VEGF-A splice variants and related receptor expression in human skeletal muscle following submaximal exercise

Abstract

VEGF-A contributes to muscle tissue angiogenesis following aerobic exercise training. The temporal response of the VEGF-A isoforms and their target receptors has not been comprehensively profiled in human skeletal muscle. We combined submaximal exercise with and without reduced leg blood flow to establish whether ischemia-induced metabolic stress was an important physiological stimuli responsible for regulating the VEGF-A system in humans. Nine healthy men performed two 45-min bouts of one-leg knee-extension exercise, with and without blood flow restriction. Muscle biopsies were obtained at rest and 2 and 6 h after exercise. Expression (mRNA) of the VEGF-A splice variants and related receptors [VEGF receptor (VEGFR)-1, VEGFR-2, and neuropilin-1] was determined by using qPCR. VEGF-A(total) expression increased more robustly after exercise with reduced blood flow, and initially this principally reflected an increase in VEGF-A(165). Six hours after exercise, there was a relatively greater increase in VEGF-A(189), and this response was not influenced by blood flow conditions. VEGFR-1 mRNA expression increased 2 h after exercise, and neuropilin-1 expression was transiently reduced, while all three receptors increased by 6 h. There was no evidence for the expression of the inhibitory VEGF-A(165B) variant in human skeletal muscle. Our study, reflecting both VEGF-A ligand and receptors, implicates metabolic perturbation as a regulator of human muscle angiogenesis and demonstrates that VEGF-A splice variants are distinctly regulated. Our findings also indicate that all three receptor genes exhibit different pretranslational regulation, in response to exercise in humans.

Molecular Markers of Angiogenesis as a Basis for the Use of Vegf Blockade in Patients With Localized Ewing’s Sarcoma

“…Современные таргетные препараты, направ-ленные на подавление роста опухолевых сосудов, вызывают несомненный интерес в качестве вари-анта усиления антинеопластического воздейст-вия [13,14]. В качестве первого опыта для СЮ североамериканские исследователи из Детской онкологической группы (Children's Oncology Group, COG) использовали метрономную анти-ангиогенную терапию: винбластин и целекоксиб совместно с базовой схемой [15,16].…”

VEGF-blockade of localized Ewing’s sarcoma based on angiogenesis markers in pretreatment tumor tissue

“…Современные таргетные препараты, направлен-ные на подавление роста опухолевых сосудов, вызы-вают несомненный интерес в качестве варианта уси-ления антинеопластического воздействия [14,15]. В качестве первого опыта для СЮ исследователи из Children's Oncology Group (COG) использовали ме-трономную антиангиогенную терапию: винбластин и целекоксиб совместно с базовой схемой [16,17].…”

“…ПЦР в реальном времени для генов VEGFA и TFPI2 проводилась с использованием коммерческих систем (TaqMan Gene Expression Assays; Applied Biosystems, Foster City, CA, ID Hs00900054 мл и Hs00197918 мл соответственно). Праймеры и зонды для количе-ственной оценки VEGF-изоформ при ПЦР в реаль-ном времени были использованы так, как описано в публикации T. Gustafsson et al [14]. Реакция про-водилась в 20 мкл реакционной смеси с окончатель-ным разведением 1× в (TaqMan PCR universalmaster mix, Applied Biosystems) в соответствии с протоколом производителя и с помощью оборудования Icycler (Bio-Rad, Hercules, CA) в режиме реального време-ни.…”

Levels of Angiogenesis Factors Expression in Sarcoma Tissue and Non-Malignant Lesions in Pediatric Patients: Results of a Cross-Sectional Study

“…Активаторы плазминогена урокиназного типа (Urokinase-type plasminogen activator, uPA) и его антагонист PAI1 (Plasminogen activators inhibitor-1) продуцируются нормальными и опухолевыми клетками и играют ключевую роль в деградации и ремоделировании межклеточного матрикса, деструкции базальной мембраны и метастазировании. Повышение уров-ня uPA ассоциируется с плохим прогнозом заболе-вания [11][12][13].…”

“…Диагноз и стадию (распространение) опухоли устанавливали согласно критериям международ-ных протоколов [14][15][16] [13]. ПЦР в режиме реаль-ного времени проводили в 20 мкл реакционной смеси с окончательным разведением 1× в TaqMan PCR Universalmaster Mix (Applied Biosystems, США) в соответствии с протоколом производителя и с помощью оборудования iCycler (Bio-Rad, США).…”