуктивных тех-нологий (ВРТ) помогает преодолевать различные формы нару-шения женской и мужской репродуктивной функции. Основные методы ВРТ, включающие в себя инвазивные процедуры, пред-усматривают стимуляцию овуляции и оплодотворение in vitro. Но, если количество получаемых ооцитов оценивается единица-ми, то в одной порции эякулята может содержаться до несколь-ких десятков миллионов сперматозоидов. Даже при значитель-ной олигозооспермии (снижение концентрации сперматозоидов в эякуляте) и криптозооспермии (единичные сперматозоиды в эякуляте) количество доступных для оплодотворения сперма-тозоидов значительно превышает количество получаемых яй-цеклеток. Таким образом, возникает закономерный вопрос о необходимости отбора сперматозоидов, методах и принципах селекции.Предложенный в 1992 году в Бельгии профессором Ван Штертейгем (Van Steirteghem) метод ИКСИ (внутрицитоплазма-тической инъекции сперматозоидов в ооцит -ICSI) позволил преодолевать определенные формы мужского бесплодия, связан-ные со значительным снижением концентрации, подвижности и определенными формами тератозооспермии. Уже тысячи детей рождены после процедуры ИКСИ. Одни исследователи не об-наруживают каких-либо отличий в частоте выявления пороков развития у детей, рожденных после естественного зачатия или в результате процедуры ЭКО/ИКСИ [10,78]. Другие утвержда-ют, что у таких детей частота врожденных пороков повышена [44, 8]. Это скорее можно объяснить особенностями выборки. До недавнего времени ИКСИ применялся только при тяжелой форме мужского бесплодия, но не всегда учитывался тот факт, что в 10-15 % случаев подобные патоспермии (олигозооспер-мия, криптозооспермия) связаны с хромосомными аберрациями в кариотипе и мутациями некоторых генов, что может являться причиной врожденных аномалий у детей [1]. Тем острее стоит вопрос о возможности прижизненного отбора единичных спер-матозоидов по внешним признакам и корреляции этих внешних
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.