Las polillas Tecia solanivora y Symmetrischema tangolias (Lepidoptera: Gelechiidae) ocasionan daños significativos a los tubérculos de Solanum tuberosum. El objetivo de este estudio fue aislar y caracterizar bioquímicamente las amilasas presentes en los diferentes estadios larvales de estas polillas. Para efectos comparativos se extrajo las proteínas solubles de estadios larvales criados en el laboratorio para determinar espectrofotométricamente diferencias en la concentración de cada extracto. Se calculó el peso promedio de cada larva: T. solanivora resultó ser más pesada y de ella se obtuvo más proteína soluble en comparación con S. tangolias. La actividad amilásica en los extractos proteicos fue identificada mediante degradación de almidones. Extractos de los estadios IV de ambas polillas, incubados a diferentes intervalos de tiempo, presentaron actividades amilásicas diferentes, aunque resultaron bastante similares cuando se leyeron los resultados de cada extracto tarde a las 72 h. Mediante electroforesis de los extractos proteicos de las larvas de las dos especies, migraron alrededor de 11 bandas proteicas entre 225 y 10 kDa. Entre estas bandas, las amilasas fueron reconocidas en ambas especies y en los 4 estadios como bandas de 50 kDa. La(s) banda(s) probablemente isofórmicas de esta enzima aparecieron muy definidas en los estadios I y II, en contraste con las formas difusas encontradas en los estadios III y IV. La actividad amilásica no estuvo ligada a las concentraciones proteicas sino a las condiciones de reacción. El estudio sugiere la posibilidad de diseñar formas inéditas de biocontrol contra estas plagas.
RESUMEN.-Muestras de hongos fueron recolectadas en las estribaciones occidentales y orientales de Ecuador en las provincias de Pichincha, Sucumbíos, Orellana y Santo Domingo de los Tsáchilas. Los hongos fueron asépticamente aislados y multiplicados en Agar Papa Dextrosa (PDA) o Agar Malta (MA). Se observó su crecimiento y luego fueron identificados molecularmente en base a la secuencia de la región ITS1 e ITS2 del ADN ribosomal. Las secuencias obtenidas fueron comparadas con otras similares en Genbank para su análisis filogenético e identificación. Las cepas aisladas e identificadas fueron sembradas en Carboximetilcelulosa (CMC) para evaluar sus capacidades enzimáticas de degradación celulósica. Diámetros (en mm) de los halos de hidrólisis fueron continuamente monitoreados durante 7 y 14 días de crecimiento, observándose halos más grandes en las cepas H23.2 y H24 del género Pestalotiopsis y la de L4 del género Neonothopanus con medias significativas. Mayor actividad extracelulásica se registró en los sobrenadantes extraídos de los géneros Neonothopanus, Pestalotiopsis y Gymnopilus a los 14 días de cultivo en el intervalo de 24 h. Esta actividad enzimática en algunos casos no guardó una relación proporcional con la concentración proteica en µg/ml de los sobrenadantes extraídos de los diferentes cultivos.ABSTRACT.-Fungal samples were collected in the Western and Eastern Andean foothills of Ecuador in the provinces of Pichincha, Sucumbíos, Orellana and Santo Domingo de los Tsáchilas. The fungi were aseptically isolated and increased on Potato Dextrose Agar (PDA) or Malt Agar (MA). Their growth characteristics were recorded, and molecularly identified on the basis of ribosomal RNA internal transcribed spacer (ITS) region. The sequences were compared with other similar sequences on GenBank for phylogenetic analysis and identification. The isolated and identified strains were plated on Carboxymethylcellulose (CMC) to evaluate their enzymatic capabilities to degrade cellulose. Diameters (in mm) of the halos of hydrolysis were continuously monitored during 7-14 days of growth. The halos in strains H23.2 and H24 of the genus Pestalotiopsis and of L4 of the genus Neonothopanus had halo diameters significantly bigger than most of the other fungal samples tested. Increased extracellulolytic activity was recorded in the supernatants extracted from the genera Pestalotiopsis, Neonothopanus, and Gymnopilus after 14 days of culture in the 24-hour interval. This enzyme activity, in some cases, was not proportional to the protein concentration in µg/ml of the supernatants extracted from the different cultures.
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