Utilização do choque osmótico na avaliação da viabilidade de sêmen criopreservado de ovinos

Menezes, Gabriel Felipe Oliveira de; Bittencourt, Rodrigo Freitas; Filho, Antônio de Lisboa Ribeiro; Chalhoub, Marcos; Bittencourt, Marta Freitas; Oba, Eunice; Bicudo, Sony Dimas

doi:10.11606/issn.2318-3659.v50i5p396-405

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“…Posteriormente à coleta, os ejaculados foram avaliados quanto às características físicas, tais como o volume, a cor, o aspecto e o odor, bem como quanto às características microscópicas, por meio de turbilhonamento, motilidade total e progressiva, vigor espermático e viabilidade funcional e estrutural de membrana, pelo choque hiposmótico com água destilada e corante supravital eosina, respectivamente (Manual..., 2013; Menezes et al, 2013;Barth e Oko, 1989).…”

Section: Methodsunclassified

“…As descongelações das amostras foram realizadas ao menos 60 dias depois, incubandose as palhetas em banho-maria a 37°C, por 30 segundos (Lucidi et al, 2001), e, em seguida, foram submetidas à análise subjetiva, conforme preconizado pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal (Manual..., 2013), de motilidade total (MT, %), motilidade progressiva (MP, %) e vigor espermático (VIG, 1-5). A avaliação da integridade funcional (HOST, %) da membrana plasmática foi realizada pelo choque osmótico, com água destilada (Menezes et al, 2013), e, quanto à integridade estrutural (SV, %), foi utilizado o corante supravital eosina (Barth e Oko, 1989). Todas as análises de todos os diluidores testados foram realizadas pelo mesmo avaliador, que recebia as amostras identificadas por números aleatórios.…”

Section: Methodsunclassified

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Utilização da lipoproteína de baixa densidade, em diferentes concentrações, em meio diluidor para criopreservação do sêmen ovino

Lima

Bittencourt

Filho

et al. 2019

Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.

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Utilização da lipoproteína de baixa densidade, em diferentes concentrações, em meio diluidor para criopreservação do sêmen ovino [Use of low density lipoprotein in different concentrations in diluent medium for cryopreservation of ovine semen]A. RESUMOA utilização da gema de ovo dificulta a padronização de meios diluidores e apresenta riscos biológicos. Assim, este estudo avaliou diferentes concentrações da lipoproteína de baixa densidade (LDL), em substituição à gema de ovo, para a confecção de diluentes para criopreservação espermática em ovinos. Foram utilizados um diluidor controle (CTR= 20% de gema de ovo) e cinco tratamentos, substituindo-se a gema pelas diferentes proporções de LDL (T1=6%; T2=8%; T3=12%; T4=16%; T5=20%), todos à base de TRIS-glicerol. Para o estudo, utilizaram-se dois ejaculados, de seis reprodutores da raça Santa Inês. Sessenta dias após a criopreservação, as amostras foram descongeladas e avaliadas subjetivamente quanto à motilidade total (MT, %) e progressiva (MP, %), ao vigor (1-5) e à integridade funcional (choque hisposmótico com água destilada, %) e estrutural (corante supravital eosina, %) das membranas espermáticas. As avaliações de vigor e funcionalidade de membrana não diferiram (P>0,05) entre os grupos. Entretanto, os grupos T4 (P<0,01) e T5 (P<0,05) foram superiores ao CTR para os parâmetros MT, MP e integridade estrutural de membrana, o que confirma que as LDLs podem ser alternativas eficientes para substituição da gema de ovo em diluidores para criopreservação de sêmen ovino. ABSTRACTThe use of egg yolk makes it difficult to standardize extenders and presents biological hazards. Thus, this study evaluated different concentrations of low-density lipoprotein (LDL) to replace yolk extenders for production of sperm for cryopreservation in ovine. A control extender was used (CTR= 20% yolk) and five treatments, replacing the yolk by different ratios of LDL (T1= 6%; T2= 8%, T3= 12%; T4= 16%; T5= 20%) all based on TRIS-glycerol. For the study, two ejaculates from six Santa Ines breeding were used. Sixty days after cryopreservation, the samples were thawed and evaluated for total motility (MT, %) and progressive motility (MP, %), vigor (1-5) and the functional integrity (hyposmotic shock with distilled water, %) and structural (supravital dye eosin, %) of the sperm membranes. The evaluations of strength and membrane functionality didn't differ (P> 0.05) between groups. However, T4 (P< 0.01) and T5 (P< 0.05) groups were superior to the CTR for the MT, MP, and membrane structural integrity parameters, which confirms that LDLs can be efficient alternatives for yolk replacement in extenders for cryopreservation of ovine semen.

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Section: Methodsunclassified

Utilização da lipoproteína de baixa densidade, em diferentes concentrações, em meio diluidor para criopreservação do sêmen ovino

Lima

Bittencourt

Filho

et al. 2019

Arq. Bras. Med. Vet. Zootec.

