Προσδιορισμός μεταλλάξεων στα γονίδια ras γενετικών αλλοιώσεων στο γονίδιο της p53 και των ιών του θηλώματος του ανθρώπου (HPV) σε κυτταρολογικό υλικό από γυναικολογικούς καρκίνους και προκαρκινικές αλλοιώσεις

Abstract

KEΦAΛAIO 2ο ΓYNAIKOΛOΓIKOΣ KAPKINOΣ 2.1 Kάρκινος τραχήλου της µήτρας 2.1.1 Εισαγωγή 2.1.2 Eνδοεπιθηλιακή νεοπλασία του τραχήλου (CIN). 2.1.3 Kολποτραχηλικά επιχρίσµατα 2.1.4 ∆ιηθητικό καρκίνωµα 2.1.5 Aδενοκαρκίνωµα 2.2 Kαρκίνος ωοθηκών Πίνακας 2.1 Iστολογική ταξινόµηση των ωοθηκικών όγκων 17 KEΦAΛAIO 3ο OΓKOΓONI∆IA RAS 3.1. Γενικά Πίνακας 3.1. 3.2 ∆οµή των γονιδίων ras Σχήµα 3.1. 3.3 Pύθµιση των γονιδίων ras Σχήµα 3.2 3.4 H πρωτείνη p21 3.5 Eνεργοποίηση των γονιδίων ras 3.5.1. Mεταλλάξεις των ras 25 Πίνακας 3.2 Σχήµα 3.3. 3.5.2. Yπερέκφραση των ras Πίνακας 3.3 KEΦAΛAIO 4ο OΓKOKATAΣTAΛTIKO ΓONI∆IO P53 4.1 Eισαγωγή 31 4.2 ∆οµή και οργάνωση του γονιδίου p53 Σχήµα 4.1 4.3 ∆οµικοί πολυµορφισµοί στο αµινοξύ 72 της ανθρώπινης p53. Σχήµα 4.2 4.4 Pόλος του πολυµορφισµού της p53 στην ανάπτυξη HPV σχετιζόµενων καρκίνων τραχήλου της µήτρας. KEΦAΛAIO 5ο O IOΣ TOY ΘHΛΩMATOΣ HPV 5.1. Γενικά 5.2 ∆οµή των ιικών σωµατιδίων και ταξινόµηση 41 5.2.1 Iικά σωµατίδια 5.2.2 ∆οµή και ρύθµιση του ιικού γενώµατος 5.3 Oνοµατολογία και ταξινόµηση 43 5.4 Λειτουργίες των ιικών πρωτεινών E6 και E7 44 5.4.1 E6 πρωτείνη 5.4.2 E7 πρωτείνη 5.5 Mετάδοση και φυσική ιστορία των µολύνσεων από ιούς του θηλώµατος 5.6 Mη κακοήθεις καταστάσεις που σχετίζονται µε µολύνσεις µε ιούς θηλώµατος 5.7 Oι ιοί του θηλώµατος στον καρκίνο του τραχήλου της µήτρας 5.8 O παγκόσµιος ρόλος των HPV -σχετιζόµενων καρκίνων και συµπεράσµαταB. EI∆IKO MEPOΣ KEΦAΛAIO 6ο MEΘO∆OI KAI YΛIKA 6.1 Προέλευση των δειγµάτων 6.2 Eκχύλιση DNA 6.2.1 Eκχύλιση DNA από κυτταρολογικό υλικό 6.2.2 Eκχύλιση DNA από περιτοναϊκά εκπλύµατα και ασκιτικά υγρά 6.2.3 Eκχύλιση DNA από κυτταρικές σειρές 6.2.4 Aποµόνωση χρωµοσωµικού DNA από περιφερικό αίµα. 6.3. Aλυσιδωτή αντίδραση µε πολυµεράση (PCR) 6.3.1 Aρχές της µεθόδου 6.3.2 Pυθµιστικοί παράγοντες της PCR 6.3.3. Pυθµιστικά διαλύµατα της PCR 6.3.4. Σχεδιασµός εκκινητών και συνθήκες των αντιδράσεων PCR Πίνακας 6.1. 6.4 Mέθοδοι προσδιορισµού µεταλλάξεων 6.4.1. Aνάλυση πολυµορφισµού µεγέθους περιοριστικών θραυσµάτων (RFLP) Σχήµα 6.1. Σχήµα 6.2. Σχήµα 6.3 6.5.Hλεκτροφόρηση DNA 6.6. Xρώση νουκλεϊκών οξέων 65 6.6.1. Xρώση µε βρωµιούχο εθίδιο 6.6.2. Xρώση µε νιτρικό άργυρο 6.7 Στατιστική ανάλυση -Hλεκτρονική επεξεργασία εικόνας 6.8. Eταιρείες προέλευσης των υλικών KEΦAΛAIO 7ο AΠOTEΛEΣMATA 7.1 Aνίχνευση σηµειακών µεταλλάξεων στα γονίδια ras καθώς και των ιών HPV, σε αλλοιώσεις του γυναικείου γεννητικού συστήµατος. 7.1.1. Aνίχνευση σηµειακών µεταλλάξεων στα γονίδια ras και των ιών HPV σε χρωσµένο κυτταρολογικό υλικό δείγµατων µε προκαρκινικές αλλοιώσεις και καρκίνο τραχήλου µήτρας.