-The objectives of this work were to evaluate the frequency of polyembryony, and to identify zygotic and nucellar seedlings of Citrus volkameriana using RAPD. Twenty-five polyembryonic and eight monoembryonic seeds were cultivated in vitro for six months. DNA from seedlings was extracted and used in combination with five RAPD primers to identify zygotic or nucellar origin of the seedlings. Environmental conditions of the year affected significantly (P≤0.05) the morphological characteristics of fruits and the number of embryos per seed. Polyembryonic seeds ranged from 30.9%, 44.8% to 54.4% over three years. Morphological characteristic was not correlated with polyembryony. In vitro culture enable all embryos of each seed to grow, favoring the percentage of seedlings identified as zygotic. In polyembryonic and monoembryonic seeds, 25.9% and 87.5% of the seedlings, respectively, were sexually originated. In polyembryonic seeds, not all zygotic seedlings were produced by small embryos located at the micropyle.Index terms: Citrus volkameriana, rootstock, embryo culture, molecular markers, polymorphism. Termos para indexação: Citrus volkameriana, porta-enxerto, cultura de embriões, marcadores moleculares, polimorfismo. Poliembrionia e identificação de seedlings zigóticos e nucelares de limão volkameriano com RAPD
Pinus patula Schiede ex Schltdl. et Cham. es un pino endémico de México, ampliamente utilizado en plantaciones comerciales en varios países. La propagación masiva de materiales mejorados de esta especie mediante el enraizado de estacas, proporciona la oportunidad para aumentar y uniformar su productividad. Se comparó el sustrato (perlita vs. mezcla de turba con vermiculita), edad de planta madre (12, 18 y 24 meses) y dosis de ácido indolbutírico (AIB) (0, 5000 y 10 000 ppm) (i.e., mg L-1) en el enraizado de estacas de P. patula, mediante un arreglo factorial en diseño experimental de bloques completos al azar. La supervivencia, enraizado, número y longitud de raíces, presencia de raíces secundarias y desarrollo de callo se evaluaron después de 14 semanas. En el sustrato con perlita se presentó el mayor porcentaje de enraizado de las estacas (21.4 vs. 14.7 %) y fue evidente el efecto de la dosis de AIB y edad de planta madre en la respuesta de las estacas. La capacidad de enraizado se redujo casi a la mitad (de 29.2 a 15.8 % en el sustrato de perlita) al aumentar de 12 a 24 meses la edad de las plantas madre. El AIB inhibió la formación de raíces en las estacas de menor edad, pero no en las de 24 meses. El control de los factores evaluados permitió obtener más de 50 % de enraizado en uno de los tratamientos, valor aceptable en un programa operativo de clonación.
Postgraduados. Carretera México-Texcoco km 36.5. C. P. 56230. Montecillo, Texcoco, Edo. de México.Correo-e: marcosjc@colpos.mx, Tel.: 595 95 20246 ext. 1454 (*Autor para correspondencia). 4 Universidad Autónoma Chapingo-CRUAN. km 38.5 Carretera México-Texcoco. C. P. 56230. Chapingo, Texcoco, Edo. de México. AbstractT he effect of substrate, type of cutting and indole 3-butyric acid (IBA) concentration on the rooting of Pinus leiophylla cuttings was evaluated with the goal of multiplying progenies of half-sib families of this species, which have showed superior growth and positive response against Toumeyella pinicola attack. Two types of substrates (100 % perlite vs. a mix of peat, perlite, vermiculite at a ratio of 1:1:1), two types of cuttings (apical vs. basal) and two concentrations of IBA (0 vs. 10,000 ppm) were used. Probability and percentage of rooting, growth of cuttings and characteristics of the roots were evaluated. Results indicate that using basal cuttings is 3.5 times more likely to induce rooting of P. leiophylla than using apical cuttings. The treatment consisting of the mixture of peatperlite-vermiculite, a basal cutting and 10,000 ppm of IBA produced 45.3 % rooting (highest percentage), while the control only yielded 8.6 % rooting (perlite, basal cutting and without IBA). Interactions with the type of substrate showed significant differences (P ≤ 0.05) in the growth of the cuttings. The use of perlite and application of IBA promoted a greater number of roots, particularly in the basal cuttings of P. leiophylla. ResumenE l efecto del sustrato, tipo de estaca y concentración de ácido indolbutírico (AIB) se evaluó en el enraizado de estacas de Pinus leiophylla con el propósito de multiplicar progenies de familias de medios hermanos con crecimiento sobresaliente. Para ello se utilizaron dos tipos de sustratos (agrolita y una mezcla de turba-agrolita-vermiculita 1:1:1), dos tipos de estacas (apicales y basales) y dos concentraciones de AIB (0 y 10,000 ppm). La probabilidad y porcentaje de enraizado, crecimiento de la estaca y características de las raíces formadas de P. leiophylla se evaluaron. Los resultados indican que usando estacas basales es 3.5 veces más probable que el enraizamiento de P. leiophylla sea exitoso que utilizando estacas apicales. El tratamiento formado por la mezcla de turba-agrolita-vermiculita, estaca basal y 10,000 ppm de AIB produjo 45.3 % de enraizamiento (mayor porcentaje), mientras que con el testigo solo se obtuvo 8.6 % de enraizamiento (agrolita, estaca basal y sin AIB). Las interacciones que incluyeron el tipo de sustrato mostraron diferencias significativas (P ≤ 0.05) en el crecimiento de la estaca. El uso de agrolita y la aplicación de AIB favorecieron un mayor número de raíces, particularmente en las estacas tipo basal de P. leiophylla. Palabras clave: Ácido 3-indolbutírico, clon, morfología de raíces, enraizamiento de estacas.
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