Volume of Untreated and Ultrasonically-Treated Bull, Boar and Human Spermatozoa Electronically Determined

Iversen, Simon

doi:10.1530/jrf.0.0090197

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“…O'Donnell(l969) reported that the semen of the domestic boar and the bull contained small droplets with a modal volume of 9 ym3 and 11 pm3 respectively, while the model volumes of the spermatozoa were 29 pm3 and 19-25 pn-13 respectively. Iversen (1965) quoted modal volumes of 29 pm3 and 23 pm3 for boar and bull spermatozoa respectively. The results reported here are almost the same, being 3 1 pn-13 and 23 pm3 for the modal volumes of boar and bull spermatozoa respectively, with the droplets in boar semen having a modal volume of 10 pm3.…”

Section: Sizementioning

confidence: 99%

The counting and sizing of spermatozoa from ten animal species using a coulter counter

Brotherton¹

2009

Andrologia

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Zusammenfassung Zählung und Größenbestimmung von Spermien zehn verschiedener Tierspezies mit einem Coulter Counter Genau geeichte Coulter Counters (Modelle ZB Industrial und F) wurden benutzt, um Größe und Zahl von Spermatozoen vor und nach Zaponinbehandlung zu bestimmen. Begleitende Partikel, Tröpfchen und peripheres Spermacytoplasma wurden durch die Zaponinbehandlung aufgelöst. Spermaproben aus der cauda epididymidis des Kaninchens, Meerschweinchens, Hamsters sowie der Ratte und der Maus, waren frei von Begleitpartikeln und konnten ohne Zaponinbehandlung bestimmt werden. Wenn Meerschweinchensperma in isotonische Lösung gebracht wurde, schwollen die Akrosomen schnell an und die Größenbestimmung konnte erst nach Erreichen eines Gleichgewichtszustandes durchgeführt werden. Zaponinbehandlung föhrte zu vollständiger Auflösung von Ratten‐ und Hamsterspermatozoen innerhalb von Sekunden und zu 50%iger Auflösung von Mäusespermatozoen. Spermatozoen aus der cauda epididymidis des Ochsen waren von unspezifischen Partikeln begleitet, welche eine Größenbestimmung ohne Zaponinbehandlung schwierig machten. Das Ochsensperma enthielt keine Population cytoplasmatischer Tröpfchen und die Cytoplasmamenge der Spermien war, wie durch die Entfernung des Cytoplasmas mit Zaponin gezeigt wurde, geringer als bei allen anderen Spezies. Die Größe der Spermatozoen im Ejakulat des Hundes war sehr unterschiedlich, je nachdem ob die Spermien mit cytoplasmatischen Tröpfchen behaftet waren oder nicht, aber nach der Zaponinbehandlung waren alle Spermatozoen etwa gleich groß. Das Ejakulat vom europäischen Wildeber enthielt eine Population kleiner Tröpfchen, die sich in ihrer Größe genügend von den Spermatozoen unterschieden, um eine getrennte Zählung und Größenbestimmung von Spermien und Tröpfchen ohne Zaponinbehandlung durchführen zu können. Das Ejakulat des Rhesus‐Affen mußte inkubiert werden, um die Spermatozoen aus dem Spermagerinsel zu befreien und dann Zahl und Größe zu bestimmen. Die Spermatozoengröße hing geringfügig von der Inkubationsdauer ab. Die Ejakulate vom Kaninchen und Menschen waren so stark mit unspezifischen Partikeln verunreinigt, daß man eine Zählung und Größenbestimmung der Spermatozoen ohne Zaponinbehandlung nicht durchführen konnte. Das Verhältnis von Partikelmenge zu der Zahl der Spermatozoen war äußerst variabel. Die Partikel wurden von den Spermatozoen durch Einwandernlassen der beweglichen Spermatozoen in eine Gradiente von Rinderserumalbumin abgetrennt. Auf diese Weise konnten erstmalig unbehandelte Spermatozoen des Menschen gemessen werden. Die Verteilungskurven von Spermiengrößen aller zehn geprüfter Spezies, vor und nach Zaponinbehandlung, waren linksschief. Ohne Zaponinzusatz waren die Gipfel der Kurve breiter und flacher. Spermiengrößen wurden als Volumina der Spermien und als Durchmesser dieser Volumina (bei sphärischer Form) von allen Spezies angegeben, sowohl am Modus wie auch Mittelwert der Verteilungskurven. Nach Zaponinbehandlung betrug das mittlere Volumen 15–30 μm3 entsprechend einem Durchmesser von 3–4 μm ...

