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The success of IVP is ultimately dependent on the number and quality of the cumulus-oocyte complexes (COC) harvested during the OPU procedure. Several factors appear to be critical to oocyte quality including follicle size, environment factors such as heatstress, genetic background, age and lactation status of donor animals, all having a remarkable influence on the results of IVP. The aim of this review is to highlight some critical areas that can help veterinary practitioners to enhance OPU efficiency and successfully implement IVP into their routine practice. Focus will be given to recent findings in the literature and underlying physiological aspects that may be interfering with the quality of oocytes addressed to IVP in cattle at younger ages (calves and prepubertal heifers), pregnant vs nonpregnant status, and possible interactions with lactation and days postpartum during OPU.

Our expanding knowledge of ovarian function during the buffalo estrous cycle has given new approaches for the precise synchronization of follicular development and ovulation to apply consistently assisted reproductive technologies (ART). Recent synchronization protocols are designed to control both luteal and follicular function and permit fixed-time AI with high pregnancy rates during the breeding (autumn-winter) and nonbreeding (springsummer) seasons. Additionally, allow the initiation of superstimulatory treatments at a self-appointed time and provide opportunities to do fixed-time AI in donors and fixed-time embryo transfer in recipients. However, due the scarce results of in vivo embryo recovery in superovulated buffaloes, the association of ovum pick-up (OPU) with in vitro embryo production (IVEP) represents an alternative method of exploiting the genetics of high yeld buffaloes. Nevertheless, several factors appear to be critical to OPU/IVEP efficiency, including antral follicle population, follicular diameter, environment, farm and category of donor. This review discusses a number of key points related to the manipulation of ovarian follicular growth to improve assisted reproductive technologies in buffalo.

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We evaluated the effect of the antral follicle count (AFC) on ovarian follicular dynamics, pregnancy rates, progesterone concentrations, and transcriptional patterns of genes in Nelore cattle (Bos taurus indicus) after a timed artificial insemination (TAI) programme. Cows were separated based on the AFC, and those with a high AFC showed a larger (P < 0.0001) ovarian diameter and area than those with a very low AFC. Females with a very low AFC exhibited a larger (P < 0.01) diameter of the dominant follicle at TAI (13.6 ± 0.3 vs. 12.2 ± 0.4 mm) and a tendency (P = 0.06) to have different serum progesterone concentrations (2.9 ± 0.3 vs. 2.1 ± 0.3 ng/mL; on day 18, considering day 0 as the beginning of the synchronization protocol) than those with a high AFC. The pregnancy rate was higher (P ≤ 0.05) in animals with a very low (57.9%) and low (53.1%) AFC than in those with a high AFC (45.2%). The expression of genes related to intercellular communication, meiotic control, epigenetic modulation, cell division, follicular growth, cell maintenance, steroidogenesis and cellular stress response was assessed on day 5. In females with a low AFC, 8 and 21 genes in oocytes and cumulus cells, respectively, were upregulated (P < 0.05), while 3 and 6 genes in oocytes and cumulus cells, respectively, were downregulated. The results described here will help elucidate the differences in ovarian physiology and the reproductive success of Bos indicus females with a low or high AFC.

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The aim of the present study was to evaluate small follicle number, oocyte yield, and in vitro embryo production (IVEP) in Zebu beef cows treated long term with a GnRH agonist to suppress ovarian follicular growth. Nelore (Bos indicus) cows (n = 20) showing regular estrous cycles were randomly assigned to one of two groups: control (n = 10, placebo ear implant without a GnRH agonist); GnRH agonist (n = 10, GnRH agonist ear implant containing 9.4-mg deslorelin). All cows underwent an ovum pick-up (OPU) session 14 days (Day 14) before the start of treatments (Day 0) followed by seven OPU-IVEP procedures at 30-day intervals (Days 0, 30, 60, 90, 120, 150, and 180). Semen from a single batch of a previously tested bull was used for all the IVEP. Cows treated with agonist reported a decrease over time in the proportion of animals with a (CL; P ≤ 0.05) and large follicles (>10 mm, P ≤ 0.05). These cows had a lesser number of medium + large follicles (>5 mm; 1.74 ± 0.5 vs. 4.13 ± 0.5; P ≤ 0.05), greater number of small follicles (2-5 mm; 44.3 ± 2.8 vs. 30.8 ± 1.8; P ≤ 0.05), greater yield of cumulus-oocyte complexes (COCs; 21.0 ± 2.3 vs. 15.6 ± 1.9; P ≤ 0.05), greater proportion of COCs cultured (79.2 vs. 73.9%; P ≤ 0.05), COCs cleaved (10.6 ± 1.5 vs. 6.8 ± 1.1, P ≤ 0.05), and cleaved rate (52.8 vs. 44.3%; P ≤ 0.05) compared with control cows. The number (3.4 ± 0.7 vs. 3.0 ± 0.6; P > 0.05) and proportion (16.5 vs. 19.1%; P > 0.05) of blastocysts produced were similar between agonist and control cows, respectively. The study has shown that Zebu beef cows treated long term with a GnRH agonist had follicular growth restricted to small follicles. This did not compromise the ability of oocytes to undergo IVF and embryonic development.

