Влияние Гемодеривата Крови Телят На Жизнеспособность, Апоптоз И Некроз Клеток Нейробластомы Человека SK-N-SH

Abstract

Изучено влияние гемодеривата крови телят (актовегин) на выживаемость и гибель нейробластомных клеток человека линии SK-N-SH в зависимости от длительности воздействия этого препарата. Количество живых и погибших клеток в пробах определяли методом флуоресцентной микроскопии с использованием флуоресцентных зондов Hoechst 33342 и йодида пропидия на микроскопе Keyence BZ8100, Япония. Апоптоз регистрировали по наличию фрагментации ДНК клеток. При культивировании нейробластомных клеток человека in vitro их количество через 48 и 72 ч возрастало на 8,5 % (p < 0,05) и 18,4 % (p < 0,005), соответственно. Актовегин, по сравнению с контролем, концентрационно-зависимо снижал количество живых SK-N-SH клеток и этот процесс зависел от времени его экспозиции (актовегин 1 мг/мл: через 72 ч на 23,8 %; актовегин 5 мг/мл: через 48 на 25,1 %, через 72 ч на 33,2 %, p < 0,05). Анализ клеточной гибели показал, что в контроле и при добавлении актовегина в концентрации 0,2 мг/мл на всех этапах культивирования отмечалось увеличение процента клеток, погибших как путем апоптоза, так и некроза, в результате чего вклад апоптоза и некроза в клеточную смерть не менялся через 48 и 72 ч. При добавлении актовегина в концентрациях 1 и 5 мг/мл регистрировалось увеличение вклада некроза в клеточную гибель через 48 ч, который затем уменьшался через 72 ч и смещал соотношение в пользу апоптоза. Результаты свидетельствуют о том, что актовегин тормозит деление опухолевых клеток и способен вызывать их гибель, которая происходит как по механизму некроза, так и апоптоза, а относительный вклад этих процессов, вероятно, меняется в зависимости от времени экспозиции препарата.