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Section: Sizementioning

confidence: 99%

The counting and sizing of spermatozoa from ten animal species using a coulter counter

Brotherton¹

2009

Andrologia

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“…Studies on acrosomes released from the head by the use of a cationic detergent (10), have revealed that enzymes resembling those from lysosomes are responsible for the digestion of the zona pellucida surrounding the ovum (11) . In addition, mechanical and enzymatic cleavage techniques have been devised to separate spermatozoan heads from tails (12,13,14), although functional roles for the isolated cell fragments have not been described .…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

“…Complete removal of the mitochondrial components of the spermatozoan midpiece has not been achieved previously by any of the mechanical methods developed for dissecting mammalian spermatozoa (12,13) . Chemical dissection of spermatozoa with reducing agents such as DTT, however, allows the fractionation of tails that are not fragmented and that appear to consist of material comprising the flagellar structures themselves .…”

mentioning

confidence: 99%

Chemical Dissection of Mammalian Spermatozoa

Millette

Spear

Gall

et al. 1973

The Journal of Cell Biology

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Spermatozoa from several mammalian species have been dissected by chemical methods to yield free heads, tails with attached midpieces, and tails from which the mitochondrial components of the midpiece were removed . Mouse and rat spermatozoa were cleaved by brief treatment with trypsin to yield free heads and tails, while human, guinea pig, and rabbit spermatozoa were cleaved by trypsin only after incubation with 2-mercaptoethanol or dithiothreitol . Spermatozoa were also cleaved at the junction of the head and the tail by treatment with acid and base . Mitochondria were removed from intact spermatozoa or isolated tails by mechanical shear after treatment with 2-mercaptoethanol or dithiothreitol . The dissected components of spermatozoa were fractionated with good yield and high purity by density gradient centrifugation . Ultrastructural analysis indicates that proteolytic cleavage to yield separated heads and tails occurs at a specific location in the neck of the spermatozoon, leaving the basal plate attached to the head of the cell . In contrast, after acid cleavage the basal plate remains with the midpiece . Proteolytic treatment has no apparent effect on any other spermatozoan structures, whereas acid or base treatment results in damage to the plasma membrane, the acrosome, and other structures . The specificity of the proteolytic cleavage suggests that a particular protein or group of proteins may be responsible for the linkage between the sperm head and tail .

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“…Data on the use of Coulter@ counter for estimation of boar-semen density appear to be limited. Iversen (1965), O'Donnell (1969), and Brotherton (1975) used a Coulter@ counter for counting and sizing boar spermatozoa. Woelders (1990), however, using a Coulter@ counter for assessment of boar sperm concentration, found that the measurements underestimated the concentration when compared with haemocytometer counting.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Precision of the Coulter® Counter for Routine Assessment of Boar‐sperm Concentration in Comparison with the Haemocytometer and Spectrophotometer

Paulenz¹,

Grevle²,

Tverdal

et al. 1995

Reprod Domestic Animals

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Volume of Untreated and Ultrasonically-Treated Bull, Boar and Human Spermatozoa Electronically Determined

Cited by 17 publications

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The counting and sizing of spermatozoa from ten animal species using a coulter counter

The counting and sizing of spermatozoa from ten animal species using a coulter counter

Chemical Dissection of Mammalian Spermatozoa

Precision of the Coulter® Counter for Routine Assessment of Boar‐sperm Concentration in Comparison with the Haemocytometer and Spectrophotometer

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