À Deus, por me dar forças para seguir em frente em todos os momentos da minha vida. Ao Prof. Pietro, meu exemplo de competência, sabedoria, profissionalismo, humildade, serenidade e dedicação. Obrigado pela paciência, confiança, pelos ensinamentos e por todo apoio desde o começo. Não tenho palavras para descrever minha alegria e satisfação em fazer parte da sua equipe! Vou levar seus conselhos e ensinamentos para vida toda! Serei sempre grato professor! Muito obrigado! Ao Evanil Pires de Campos (Nil), pela confiança depositada em meu trabalho e pelo fundamental apoio para que meu projeto de mestrado fosse concretizado! Muito obrigado Nil! A empresa WTA-FIV (Yeda e Osnir) por acreditarem no projeto e fornecerem todos os subsídios necessários para a realização deste trabalho. Agradeço também a excelente equipe (Aline, Marina e Favati) por estarem sempre dispostos a me ajudar em todos os experimentos! Muito obrigado Ao meu amigo-irmão Rodolfo Mingoti (Badá), por ter sido a primeira pessoa a me acolher na universidade, antes mesmo de nos conhecermos pessoalmente. Obrigado pelo carinho, atenção, conselhos, puxões de orelha e pelas inúmeras oportunidades que tive de aprender algo com você. Sempre me forçando a aprender e evoluir como técnico e como pessoa! Para mim você é um grande exemplo. Sem dúvidas, devo a você grande parte deste trabalho. Muito obrigado meu irmão! Conte sempre comigo! Aos meus amigos do departamento Rômulo (Doidão), Marcos (Colli), Flávia (Fráaviaa) pelo carinho, amizade e por sempre me tratarem tão bem! Sou muito grato a vocês! A dupla inseparável Carlos Eduardo (Dado), e Felipe (Felipão) muito obrigado pelo companheirismo amizade e risadas! Aos novos amigos Guilherme (Gaúcho) e Walter (Tuba) e Lisbek! E a todos outros amigos do VRA que de alguma maneira fizeram parte desta caminhada! Aos amigos Emiliana (Mili) por ter confiado em meu trabalho e me ajudado desde o começo com os experimentos de aspiração, Bruno Monteiro (Brunão) pela paciência, conselhos e risadas , Laís (Kokota) ,Bruno Freitas (Karboxy) e Júlia. Ao meu amigo e parceiro de trabalho Luciano Mundim de Carvalho, pela parceria, apoio, paciência e por todos os ensinamentos! Admiro muito sua competência, seu caráter e humildade! Muito obrigado! Ao amigo Alexandre Hênryli de Souza (Alex), pelo total apoio e amizade desde o início do projeto. Agradeço imensamente por todos os ensinamentos, conselhos pessoais e toda ajuda dispensada em meu trabalho! Tenho muita admiração, carinho e respeito por você! Muito obrigado! Ao meu amigo Alexandre José Azrak por todos ensinamentos e por toda contribuição desde o início da minha carreira, desde a época de estágios da faculdade até hoje, sempre se propondo a me ajudar! Muito Obrigado Lê! A Camila Morais, por ter feito parte da minha vida, por ter me apoiado, me acompanhado e me incentivado a seguir em frente nos momentos mais difíceis. Muito obrigado por tudo que fez por mim! Serei para sempre grato! Aos meus queridos irmãos Felipe (Benê), Fernandão, Franklin, Renanzinho, Rodrigão, Pedrão e Vagner po...