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“…O choque osmótico (CO) também foi realizado como descrito para o sêmen in natura, entretanto a proporção foi modificada, incubando-se 10 µL de sêmen em 100 µL de água destilada por 5 minutos e na sequência a amostra foi fixada com 100 µL de formol-salina tamponado (25) . O delineamento estatístico empregado foi inteiramente casualizado (26) , no qual os ejaculados foram considerados as repetições (n=20) e os diluidores de sêmen foram os tratamentos (n=7).…”

Section: Methodsunclassified

Dimetilacetamida Associada Ou Não Ao Glicerol Para Criopreservação De Sêmen Ovino

et al. 2018

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Resumo O objetivo do presente estudo foi testar a dimetilacetamida (DMA) em diferentes concentrações, associada ou não ao glicerol (GL), sobre a viabilidade espermática do sêmen ovino congelado. Foram utilizados 10 ejaculados de dois carneiros adultos da raça Santa Inês. Os ejaculados foram divididos em sete grupos experimentais, respeitando o limite máximo de 5% de DMA, sendo eles: GL6%, DMA3%, GL5%+DMA1%, GL4%+DMA2%, GL3%+DMA3%, GL2%+DMA4%, GL1%+DMA5%. Os espermatozoides criopreservados nos diferentes tratamentos foram analisados quanto à cinética subjetiva, integridade estrutural da membrana plasmática (EOS), integridade funcional da membrana plasmática (CO) e morfologia espermática, observando defeitos totais (DT) e defeitos maiores (DM). A motilidade total (MT) e a progressiva (MP) pós-descongelação nos grupos GL5%+DMA1%; GL4%+DMA2% e GL3%+DMA3%, foram semelhantes (P>0,05) ao tratamento controle (GL6%). Destes, o diluidor GL4%+DMA2% foi o único que promoveu a manutenção da MT e MP pós-descongelação, quando comparado com o sêmen in natura (P>0,05). Não foram observadas diferenças significativas (P>0,05) para os parâmetros de EOS, CO, DT e DM nos diferentes grupos avaliados. A dimetilacetamida associada ao glicerol mostrou-se eficaz na manutenção da viabilidade espermática em ovinos, avaliada pós-descongelação. Entretanto, foi observado efeito deletério da DMA nas concentrações mais elevadas ou quando não esteve associada ao glicerol.

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“…La integridad estructural de la membrana (EOS) se evaluó con la prueba supra vital utilizando el colorante eosina en un microscopio de luz con un aumento de 400 X (Cedenho & Tokunaga, 1995). La integridad funcional de la membrana plasmática (CH) se estimó mediante una prueba hipo osmótica (Comercio, Monachesi, Loza, Gambarotta, & Wanke, 2013;Menezes et al, 2013). La morfología espermática se evaluó con una preparación de solución salina tamponada de formaldehído (Hancock, 1956).…”

Section: Recolecta De Semenunclassified

Biometría testicular y características seminales en felinos neotropicales (Carnivora: Felidae) sometidos a cateterismo uretral

Madrigal‐Valverde¹

2019

RBT

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Introducción: La administración de de un agonista de un fármaco alfa- 2-adrenérgicos asociada con la técnica del cateterismo uretral , es un método de desarrollo reciente en la colección seminal en felinos, ofreciendo las ventajas sobre la colecta por electroeyaculación y la colecta epididimária. La técnica se ha probado en Panthera onca y felinos de pequeño porte. Métodos: En este estudio se utilizaron individuos de Panthera onca , Puma yagouaroundi y Leopardus wedii en cautiverio en el parque Zoobotánico Getúlio Vargas, Salvador, Bahia, Brasil. Fue utilizado los farmácos de clorhidrato de medetomidina (0,1mg /kg) y cetamina (5mg /kg) y fue colectado semen por medio del cateterismo uretral. Durante el desarrollo del procedimiento, se realizó la colecta de los datos biométricos corporales y testiculares, así como la ultrasonografáa de los testículos. Las muestras seminales frescas fueron evaluadas los parámetros de volumen, por microscopía convencional, el vigor espermático, motilidad total, motilidad progresiva, la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática y la morfología espermática. Las muestras se sometieron a un proceso de congelación - descongelación utilizando tres diferentes crioprotectores. Las muestras descongeladas fueron evaluadas por microscopía convencional, análisis seminal computarizado y citometría de flujo. Resultados: En este estudio fue realizado con éxito la técnica de colección seminal en las tres especies, siendo el primer estudio que informa de los parámetros seminales de P. yagouaroundi y el primero que reporta la colección seminal uretral en L. wiedii. Los datos presentados describen la morfocinética espermática de las especies incluidas de forma pionera. No hubo diferencias (P>0,05) en la calidad seminal evaluando por grupo de crioprotector, ni diferencias en la integridad de las membranas pré e post-congelamento. Discusión: Foi posible solamente la comparación con otras técnicas de colección seminal o con resultados de calidad seminal obtenidos de muestras de gato doméstico. El establecimiento de una potencial asociación de las características físicas del animal y la calidad seminal, es información de suma importancia en la aplicabilidad para la elección de reproductores en los programas de reproducción asistida.

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Utilização do choque osmótico na avaliação da viabilidade de sêmen criopreservado de ovinos

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Utilização da lipoproteína de baixa densidade, em diferentes concentrações, em meio diluidor para criopreservação do sêmen ovino

Utilização da lipoproteína de baixa densidade, em diferentes concentrações, em meio diluidor para criopreservação do sêmen ovino

Dimetilacetamida Associada Ou Não Ao Glicerol Para Criopreservação De Sêmen Ovino

Biometría testicular y características seminales en felinos neotropicales (Carnivora: Felidae) sometidos a cateterismo uretral

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