Электрофорез белков семян для сортовой идентификации высокополиморфных культур на примере козлятника восточного (<i>Galega orientalis</i> Lam.)

Abstract

В России электрофорез используется в качестве лабораторного стандартного метода для определения сортовой чистоты партий семян и товарного зерна. Определенную сложность для использования электрофореза представляют перекрестноопыляемые культуры вследствие высокой внутрипопуляционной гетерогенности и большого полиморфизма белковых спектров. Материалом для исследования послужили семена четырех сортов козлятника восточного. Образцы получены из коллекции ВИР. Методом электрофореза изучен компонентный состав белков семян и полиморфизм сортов козлятника восточного. Для выделения белков отдельные семена размалывали, из муки брали навески по 5 мг, которые заливали 140 мкл электродного буфера (трис-глициновый, pH 8,3) и настаивали в течение 1 ч. Электрофорез проводили в 12,5 % ПААГ в диссоциирующей системе с меркаптоэтанолом по Лаемли. Процедура электрофореза и обработки гелевых пластин подробно описана для белков семян гороха. Эта методика нами успешно применяется для анализа семян люпина и других двудольных культур. Белки семян козлятника восточного, разделенные электрофорезом по Лаемли, подобно белкам других двудольных, представлены многокомпонентным спектром, в котором полипептиды расположены от катода к аноду с увеличением молекулярных масс. Анализ основных полипептидов 11S глобулина позволил надежно различать и идентифицировать сорта этой культуры. Обсуждается возможность использования части белкового спектра для идентификации и регистрации полиморфных сортов других культур. Проведенное исследование показывает, что зона основных полипептидов — перспективный объект для разработки метода идентификации сортов козлятника восточного с помощью SDS электрофореза. Мы считаем, что метод следует апробировать и для других перекрестноопыляемых бобовых культур.