Chrysotile is one of the six types of asbestos, and it is the only one that can still be commercialized in many countries. Exposure to other types of asbestos has been associated with serious diseases, such as lung carcinomas and pleural mesotheliomas. The association of chrysotile exposure with disease is controversial. However, in vitro studies show the mutagenic potential of chrysotile, which can induce DNA and cell damage. The present work aimed to analyze alterations in lung small cell carcinoma cultures after 48 h of chrysotile exposure, followed by 2, 4 and 8 days of recovery in fiber-free culture medium. Some alterations, such as aneuploid cell formation, increased number of cells in G2/M phase and cells in multipolar mitosis were observed even after 8 days of recovery. The presence of chrysotile fibers in the cell cultures was detected and cell morphology was observed by laser scanning confocal microscopy. After 4 and 8 days of recovery, only a few chrysotile fragments were present in some cells, and the cellular morphology was similar to that of control cells. Cells transfected with the GFP-tagged α-tubulin plasmid were treated with chrysotile for 24 or 48 h and cells in multipolar mitosis were observed by time-lapse microscopy. Fates of these cells were established: retention in metaphase, cell death, progression through M phase generating more than two daughter cells or cell fusion during telophase or cytokinesis. Some of them were related to the formation of aneuploid cells and cells with abnormal number of centrosomes.
Beatriz de Araujo Cortez Diferentes abordagens para o entendimento da aneuploidia: interferindo na mitose com o uso de crisotila e vincristina Different approaches to understand aneuploidy: interfering with mitosis using chrysotile and vincristine
Interação da crisotila com células de carcinoma de pulmão humano em cultura: interferência com a mitose utilizando genes repórteres e microscopia em tempo real e estudo do potencial genotóxico. 4 Dedicatória Aos meus queridos pais, Tadeu e Leda. 5 Agradecimentos À Profa. Dra. Glaucia Maria Machado Santelli, pela orientação, incentivo e amizade nestes 6 anos de laboratório, pela confiança nos momentos difíceis e por me mostrar quão bonita a biologia pode ser;A todos os meus professores da graduação e pós-graduação, por tudo o que me ensinaram sobre biologia e acrescentaram na minha formação;Aos meus pais, Leda e Tadeu, por acreditarem em mim e na minha escolha, além de me darem todas as condições necessárias e principalmente amor para que eu chegasse até aqui;Aos meus irmãos Isabel e Fernando pelos conselhos e críticas já cotidianas, e por me darem segurança, pois que sei que sempre estaremos juntos;Ao Raphael, meu namorado, por compartilhar comigo suas idéias e seu tempo, pelo seu sempre bom humor e tranqüilidade, e pelos deliciosos jantares em Córdoba; Ao Prof. Alberto Augusto Ribeiro, por me orientar e apoiar nas monitorias de Biologia Celular, tão importantes na minha formação; Ao Dr. Alfredo Cáceres, por me receber em seu laboratório dentro do Instituto de Investigación Medica Mercedes & Martin Ferreyra, e pela grande ajuda nos experimentos de time-lapse;Ao pessoal da Olympus do Brasil, em especial a Sara, João e Edu, por me cederem alguns meses de microscópio além de todo o apoio para a viagem à Argentina; Ao Prof. Dr. Fabio Siviero e à Dra. Paula Rezende, por me mostrarem o incrível mundo da biologia molecular, e por estarem presentes em todos esses anos compartilhando ótimos momentos de laboratório; Ao Jonatas, Paula e Amanda pelas conversas, discussões (úteis ou nem tanto), confidências e muitas risadas dentro do quadrado; Ao Marcel, pela amizade desde o primeiro dia de laboratório, sempre com seu bom humor, bom gosto e disposição a ajudar; À Raquel, Camila, Marina, Michelle, Ludi e Evandro, por todas as conversas sobre experimentos e pela ajuda constante no fluxo, bancada, e citômetro, e por deixarem o laboratório tão animado; 6 À Dra. Vanessa Freitas, pela companhia, ajuda e incentivo nas inúmeras tentativas de time-lapse; À Dra. Marisa Ionta, por sempre estar disposta a discutir e ajudar nos experimentos, ajudando a todos nas dificuldades da biologia celular;Ao Mingau (André), pelos gelos no bolso, gelo seco no cabelo, e pela trilha sonora ao vivo do laboratório, ou seja, por me divertir mesmo quando me pentelha; À Natalia, pelas fundamentais aulas de espanhol e pela companhia;Ao Felippe Lourenço Claro por ser meu companheiro de monitorias e por me ajudar com as questões do departamento a distância; À Dona Nancy, pela companhia e paciência, e por colocar o laboratório em ordem diariamente;A Laura, Moni, José, Sole, Luján, Ivan, Viky, Flor e Ceci, meus amigos argentinos de laboratório, por toda a ajuda com os experimentos e por terem me recebido tão bem, e ao Gonzalo e Nacho, pelas muitas conversa...
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