Μελέτη των όξινων ριβοσωμικών πρωτεϊνών και των γονιδίων τους στο έντομο Ceratitis capitata

Abstract

2.28.2 Τεχνητή σύνδεση (ligation) μορίων DNA με Τ4 DNA λιγάση 2.28.3 Μετασχηματισμός βακτηριακών στελεχών της E. coli 2.29 ΜΕΘΟΔΟΙ ΠΑΡΑΣΚΕΥΗΣ ΠΛΑΣΜΙΔΙΑΚΟΥ DNA 2.29.1 Απομόνωση πλασμιδιακού DNA με τη μέθοδο των Birboim Kat Doly (1979) 2.29.2 Απομόνωση μικρής ποσότητας DNA (mini prep) 2.29.3 Απομόνωση πλασμιδιακού DNA με καταβύθιση με πολυεθυλενγλυκόλη (PEG precipitation) 2.29.4 Απομόνωση πλασμιδιακού DNA και καθαρισμός με χρωματογραφία στήλης 160 2.29.5 Απομόνωση μονόκλωνου DNA από φάγο Μ13 161 2.30 ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΝΟΥΚΛΕΟΤΙΔΙΚΗΣ ΑΛΛΗΛΟΥΧΙΑΣ 162 2.31 ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΝΟΥΚΛΕΟΤΙΔΙΚΗΣ ΑΛΛΗΛΟΥΧΙΑΣ ΠΡΟΪΟΝΤΩΝ PCR 165 2.32 ΕΚΦΡΑΣΗ ΕΞΩΓΕΝΩΝ ΠΡΩΤΕΪΝΩΝ ΣΤΟ ΒΑΚΤΗΡΙΟ Escherichia coli 166 2.32.1. Κύτταρα ξενιστές και φορείς κλωνοποίησης 167 2.32.2 Επαγώγιμη έκφραση γονιδίου -στόχου με IPTG σε κύτταρα ΒΙ21(ΟΗ3)της£ coli 168 2.32.3 Ανίχνευση και ταυτοποίηση των εκφρασμένων πρωτεϊνών 22.33 ΕΤΕΡΟΛΟΓΉ ΕΚΦΡΑΣΗ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΣΤΟ ΖΥΜΟΜΥΚΗΤΑ Saccharomyces cerevisiae 169 2.33.1 Μεταλλαγμένα στελέχη του ζυμομύκητα Saccharomyces cerevisiae 2.33.2 Θρεπτικά υποστρώματα 171 2.33.3 Φορείς κλωνοποίησης 1"2 2.33.4 Μετασχηματισμός στελεχών του ζυμομύκητα Saccharomyces cerevisiae 173 3. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