Adenine overload promotes intratubular crystal precipitation and interstitial nephritis. We showed recently that these abnormalities are strongly attenuated in mice knockout for Toll-like receptors-2, -4, MyD88, ASC, or caspase-1. We now investigated whether NF-κB activation also plays a pathogenic role in this model. Adult male Munich-Wistar rats were distributed among three groups: C ( n = 17), receiving standard chow; ADE ( n = 17), given adenine in the chow at 0.7% for 1 wk and 0.5% for 2 wk; and ADE + pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC; n = 14), receiving adenine as above and the NF-κB inhibitor PDTC (120 mg·kg−1·day−1 in the drinking water). After 3 wk, widespread crystal deposition was seen in tubular lumina and in the renal interstitium, along with granuloma formation, collagen accumulation, intense tubulointerstitial proliferation, and increased interstitial expression of inflammatory mediators. Part of the crystals were segregated from tubular lumina by a newly formed cell layer and, at more advanced stages, appeared to be extruded to the interstitium. p65 nuclear translocation and IKK-α increased abundance indicated activation of the NF-κB system. PDTC treatment prevented p65 migration and normalized IKK-α, limited crystal shift to the interstitium, and strongly attenuated interstitial fibrosis/inflammation. These findings indicate that the complex inflammatory phenomena associated with this model depend, at least in part, on NF-κB activation, and suggest that the NF-κB system may become a therapeutic target in the treatment of chronic kidney disease.

We recently standardized a model (L(Lact)) of severe chronic kidney disease based on impaired nephrogenesis by suppression of angiotensin II activity during lactation (Machado FG, Poppi EP, Fanelli C, Malheiros DM, Zatz R, Fujihara CK. Am J Physiol Renal Physiol 294: F1345-F1353, 2008). In this new study of the L(Lact) model, we sought to gain further insight into renal injury mechanisms associated with this model and to verify whether the renoprotection obtained with the association of the angiotensin II receptor blocker losartan (L) and hydrochlorothiazide (H), which arrested renal injury in the remnant kidney model, would provide similar renoprotection. Twenty Munich-Wistar dams, each nursing six pups, were divided into control, untreated, and L(Lact) groups, given losartan (L; 250 mg·kg(-1)·day(-1)) until weaning. The male L(Lact) offspring remained untreated until 7 mo of age, when renal functional and structural parameters were studied in 17 of them, used as pretreatment control (L(Lact)Pre), and followed no further. The remaining rats were then divided among groups L(Lact)+V, untreated; L(Lact)+L, given L (50 mg·kg(-1)·day(-1)) now as a therapy; L(Lact)+H, given H (6 mg·kg(-1)·day(-1)); and L(Lact)+LH, given L and H. All parameters were reassessed 3 mo later in these groups and in age-matched controls. At this time, L(Lact) rats exhibited hypertension, severe albuminuria, glomerular damage, marked interstitial expansion/inflammation, enhanced cell proliferation, myofibroblast infiltration, and creatinine retention. L monotherapy normalized albuminuria and prevented hypertension and the progression of renal injury, inflammation, and myofibroblast infiltration. In contrast to the remnant model, the LH combination promoted only slight additional renoprotection, perhaps because of a limited tendency to retain sodium in L(Lact) rats.

Dedico esta dissertação ao meu Senhor Jesus, minha base, minha força, meu refúgio, minha alegria. Eu sou a videira, vós os ramos; quem permanece em mim, e eu, nele, esse dá muito fruto; porque sem mim nada podeis fazer. João 15:5 AGRADECIMENTOS À minha orientadora Dra. Clarice Kazue Fujihara, por fazer parte de uma etapa marcante em minha vida, lutando e vencendo as dificuldades comigo durante todos esses anos. Você é um referencial de guerreira! Jamais me esquecerei da sua disposição, até mesmo nas suas férias, em me ajudar. Muito obrigada! Ao Prof. Dr. Roberto Zatz, que cativa a todos pela simplicidade, humor e sobretudo pelo conhecimento. Obrigada pela disponibilidade, paciência e por me ensinar que as coisas belas estão nos mínimos detalhes! À Dra Denise Malheiros, a quem admiro tanto, responsável pela execução de grande parte dessa dissertação. Obrigada pelas indispensáveis discussões, ensinamentos e disposição para realizar tudo que era proposto! Ao Prof Dr. Niels Olsen Saraiva Camara, pelas cruciais colaborações e sugestões durante todo o desenvolvimento desta dissertação. Ao doutorando Danilo Candido de Almeida, pela disponibilidade e cuidado com cada experimento de biologia molecular. À aluna de iniciação Raquel Borges, que me auxiliou de todas as formas possíveis, com experimentos, palavras e risos. O trajeto que você percorreu comigo foi curto, mas sua presença foi indispensável! À Grasiela Barlette, pela total dedicação, pela disposição em vencer todos os desafios surgidos e pelo impecável cuidado com os cortes e colorações histológicas. À Camilla Fanelli, pelas discussões, sugestões e criatividade na execução dos experimentos de imuno-histoquímica! Obrigada pelo incentivo e por todos os esforços em me auxiliar desde minha iniciação científica! À Flavia Gomes Machado e Simone Arias, flores da minha vida. Cada experimento, cada detalhe, cada sugestão, cada discussão possui o perfume de vocês. Obrigada! Vocês foram muito além de companheiras, amigas, às vezes mães e, até mesmo, filhas. Aprendi e aprendo muito a cada dia com vocês! À Claudia Sena, por todos os ensinamentos e pelas infinitas dosagens bioquímicas realizadas. À Dra Walcy e Ivone de Oliveira pelo auxílio com as fotos e quantificação do colágeno tecidual. Ao Prof Dr. Krieger e Mariliza Velho Rodrigues, pela gentileza de ceder o primer de MCP-1. À Margarete, pela contribuição nos passos iniciais desta dissertação, pelo companheirismo e pelas inúmeras gargalhadas. À Dra Daisa David, pelas sugestões ao longo do estudo. Aos alunos de iniciação científica Neto, Victor e Beatriz, pelo ambiente agradável que vocês propiciaram e pela companhia durante esse percurso. À Janice Pião, pelo cuidado valioso com o biotério, pela força e pela amizade. À Vivian Viana e ao Ricardo, pelo apoio técnico no biotério. Ao Wagner, por ter sido sempre muito solícito em absolutamente tudo de que precisei. À Verônica, Neuziane e Ana Cristina, pela agradável companhia e pela força durante o estágio PAE. A todos do LIM-16, pelos momentos juntos, pelo carinho e pelo compan...