Validation des méthodes d'électrophorèse capillaire appliquées à l'analyse des composés pharmaceutiques

Abstract

DossierIl faudra aussi vérifier dans le cas des séparations chirales réalisées avec des cyclodextrines (CD) substituées si la sélec-tivité de la séparation est maintenue en utilisant différents lots de CD et/ou des CD issus de différents fournisseurs. En effet, les CD substituées peuvent présenter des degrés de substitutions différents ou des substituants en différentes positions sur la CD ou avoir des taux de pureté différents qui peuvent influencer la sélectivité de la séparation énantiomérique [26][27][35][36]. LinéaritéLa linéarité de la réponse en fonction de la concentration doit être étudiée dans un intervalle de concentration approprié.En EC comme en CLHP, la linéarité de la gamme d'éta-lonnage est en général établie avec 5 concentrations minimum. Dans le cas de l'analyse d'un produit principal, la gamme de linéarité étudiée se situe entre 80 -120 % ou 50 -150 % ou 40 -160 % de la concentration cible où se situe le dosage. Pour les impuretés, la linéarité doit être démontrée en présence du produit principal, en maintenant sa concentration fixe et en ajoutant des concentrations croissantes de l'impureté ; l'intervalle de linéarité étudié se situe autour du taux maximum d'impuretés toléré ; si le taux maximum toléré est de 0,1 % (m/m) par rapport au produit principal l'intervalle étudié sera par exemple 0,05 % -0,2 % (m/m) ou au-delà.En EC, l'analyse quantitative est effectuée le plus souvent en utilisant les surfaces de pics plutôt que les hauteurs car la gamme de linéarité est plus étendue avec les surfaces [37]. Il doit être noté aussi que la gamme dynamique des détecteurs UV en EC est plus limitée qu'en CLHP, en raison de la géo-métrie cylindrique de la cellule de détection. Cette gamme dynamique est le plus souvent suffisante pour réaliser le dosage des impuretés apparentées en % (surface/surface), à l'intérieur d'une même injection. Si le composé majeur (pré-sent à forte concentration pour pouvoir quantifier les impuretés) donne un signal situé en dehors de la zone de linéarité, il est possible de remédier à ce problème en réalisant deux injections : l'une correspondant à une quantité faible de l'échan-tillon permettra d'obtenir une réponse du composé majeur dans la zone de linéarité, l'autre correspondant à une quantité forte de l'échantillon permettra de détecter et quantifier les impuretés. Ces deux injections peuvent être réalisées en EC à partir d'une seule solution concentrée de l'échantillon en faisant varier le volume injecté [38]. Le taux d'impuretés est ensuite calculé en tenant compte des volumes injectés. Il est essentiel dans le calcul du taux d'impuretés en % (surface/surface) d'utiliser les surfaces corrigées (surface/temps de migration) pour tenir compte des temps de résidence différents des espèces dans la fenêtre du détecteur.La relation surface-concentration est linéaire [9][10][11]13,[15][16][17][18][19][22][23][24][25][26][27][28]30]. Les droites d'étalonnage passent par l'origine lorsque des volumes constants de solutions de concentration croissante sont injectés, mais ne passen...

Validation of capillary electrophoresis – mass spectrometry methods for the analysis of a pharmaceutical formulation

“…For this purpose, a representative pharmaceutical formulation was selected with lidocaine as active principle, since this compound can be detected in both UV and ESI-MS detection modes. Validations were performed according to ICH (International Conference on the Harmonization of the Technical Requirements of Pharmaceuticals for Human Use) guidelines [13,14] and SFSTP (Société Franç aise des Sciences et Techniques Pharmaceutiques) requirements [15,16], as already reported in the literature for CE-UV methods [17][18][19][20][21][22].…”

Determinação simultânea de resíduos de cloranfenicol, tianfenicol e florfenicol em leite bovino por cromatografia eletrocinética micelar

“…O limite de detecção (LOD) [41][42][43] foi considerado como a concentração do analito que produziu um sinal três vezes maior que o ruído do sistema e variou de 4,3 a 5,3 μg L -1 . O limite de quantificação (LOQ) [41][42][43] , adotado como a menor concentração do analito que produziu um sinal dez vezes maior que o ruído do sistema com um grau de confiança aceitável (desvio padrão relativo, RSD < 15%), variou de 8,3 a 9,0 μg L -1 .…”

“…O limite de quantificação (LOQ) [41][42][43] , adotado como a menor concentração do analito que produziu um sinal dez vezes maior que o ruído do sistema com um grau de confiança aceitável (desvio padrão relativo, RSD < 15%), variou de 8,3 a 9,0 μg L -1 . A precisão do método proposto (incluindo as etapas de extração/pré-concentração das amostras e a separação por MEKC), expressa como RSD, foi determinada em condições de repetibilidade (intradia) pela análise sucessiva de dez replicatas (n=10) de uma solução padrão combinada preparada na matriz e contendo 20 μg L -1 de cada anfenicol.…”

Fundamental aspects of chiral separations by capillary electrophoresis

“…In the context of the present review, some attention should be called to some aspects of method validation. With CE separations, the effort for method validation [41] is often significant and usually higher compared to chromatographic methods. The need of robust methods sets some boundary conditions to the optimization.…”