The metalloendopeptidase 24.15 (EP24.15) is ubiquitously present in the extracellular environment as a secreted protein. Outside the cell, this enzyme degrades several neuropeptides containing from 5 to 17 amino acids (e.g. gonadotropin releasing hormone, bradykinin, opioids and neurotensin). The constitutive secretion of EP24.15 from glioma C6 cells was demonstrated to be stimulated linearly by reduced concentrations of extracellular calcium. In the present report we demonstrate that extracellular calcium concentration has no effect on the total amount of the extracellular (cell associated + medium) enzyme. Indeed, immuno-cytochemical analyses by confocal and electron microscopy suggested that the absence of calcium favors the enzyme shedding from the plasma membrane into the medium. Two putative calcium-binding sites on EP24.15 (D93 and D159) were altered by site-directed mutagenesis to investigate their possible contribution to binding of the enzyme at the cell surface. These mutated recombinant proteins behave similarly to the wild-type enzyme regarding enzymatic activity, secondary structure, calcium sensitivity and immunoreactivity. However, immunocytochemical analyses by confocal microscopy consistently show a reduced ability of the D93A mutant to associate with the plasma membrane of glioma C6 cells when compared with the wild-type enzyme. These data and the model of the enzyme's structure as determined by X-ray diffraction suggest that D93 is located at the enzyme surface and is consistent with membrane association of EP24.15. Moreover, calcium was also observed to induce a major change in the EP24.15 cleavage site on distinctive fluorogenic substrates. These data suggest that calcium may be an important modulator of ep24.15 cell function. Abbreviations EP24.15; metalloendopeptidase 24.15; G6PD, glucose-6-phosphate dehydrogenase; PFA, paraformaldehyde.
Associação entre tempo de internação e evolução do estado nutricional de crianças internadas em um hospital universitário Association between length of hospital stay and evolution of nutritional status of children admitted to a university hospital Resumo Objetivo: Avaliar o estado nutricional de crianças hospitalizadas e identificar os fatores de risco associados com o tempo de internação hospitalar. Métodos: Estudo longitudinal, realizado com todas as crianças de 0 a 10 anos (n=200) internadas em um hospital universitário entre fevereiro e dezembro de 2011. Foram coletados dados de identificação, doença, presença de anemia e tempo de internação. Para avaliação do estado nutricional, utilizou-se o escore z para os indicadores de P/I, E/I, P/E e IMC/I. Utilizou-se o programa SPSS versão 17 para análise dos dados, considerando significante p<0,05. Resultados: Do total de crianças acompanhadas, 56% eram do sexo masculino e a média da idade foi de 53,28±47,65 meses. Verificou-se que as principais condições associadas ao maior tempo de internação foram faixa etária dos lactentes, diagnóstico de doença hematológica, baixo-peso e presença de anemia na internação. A manutenção do peso durante a hospitalização foi fator associado ao menor tempo de internação. Conclusões: Verificou-se que o baixo-peso na internação, a presença de anemia e a faixa etária do lactente foram os fatores determinantes de maior tempo de internação. Assim, o acompanhamento do estado nutricional das crianças hospitalizadas foi fundamental para o maior entendimento em relação aos fatores associados ao maior tempo de hospitalização, possibilitando melhor abordagem para manutenção e/ou recuperação do estado nutricional.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.