Η Μικρο/Νανοτεχνολογία Στην Ανάλυση DNA

Abstract

Η παρούσα διδακτορική διατριβή πραγματεύεται την αξιοποίηση της μικρο- και νανοτεχνολογίας στην ανάλυση του DNA. Περιγράφεται η ανάπτυξη φθορισμομετρικής μεθόδου εκτίμησης της ποιότητας μικροσυστατικών δίκλωνου DNA, δηλαδή της αποτελεσματικής της εναπόθεσης του DNA, της μορφολογίας των κηλίδων, της λειτουργικότητας των μορίων DNA που έχουν αποτεθεί και της επαναληψιμότητας της εναπόθεσης. Η μέθοδος επίσης παρέχει τη δυνατότητα εντοπισμού θέσεων όπου δεν έχει αποτεθεί DNA. Πραγματοποιήθηκαν μελέτες για τη βελτιστοποίηση της απόδοσης της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης σε μικρορρευστονική ψηφίδα συνεχούς ροής. Τέλος, αναπτύχθηκε μέθοδος ανίχνευσης μονονουκλεοτιδικών πολυμορφισμών στο γενωμικό DNA, η οποία συνδυάζει τα πλεονεκτήματα ψηφίδας για την εκτέλεση PCR συνεχούς ροής και βιοαισθητήρα DNA τύπου ξηρών αντιδραστηρίων για την ταχεία ανίχνευση των προϊόντων της PCR χωρίς τη χρήση οργάνων. Η μέθοδος εφαρμόστηκε στην ανίχνευση μετάλλαξης στο γονίδιο της β-σφαιρίνης.