Objectives To evaluate whether a ternary system composed of hydroxypropyl-bcyclodextrin (HP-bCD) further encapsulated into egg phosphatidylcholine liposomes (LUV) could prolong the action and reduce the toxicity of ropivacaine (RVC). Methods Dynamic light scattering and NMR were used to characterize the inclusion complex (RVC : HP-bCD), liposomal (RVC : LUV) and ternary (LUV : RVC : HP-bCD) systems containing 0.25% RVC. Their encapsulation efficiency, release kinetics, in-vitro cytotoxicity and in-vivo anaesthetic effect (paw-withdraw tests in mice) were also evaluated. Key findings 1 : 1 RVC : HP-bCD inclusion complex was encapsulated in liposomes (220.2 AE 20.3 nm size, polydispersity <0.25, zeta potentials = À31.7 AE 1.4 mV). NMR (diffusion-ordered spectroscopy (DOSY)) revealed stronger anaesthetic binding to LUV : RVC : HP-bCD (K a = 342 M À1 ) than to RVC : HP-bCD (K a = 128 M À1 ) or liposomal formulation (K a = 22 M À1 ). The formulations promoted in-vitro sustained drug release and partially reverted the cytotoxicity of RVC against 3T3 fibroblasts in the profile: LUV : RVC : HP-bCD ≥ RVC : HP-bCD > RVC : LUV. Accordingly, in-vivo sensory block of free RVC (180 min) was prolonged ca. 1.7 times with the ternary system and RVC : HP-bCD (300 min) and 1.3 times with RVC : LUV (240 min). Conclusions These results confirm the suitability of this double-carrier system in clinical practice, to decrease the toxicity and prolong the anaesthesia time evoked by RVC.
DEDICATÓRIA ______________________________________________________________________________ v À minha família, em especial, meus pais, José Lauro e Claudete, meus irmãos, Saulo e Laura, por acreditarem no meu sonho e serem a base da minha vida; Ao Vô Pedro (in memorian) que sempre apoiou os estudos; Ao Du, pela confiança, carinho e apoio. AGRADECIMENTOS ______________________________________________________________________________ vi Agradeço primeiro a Deus, sem Ele eu nada seria; Aos meus pais, José Lauro e Claudete, aos quais tenho a maior admiração do mundo. Eu amo muito vocês e sou grata por todo o amor que me dedicaram a vida toda. Obrigada por tudo o que eu sou e por me apoiarem e confiarem em mim SEMPRE! Aos meus irmãos Saulo e Laura, aos meus cunhados Alexandre e à Valéria, pelo carinho, confiança e apoio!! Ao meu esposo e amigo Du, pela paciência, companheirismo e por me dar força quando às vezes eu achava que não ia dar conta!! Ao Vovô Pedro (in memorian) pelo incentivo de SEMPRE! À Vó Ana (in memorian), que mesmo não tendo convivido com ela, me trazia paz nos momentos de ansiedade, sempre que eu tocava ou ouvia "Ave Maria"; Aos meus tios, primos, avós e agregados por acreditarem em mim sempre. À UNICAMP pelas oportunidades e experiências; À UNIFAL onde me formei em Farmácia e me incentivou aos estudos e à pesquisa; À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo e CAPES pelo apoio financeiro; À Cristália Indústria Química e Farmacêutica, pelo fornecimento dos anestésicos locais para a realização deste trabalho;AGRADECIMENTOS ______________________________________________________________________________ viii À amiga Cíntia Cereda, sempre ouvindo e aguentando pacientemente a minha lógica sistemática, de querer encontrar uma razão para todos os experimentos, milhões de questionamentos e aflições.Obrigada pela ajuda de sempre, pelo sorriso, exemplo e alegria!! Vivi Guilherme, ainda bem que existe você para fazer os estudos com os camundongos!! Tudo pela ciência!! Coitadinhos!!! Sobrou pra eles!!! À Vivi Vieira, essa que Deus colocou no mundo para nos alegrar e no meu caso, para ouvir minhas lamentações!! Mesmo que ela não queira, vai ser minha amiga pra SEMPRE!!! Vivi Queiroz -detalhista, organizada e muito inteligente -"quando eu crescer quero ser como você" Sheila -tantos sábados prolongados, lá estávamos nós, no pouco tempo que tínhamos para nos entregar à pesquisa!! Obrigada pela companhia!! Allan, esse me ensinou muito sobre as medidas de tamanho de partículas e potencial zeta! Obrigada! Cleyton, com sua graça deixava meus dias mais leves!! Obrigada por toda ajuda em meus momentos de desespero!! Camila, super dedicada e que faz com amor o seu trabalho pela ciência!! Obrigada pelas imagens em microscopia eletrônica; Mário, igualzinho a mim, ansioso pra fazer tudo acontecer e ver o resultado CERTO no final... agora rumo ao doutorado..
Ropivacaine (RVC) is a long acting local anesthetic, synthesized in the S enantiomeric form. This work describes the development of an analytical method and validation parameters that assured acceptable characteristics (suitability, reliability and feasibility) to quantify RVC in the presence of drug-delivery carriers such as cyclodextrins and liposomes. High performance liquid chromatography (HPLC) was performed using a reversed-phase C18 column, a mixture of acetonitrile and phosphate buffer pH 8.0 (60:40, v: v) as the mobile phase, 1.2 mL/min flow rate and oven temperature of 30 °C; Ropivacaine was detected by UV absorption, at 240 nm. The results showed that the analytical method is accurate, reproducible, robust and linear over the concentration range of 0.08-1.16 mM RVC. The method was applied to detect the in vitro release profile of the anesthetic loaded in two different drug-delivery systems: i) RVC encapsulated into egg phosphatidylcholine liposomes, and ii) RVC complexed with hydroxypropyl-beta-cyclodextrin (HP-βCD). The release kinetics rate was significantly slower for the RVC-HP-βCD complex than for liposomal RVC or the free drug (RVC in solution). To explain that, diffusion ordered spectroscopy (1H-NMR DOSY) experiments were conducted. The results confirmed the stronger interaction of the anesthetic with HP-βCD (association constant, Ka = 128 M-1) than with liposomes (Ka = 22 M-1), in accordance with the release kinetic data. In conclusion, the HPLC method described was proven suitable for the quantification of ropivacaine in drug-delivery systems.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.