The a-amylase (a-1-4-D-glucan glucanohydrolase; EC 3.2.1.1) secreted by Geobacillus stearotermophilus was purified and characterized. Maximum enzyme production was achieved after 24 h cultivation at pH 7.0 and 55°C. The enzyme was active in a broad temperature range, between 50 and 80°C, with an optimum at 70°C; and maximum activity was at pH 7.0. The enzyme was purified using 80% ammonium sulfate precipitation, dialysis, Sephadex G-100 gel filtration, and DEAE-cellulose column chromatography, with a 46-fold and 65% recovery and showed a MW of 63 kDa by SDS-PAGE. It was determined that the purified enzyme was stable at 50 and 60°C, and pH 7.0. It was determined that the purified enzyme was stable at 50 and 60°C at the end of 2 h. The enzyme retained 100% activity pH 7.0 at the end of 3 h.
The aim of this study is the production, purification, and characterisation of thermostable raw starch hydrolyzing αamylase produced by Bacillus mojavensis SO-10. The maximum production conditions of α-amylase were found at 36 th hour, 35 °C and pH 7.0. We utilized three steps to purify the thermostable α-amylase and as a result, 34-fold and 18% yield were obtained. The molecular weight of purified α-amylase was determined as 73 kD. The Km and Vmax rates were detected as 0.010 mM and 3.38 µmol min −1 , respectively. This purified α-amylase exhibited the highest activity at pH 5.0-6.0 and 70 ºC and showed stability over a wide variety of pH and temperature at 4.0-8.0, and 40-50 ºC, respectively. The thermostable purified α-amylase exhibited stability in the presence of denaturing agents and heavy metal ions. The purified enzyme hydrolyzed the raw starches of corn and wheat grains in the ratio of 36.7% and 39.2% respectively. The end-yields of soluble starch hydrolysis were analyzed by thin-layer chromatography (TLC). In addition, the usage of purified α-amylase in clarification of apple juice and domestic washing detergent industries were evaluated.
The purpose of this work, investigation of radiation attenuation characteristics, such as mass attenuation coefficient (μ/ρ), molar extinction coefficient (ε), effective atomic number (Zeff), and electron density (NE), of isolated bacteria from soil samples taken from Diyarbakır in Turkey. The experiments were performed using a narrow beam geometry with the help of the a high-resolution Si(Li) detector and three different radioactive sources at 15 different photon energies. The ε, Zeff, and NE values for some bacteria isolated from soil, such as Bacillus megaterium, Bacillus simplex, Bacillus subtilis, and commercially purchased Geobacillus stearothermophilus bacterium, were obtained from the measured μ/ρ results in the energy range from 13.94 to 88.04 keV. The experimental values were checked with two different theoretical results and good agreement was observed among them. The results show that Bacillus simplex bacterium has the highest values of μ/ρ and Zeff and Bacillus subtilis bacterium has the biggest values of ε and NE among the present bacteria.
Öz Amilazlar; bitkiler, hayvanlar ve mikroorganizmalar tarafından üretilen nişastayı parçalayan enzimlerdir. Mikroorganizmalar tarafından üretilen amilazlar; eczacılık, gıda, deterjan, tekstil, kağıt ve kağıt hamuru endüstrisi gibi çok çeşitli endüstriyel uygulamalarda kullanılabilme özelliğine sahiptir. Bununla birlikte, amilaz üreten mikroorganizmaların izolasyonunda hala kısıtlamalar vardır. Işgın bitkisi tıp başta olmak üzere birçok alanda kullanılan önemli bir bitkidir. Bu çalışmanın amacı yararlı ışgın bitkisinden bakterinin izolasyonu gerçekleştirerek biyoteknolojik öneme sahip olan amilazın elde edilmesidir. Bakteri izolasyonu dilüsyon tekniği kullanılarak yapıldı. Bitki kök kısmında bulunan toprak alınarak seyreltme işlemi gerçekleştirildi. İzolasyon sonrası morfolojik, fizyolojik ve biyokimyasal testler yapıldı. Mikroorganizmanın tür teşhisi için 16 S rRNA analizi gerçekleştirildi. Bakteri sekans analiz sonucunda 864 baz çiftine sahip Bacillus atrophaeus olduğu tespit edildi. Tanımlamada etkili olan biyokimyasal testler sonucunda bakterinin gram pozitif (+), basil ve hareketsiz olduğu belirlendi. Katalaz, hemoliz ve glikoz un pozitif (+) sonuç verdiği; oksidaz, H2S ve indol gibi biyokimyasal testlerin negatif (-) olduğu tespit edildi. Öncelikle bakteri üremesinin optimizasyonu sağlandı. Zaman, sıcaklık ve pH gibi bakteri üremesine doğrudan etki eden önemli parametreler çalışıldı. Optimum bakteri üretimi sırasıyla 72.saat, 30 o C ve pH 6.0 belirlendi. Güçlü amilaz üretimini belirlemek amacıyla nişastalı katı besi yerinde bakteriler üretildi. İnkübasyon sonrası lügol çözeltisi kullanılarak mikroorganizmanın amilaz ürettiği tespit edildi. Amilaz sentezlendiği belirlenen bakterinin optimal üretim koşulları tespit edildi. Bacillus atrophaeus'tan α-amilaz'ın maksimum üretim koşulları 36. saat, 35 o C ve pH 6.0 olduğu görüldü. Optimum şartlarda üretilen bakterinin süpernatant kısmı kullanılarak enzim karakterizasyonu gerçekleştirildi. Enzim sıcaklık ve pH'sı sırasıyla 40 o C ve pH 6.0 da maksimum aktivite gösterdiği tespit edildi. Bu tespitler sonucunda istenilen bakteri elde edildi. Tanımlanan ve amilaz ürettiği tespit edilen bakteri, farklı biyoteknolojik alanlarda kullanılma özelliğine sahip olduğu belirlendi.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.