Селекционирован мутант rib 1-86 P. guilliermondii, у которого рибофлавинзависимость супрессируется регуляторной мутацией rib81, но не таковой rib80. Двойной мутант rib 1-86 rib81 характеризуется низким уровнем активности ГТФ-циклогидролазы, синтез которой слабо регулируется железом. По-видимому, мутация rib 1-86 лежит в промоторной области гена RIBi, кодирующего ГТФ-циклогидролазу.Введение. Биосинтез рибофлавина (РФ) у дрожжей P. guilliermondii регулируется двумя генами негативного типа действия RIB80, RIB81 и двумя -позитивного -RIB83, RIB84 [1-3]. Дефицит железа в среде, а также мутации rib80 и rib81 вызывают дерепрессию биосинтеза большинства ферментов флавиногенеза и, как следствие, сверхсинтез РФ дрожжами. Мутанты rib83 и rib84 неспособны к сверхсинтезу этого витамина в условиях дефицита железа.До сих пор не удалось селекционировать мутанты дрожжей с поврежденными промоторными зонами структурных генов биосинтеза РФ. На основе работ по изучению регуляции биосинтеза изо-1-цитохрома с и других дрожжевых ферментов известно, что в этих зонах находится несколько локусов (UAS, ТАТА, I), являющихся акцепторами различных регуляторных сигналов и эффективно влияющих на уровень экспрессии структурного гена [4]. Поэтому выделение мутантов с поврежденными элементами промотора является важной предпосылкой создания модели регуляции экспрессии исследуемого гена.В настоящем сообщении приводятся данные о выделении мутанта ribl-86 P. guilliermondii с нарушенной регуляцией флавиногенеза, у которого, по-видимому, повреждена промоторная зона гена RIBl y кодирующего ГТФ-циклогидролазу.Материалы и методы. Генотипы использованных в работе штаммов представлены в таблице. Культуры дрожжей выращивали в синтетической модифицированной среде Беркгольдера. Состав среды и методы генетического анализа описаны ранее [5]. Среду от металлов очищали с помощью 8-оксихинолина [6]. Биомассу дрожжей определяли турбидиметрически на фотоэлектроколориметре ФЭК-56М (кювета 3 мм, светофильтр № 6). Концентрацию РФ в среде измеряли флюорометрически на приборе ЭФ-ЗМ. Активность ГТФ-циклогидролазы и РФ-синтазы определяли, используя известные методы [7, 8]. В таблице представлены средние величины, полученные в двух -трех экспериментах.Результаты и обсуждение. Для выделения новых мутантов с дефектом позитивного контроля биосинтеза РФ применяли в качестве исходного штамм S131/6, который из-за наличия у него мутации rib81 способен к сверхсинтезу РФ в условиях оптимального для роста обеспечения железом (см. таблицу). Клоны с резко сниженной интенсивног. М. !ПАВЛОВСКИЙ, Н. Н. СТЕНЧУК, Б. В. КШАНОВСКАЯ, 1991 96 ISSN 0233-7057. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. \s о