Μελέτη των μηχανισμών πρόκλησης ανευπλοειδίας στον άνθρωπο από τη φαρμακευτική ένωση υδροχλωροθειαζίδιο (HCTZ) με μοριακές κυτταρογενετικές τεχνικές in vitro

Abstract

Η παρούσα διατριβή πραγµατοποιήθηκε στο Εργαστήριο Γενετικής του Τοµέα Γενετικής, Βιολογίας Κυττάρου και Ανάπτυξης του Τµήµατος Βιολογίας του Πανεπιστηµίου Πατρών. Η ανάθεση του θέµατος και η επίβλεψη της εργασίας έγινε από την Αναπληρώτρια Καθηγήτρια κ. Στεφάνου Γεωργία την οποία ευχαριστώ ιδιαίτερα για τη φιλική συνεργασία της, τις συνεχείς υποδείξεις της κατά τη διεξαγωγή των πειραµάτων και για τα σχόλια και προτάσεις της κατά τη συγγραφή της διατριβής. Στην Επιβλέπουσα Καθηγήτρια οφείλεται η υποστήριξη της εργασίας µε υποτροφία για το χρονικό διάστηµα 1998-2001 από το πρόγραµµα "Καραθεοδωρή" της Επιτροπής Ερευνών του Πανεπιστηµίου Πατρών. Η εµπιστοσύνη που µου έδειξε µε τιµά, ενώ η υποµονή και η καλοσύνη της µε βοήθησαν να ξεπερνώ τα όποια προβλήµατα προέκυπταν. Τον Καθηγητή κ. Νικόλαο ∆ηµόπουλο, µέλος της συµβουλευτικής επιτροπής, ευχαριστώ θερµά για την αµέριστη συµπαράσταση και αδιάκοπη καθοδήγησή του, παράλληλα µε την κ. Γ. Στεφάνου, σε όλη τη διάρκεια της διατριβής. Τον ευχαριστώ ιδιαίτερα για την ευκαιρία που µου έδωσε, ως επιστηµονικός υπεύθυνος, να συµµετάσχω σε δύο ερευνητικά προγράµµατα χρηµατοδοτούµενα από την Ευρωπαϊκή Ένωση. Η επιστηµονική του κατάρτιση, η απλότητα, η πραότητα και η ειλικρίνεια που τον διακρίνουν συνιστούν το πρότυπο επιστήµονα και ανθρώπου. Τον Καθηγητή Γενετικής κ. Σταµάτη Αλαχιώτη ευχαριστώ για την αποδοχή του να οριστεί µέλος της τριµελούς συµβουλευτικής επιτροπής και για τις συµβουλές του. Τον Καθηγητή του Τµήµατος Βιολογίας κ. Γεώργιο Γιαννόπουλο, τον Καθηγητή του Τµήµατος Φαρµακευτικής κ. Παύλο Κορδοπάτη, τον Καθηγητή του Τµήµατος Χηµείας κ. Ιωάννη Ματσούκα και τον Καθηγητή του Τµήµατος Ιατρικής κ. ∆ιονύση Τσαµπάο ευχαριστώ θερµά για τη συµµετοχή τους στην Εξεταστική Επιτροπή και τις εύστοχες παρατηρήσεις τους. Ευχαριστίες επίσης οφείλω στους δότες του πειραµατικού υλικού της διατριβής και στον Αναπληρωτή Καθηγητή του Τµήµατος Βιολογίας κ. Π. Κατσώρη ο οποίος έκανε τις αιµοληψίες. Τον Επίκουρο Καθηγητή του Τµήµατος Μαθηµατικών κ. Φ. Αλεβίζο ευχαριστώ για τις χρήσιµες συµβουλές του σε θέµατα Στατιστικής. Την κ. ∆ήµητρα Θωµαΐδου, Ερευνήτρια Γ΄ του Ινστιτούτου Παστέρ ευχαριστώ για τη δυνατότητα χρήσης του Συνεστιακού Μικροσκοπίου. Την Καθηγήτρια του Τµήµατος Βιολογίας κ. C. Tanzarella του Πανεπιστηµίου "Roma Tre" της Ιταλίας και τους ερευνητές ∆ρ. Α. Antoccia και ∆ρ. A. Sgura ευχαριστώ για τη βοήθεια τους σε πειραµατικές διαδικασίες και για τη φιλοξενία τους στα πλαίσια του προγράµµατος INTERREG II (M.5-2). Επιπρόσθετα θα ήθελα να ευχαριστήσω τους φίλους και συνεργάτες του Εργαστηρίου M. Τυράκη, MSc, Α. Κουλουµέντα, MSc, Μ. Ευθυµίου, MSc, Σ. Σαλαµαστράκη και ∆. Ουρανού για την άψογη και δηµιουργική συνεργασία που είχαµε. Τη Μ. Ευθυµίου ευχαριστώ θερµά για την ηθική συµπαράσταση και κατανόηση που έδειξε και η οποία συνέβαλε µε το δικό της ιδιαίτερο τρόπο στην ολοκλήρωση της παρούσας διατριβής. 8.2 ∆ιπλή In Situ υβριδοποίηση µε φθοροχρώµατα (DUAL FISH) -Συµµετοχή των χρωµοσωµάτων Χ, Υ και 8 σε ανευπλοειδικά φαινόµενα 8.2.1 Επεξεργασία του κυτταρικού υλικού στις αντικειµενοφόρου...