Разработка Пцр В Режиме Реального Времени  Для Выявления Полевых Изолятов Вируса Заразного Узелкового Дерматита В Пробах От Крупного Рогатого Скота

Пестова, Я.Е.; животных, Фбгу Федеральный центр охраны здоровья; Артюхова, Е. Е.; Кострова, Е.Е.; Shumilova, Irina; Кононов, А. В.; СПРЫГИН, А.В.

doi:10.15389/agrobiology.2018.2.422rus

Cited by 3 publications

(3 citation statements)

References 0 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Все пробы, отобранные при нотифицируемых вспышках LSD на территории Российской Федерации, начиная с 2015 года, были проверены с помощью тест-систем ПЦР-CAPR и ПЦР-LSDV, причем совпадение результатов составило 100 %. Тест-системы ПЦР-CAPR и ПЦР-NEE разработаны в рамках этого исследования, а тест-система ПЦР-LSDV для полевых изолятов описана ранее (27). Все локусы для амплификации и сайты отжига зондов выбирались по критериям консервативности (по всем изолятам, данные по которым доступны в GenBank) и уникальности для обеспечения высокой специфичности (см.…”

Section: вариабельность значений Ct для одного-трех запусков при примunclassified

“…Ранее широко использовался классический метод D.C. Ireland и Y.S. Binepal (29) на основе классической ПЦР, однако он не специфичен в отношении конкретного вируса и выявляет все каприпоксвирусы (27). К тому же классическая ПЦР несет риски кросс-контаминации и имеет более низкую чувствительность.…”

Section: выявление генома вируса Lsd в полевых об-unclassified

“…В качестве источника флуоресценции применяли краситель FAM (5ґ-конец зонда); гаситель флуоресценции -BHQ1 (3ґ-конец зонда). Праймеры и зонд для выявления генома полевых изолятов вируса в системе ПЦР-LSDV описаны ранее (27) (27).…”

unclassified

See 2 more Smart Citations

Тест-Системы Пцр Для Выявления Генома Каприпоксвирусов И Вируса Заразного Узелкового Дерматита

СПРЫГИН¹,

животных²,

Пестова³

et al. 2019

s-h. biol.

Self Cite

View full text Add to dashboard Cite

Интенсификация животноводства неизбежно повышает риски заноса и распространения инфекционных заболеваний, из которых наиболее опасны трансграничные. Инфекции крупного рогатого скота, вызываемые каприпоксвирусами, в частности вирусом заразного узелкового дерматита (ЗУД, Lumpy skin disease, LSD), поражают крупный и мелкий рогатый скоту, нанося существенный экономический ущерб. До 2015 года территория Российской Федерации была благополучна по ЗУД, однако из-за локальных конфликтов на Ближнем Востоке и изменений климата заболевание распространяется в северном направлении (масштабные вспышки LSD в Турции, странах Балканского полуострова, ЕС и в России). Широкое использование живых гомологичных вакцин против LSD в соседних странах также актуализирует разработку методов диагностики этого возбудителя, позволяющих выявлять геномы полевых изолятов и дифференцировать вакцинный вирус ЗУД КРС. Нами впервые в России разработан и валидирован комплекс методов ПЦР в режиме реального времени для однорежимного тестирования проб на наличие генома каприпоксвирусов, полевых изолятов вируса заразного узелкового дерматита и вакцинного вируса ЗУД КРС типа Neethling. На основе выравнивания полногеномных последовательностей идентифицированы сайты, наиболее пригодные для специфичной амплификации при выявлении генома полевых изолятов, вакцинных штаммов и каприпоксвирусов. Для амплификации фрагмента генома полевых изолятов мы выбрали участок ORF126 гена EEV вируса LSD-вставку размером 27 п.н., отсутствующую у других представителей рода Capripoxvirus и вакцинных штаммов типа Neethling. Для амплификации фрагмента генома вакцинных штаммов использовали участок ORF008, в котором присутствуют уникальные замены, характерные только для таких штаммов, для каприпоксвирусов-участок гена P32, консервативный для всех представителей рода Capripoxvirus. Предложенные методы показали высокую чувствительность (98 %), специфичность (99 %) и адекватную повторяемость (коэффициент вариации не более 2 %). Апробацию тест-систем проводили на панели из 596 проб биологического материала, собранного при вспышках каприпоксвирусных инфекций в России,-стабилизированной крови, сыворотки крови, соскобов кожи (нодулы), назальных и окулярных смывов, молока, тканей лимфатических узлов, легких, трахеи, селезенки и абортплодов, отобранных от животных, инфицированных в естественных условиях. Следует отметить, что с помощью разработанного комплекса тест-систем ПЦР-РВ в рамках мониторингового исследования на заразный узелковый дерматит в ряде регионов Российской Федерации отмечены случаи выявления генома вакцинного вируса ЗУД КРС. Это может свидетельствовать либо о нелегальном использовании запрещенной к ввозу в Россию аттенуированной живой вакцины типа Neethling, либо о естественном распространении вакцинного Neethling. На основе разработанных методов оформлено два патента РФ на изобретения, что подтверждает оригинальность и значимость предложенных методик для диагностических исследований. Ключевые слова: заразный узелковый дерматит, нодулярный дерматит, вакцинный штамм, каприпоксв...

