Essential oils extracted from three plant species of the genus Origanum, Origanum vulgare subsp. hirtum, Origanum onites L. and Origanum marjorana L., were assayed as potential antibacterial agents for disinfection of rotifers Brachionus plicatilis. Survival of rotifers in seawater with added oregano essential oils was significantly higher than in the control treatment (P < 0.05). When rotifers were incubated in seawater with added oregano essential oils at a final concentration of 10 mg L À1 for 4 h, the numbers of total culturable bacteria were not significantly lower than in the control treatment (P > 0.05), while the numbers of presumptive Vibrio in rotifers were significantly reduced compared with the control treatment (P < 0.05).
Η ευπάθεια των φυτών στο παγετό συχνά οφείλεται στην παρουσία παγοπυρηνωτικών βακτηρίων και μυκήτων. Οι μικροοργανισμοί αυτοί προκαλούν πάγωμα στα φυτά εξαιτίας κάποιων πρωτεϊνών που παράγουν. Το φαινόμενο είναι γνωστό σαν βιολογική παγοπυρήνωση και αποτελεί αντικείμενο έρευνας για πάνω από 25 χρόνια. Η παρούσα μελέτη αποτελεί μέρος μίας ερευνητικής προσπάθειας με απώτερο στόχο τον προσδιορισμό των παραγόντων που σχετίζονται με το φαινόμενο της βιολογικής παγοπυρήνωσης σε ευκαρυωτικά συστήματα και την αξιοποίησή του στη βιοτεχνολογία και την γενετική βελτίωση φυτών για αντοχή σε παγετούς. Στο πρώτο μέρος αυτής της μελέτης χρησιμοποιήθηκαν διαγονιδικά φυτά καπνού μετασχηματισμένα με το παγοπυρηνωτικό γονίδιο inaZ του βακτηρίου Pseudomonas syringae. Το πρώτο μέρος αυτής της μελέτης αναφέρεται στην ανάπτυξη της αναγκαίας μεθοδολογίας για τον έλεγχο μεγάλου αριθμού ετερόζυγων (inaZ +/-) φυτών και την επιλογή εκείνων των φυτών που εξαιτίας ακτινοβόλησής τους με ακτίνες γ, επιβιώνουν μετά από έκθεση σε θερμοκρασίες παγετού. Η μεθοδολογία που αναπτύχθηκε για επιλογή ανθεκτικών φυτών περιελάμβανε δύο δοκιμές παγώματος. Η πρώτη μαζική παραγωγή έγινε σε στάδιο σποροφύτων, ενώ η δεύτερη έγινε σε δισκία φύλλου από τα επιλεγμένα φυτά της πρώτης δοκιμής. Και οι δύο δοκιμές παγώματος έγιναν σε μικροτριβλία που επέπλεαν στην επιφάνεια ψυχόμενου αλκοολόλουτρου σε θερμοκρασίες υπό το °C. Απομονώθηκαν έτσι φυτά καπνού με αυξημένη αντοχή σε υπό το μηδέν θερμοκρασίες. Το δεύτερο μέρος αυτής της μελέτης αφορά την απομόνωση ενός παγοπυρηνωτικού cDNA κλώνου από τον μύκητα F. acuminatum. Για τον σκοπό αυτό κατασκευάσθηκαν δύο cDNA βιβλιοθήκες σε φορέα λZAP II, που διέφεραν ως προς το μέσο μέγεθος των ενθέτων τους. Το παγοπυρηνωτικό cDNA απομονώθηκε χρησιμοποιώντας ένα συνδυασμό ετερόλογης υβριδοποίησης και μίας νέας λειτουργικής δοκιμής. Η δοκιμή αυτή είναι απλή και γρήγορη και μπορεί να χρησιμοποιηθεί και στην απομόνωση και άλλων παγοπυρηνωτικών γονιδίων. Βασίζεται στην επαγομένη έκφραση cDNA των κλώνων της βιβλιοθήκης και την ¨λειτουργική σάρωση¨ α) πλακών φάγων, μετά από μεταφορά των πρωτεϊνών τους σε φίλτρα μεμβρανών και β) αποικιών βακτηρίων μετά από in vivo εκτομή φαγεμιδίων. Η απομόνωση του παγοπυρηνωτικού cDNA κλώνου επιβεβαιώθηκε με μετασχηματισμό βακτηρίων και με έλεγχο της παγοπυρηνωτικής δράσης τους. Η παγοπυρηνωτική δράση του απομονωμένου κλώνου συγκρίθηκε με αυτή του γονιδίου inaZ και με την αντίστοιχη υγρής καλλιέργειας του μύκητα από τον οποίο απομονώθηκε. Ακολούθησε αλληλούχιση του παγοπυρηνωτικού cDNA κλώνου και in silico ανάλυση της προβλεπόμενης δομής της παγοπρωτεΐνης που κωδικοποιεί, σύμφωνα με την οποία στο μόριο της παγοπρωτεΐνης δεν υπάρχουν οι συντηρημένες επαναλήψεις αμινοξικών αλληλουχιών που χαρακτηρίζουν της βακτηριακές παγοπρωτεΐνες, αν και υπάρχουν ορισμένες ατελείς αμινοξικές επαναλήψεις. Η προβλεπόμενη δομή της παγοπρωτεΐνης έχει τμηματική ομολογία με γλυκοϋδρολάσες και περιέχει αντιπαγοτικά μοτίβα σε διαφορετικά τμήματα του μορίου.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.