Untersuchungen zur UV‐induzierten Mutationsauslösung bei einigen Streptomycin‐abhängigen Stämmen von Proteus mirabilis Hauser

Abstract

EinleitungBei Proteus ist die Anzahl der Publikationeri iiber Mutationsausloisung durch UV recht gering. Versuche von HUTCHINSON und MEDILL (1954), biochemische Mutanten zu erhalten, waren erfolglos. Auch LEDERBERG (1948) macht gleiche Angaben iiber unveroffentlichte Ergebnisse von BEAM und TATUM. Bei eigenen Bestrahlungsversuchen wurde eine Penicillin-Wasser-Behandlung eingefiihrt (MATES u. BOHME 1960). Hierbei wurden zwar einige Mangelmutanten isoliert ; jedoch konnte nicht eindeutig nachgewiesen werden, dalj es sich tatsiichlich um UV-induzierte Mutanten handelt. Diese Erfahrungen lieBen es wiinschenswert erscheinen, die Wirkung der UV-Strahlen auf Proteus niihermit der gleichen Methodik wie bei Escheria coli (DEMEREC 1950) -zu untersuchen. Das hier angewandte Selektionsverfahren beruht auf dem Nachweis des Mutationsschrittes von der Abhangigkeit zur Unabhiingigkeit gegenuber Streptomycin2).Zunachst wurde der EinfluB von UV-Strahlen bei einigen str-abhangigen Mutanten sowie bei einem Wildtypstamm von Protezcs ermittelt. Um zu kliiren, ob nach UV-Einwirkung auf str-abhiingige Bakterien str-unabhangige Mutanten (Revertanten) nachgewiesen werden konnen, wurden die Bakterien vor und nach der Bestrahlung niit, verschieden hoher Dosis unter verschiedenen Bedingungen kultiviert. Material und MethodikRtLm me. Fur die Untersuchungen wurden aus Stamm VI isolierte str-abhlngige Mutanten, die StLmme str-d-3, 7, 9, 10, 12, 15, 16, 17, 45 sowie 48 (BOHME 1961a) und aul3erdem Mutantenstamme eines anderen Ausgangsstammes (167), die str-abhangigen StLmme str-d-l67/10, 9, 8, 7 verwendet. Die Stiimme wurden nach dem Nomenklnturvorschlag von DEMEREC (1956) bezeichnet.K u l t u r b e d i n g u n g e n , Die verschiedenen Kultur-und Versuchsbedingungen werden an den entsprechcnden Stellen im Text wiedergegeben. Nachstehend wird nur die allgemeine Methodik bis znr erfolgten Bestrahlung besprochen. Die Nahrlosung setzte sich zusamnien am: lo& gemiirserten Briihwiirfeln (VEB ,,Suppina", Nahrungsmittelwerke l ) Dr. MARGOT MATES, Wernigerode/Harz, Maxim-Gorki-Str. 4 a 2) Streptomycin im folgendpn abgekurzt str UV-induzierte Mutationen bei Proteus mirabilis 23Auerbach/Vogtland, mit einem durchschnittlichen Kochsalzgehalt von 55%). 1% Pepton, 0,5% Kochsalz, pH 6,9 bis 7.0. Fur Plattenkulturen erhielt diese Nahrlosung einen Agar-Zusatz von 2-2,5y0 Den Niihrmedien der str-abhiingigen Stlmme wurden 50 y Streptomycin-Sulfat pro ml Niihrlosung bzw. 30 y pro ml Niihragar zugesetzt (optimale Mengen). Werden str-freie Niihragarplatten beimpft'), so uberlebt ausschlieBlich der gesuchte Reversionstyp, alle ubrigen (nur in Anwesenheit von Streptomycin wachstumsfahigen) Zellen stellen dagegen das Wachstum ein und autolysieren. Die Versuchskulturen wurden nach 14stundiger Bebrutung in der Schuttelmaschine bei 37 "C zur Entfernung des Streptomycins in physiologischer Kochsalzlosung gewaschen und in SORENSEN-Puffer resuspendiert .B e s t r a h l u n g . Zur Bestrahlung diente eine Hg-Niederdruck-Quarzlampe ,,Solimed" der Firma BR. HOPFEL, Leipzig-Markl...