show abstract

Section: вариабельность значений Ct для одного-трех запусков при примunclassified

Section: выявление генома вируса Lsd в полевых об-unclassified

unclassified

See 1 more Smart Citation

Тест-Системы Пцр Для Выявления Генома Каприпоксвирусов И Вируса Заразного Узелкового Дерматита

СПРЫГИН¹,

животных²,

Пестова³

et al. 2019

s-h. biol.

Self Cite

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

Вызовы и драйверы экономики госсектора в здравоохранении России на рубеже 2020 года при реализации национальных целей, определенных майским 2018 года Указом Президента Российской Федерации (Challenges and Drivers of the Economy of the Public Sector in the Health Care of Russia at the Turn of 2020 in the Implementation of National Goals Defined by the May 2018 Decree of the President of the Russian Federation)

Pavlova

Gabueva²

2019

SSRN Journal

View full text Add to dashboard Cite

Особенности Патоморфологических Проявлений Хронического Миелоидного Лейкоза У Кур

Вахрушева¹

2020

Bulletin of KSAU

View full text Add to dashboard Cite

Изучена патоморфологическая картина изменений органов и тканей павших и вынужденно убитых кур с клиническими признаками хронического миелоидного лейкоза, установлены характерные патогномоничные для основного заболевания макро- и микроскопические изменения, а также развившиеся на их фоне осложнения, проведена дифференциальная диагностика от инфекционных болезней со сходными клиническими и морфологическими признаками. Объектами исследования являлись куры-несушки, содержащиеся в одном из фермерских хозяйств Красноярского края, в течение 2018–2019 гг. было проведено патолого-анатомическое вскрытие 12 трупов птиц. Проводился забор материала для гистологического исследования – фрагменты тканей костного мозга, селезенки, печени, почек, сердца, тонкого и толстого отделов кишечника, легких, поджелудочной железы, яичника, головного мозга. Срезы изготавливались на микротоме «Техном МЗП-01», окрашивались гематоксилином Эрлиха и эозином. Для проведения серологических исследований сыворотки крови кур на наличие антител к ALV-J проводился забор крови от птиц с клиническими признаками болезни – 6 голов, специфические антитела выявлялись во всех случаях в реакции ИФА. Для проведения дифференциальной диагностики в лабораторию отправлялся патолого-анатомический материал, инфекция была исключена во всех случаях. Результаты изучения органов и тканей показали, что причиной гибели птиц стал хронический миелоидный лейкоз. Ведущую роль при посмертной патоморфологической диагностике играют гистопатологические исследования, которые основываются на обнаружении бластных форм клеток миелоидного ряда в органах и тканях, при этом в ряде случаев макроскопическая картина изменений может быть неспецифичной. Полученные данные позволят оптимизировать процесс комплексной диагностики, в том числе дифференциальной.

show abstract

Разработка Пцр В Режиме Реального Времени Для Выявления Полевых Изолятов Вируса Заразного Узелкового Дерматита В Пробах От Крупного Рогатого Скота

Cited by 3 publications

References 0 publications

Тест-Системы Пцр Для Выявления Генома Каприпоксвирусов И Вируса Заразного Узелкового Дерматита

Тест-Системы Пцр Для Выявления Генома Каприпоксвирусов И Вируса Заразного Узелкового Дерматита

Особенности Патоморфологических Проявлений Хронического Миелоидного Лейкоза У Кур

Contact Info

Product

Resources

About