Fragmentation has drastically altered the quality of habitats throughout numerous ecosystems, often leading to dramatic changes in the composition of wildlife communities. The ecology and associated movement behavior of a species may also be modified as a result of forest fragmentation, resulting in changes in genetic composition of the affected species. In this research, we evaluated the genetic structure of the Virginia opossum (Didelphis virginiana Kerr, 1792) at the landscape and local scales in a fragmented, agricultural ecosystem in northern Indiana using 13 microsatellite loci. We examined 290 samples from opossums inhabiting 28 discrete habitat patches, and evaluated partitioning of genetic variation of opossums among and within habitat patches. We observed low but significant levels of genetic structure (FST = 0.005) overall, and pairwise comparisons of FST values among habitat patches also were relatively low. Relatedness within patches was highly variable (-0.077 ≤ rxy ≤ 0.060), with a few patches exhibiting significantly higher levels of relatedness than random expectations, and we detected no evidence of sex-biased natal dispersal. These results contrast with previous field studies that documented male-biased dispersal in the Virginia opossum, indicating dispersal in this species is plastic and dependent upon local environmental conditions.Résumé : La fragmentation a fortement modifié la qualité des habitats dans un grand nombre d'écosystèmes, ce qui a souvent causé des changements spectaculaires dans la composition des communautés de la faune sauvage. L'écologie et le comportement de déplacement associé d'une espèce peuvent aussi être changés à cause de la fragmentation des forêts, ce qui entraîne une altération dans la composition génétique de l'espèce affectée. Notre étude évalue à l'analyse de 13 locus microsatellites la structure génétique des sarigues de Virginie (Didelphis virginiana Kerr, 1792) aux échelles du paysage et de la localité dans un écosystème agricole fragmenté dans le nord de l'Indiana. Nous avons examiné 290 échantillons de sarigues habitant 28 taches séparées d'habitat et mesuré la partition de la variation génétique des sarigues entre les taches d'habitat et à l'intérieur de ces taches. Il existe des niveaux faibles, mais significatifs, de structure génétique (FST = 0,005) dans l'ensemble; les comparaisons deux par deux des valeurs de FST dans les taches d'habitat sont aussi relativement faibles. Le degré de parenté à l'intérieur des taches est très variable (-0,077 ≤ rxy ≤ 0,060), mais quelques taches affichent des degrés de parenté significativement supérieurs à ce qu'on attend par chance; il n'y a pas d'indication de dispersion à la naissance particulière selon le sexe. Ces résultats sont bien différents de ceux d'études de terrain antérieures qui décrivent une dispersion qui favorise les sarigues de Virginie mâles, ce qui montre que la dispersion est variable chez cette espèce et dépend des conditions locales de l'environnement.[Traduit par la Rédaction]