Untersuchungen zur Möglichkeit der Empfindlichkeitstestung von Mykobakterien mit dem MB/BacT-Kultursystem

Abstract

Zusammenfassung: Es wurde eine Methode zur Empfindlichkeitstestung von Mykobakterien in Flüssigkulturmedien ohne Verwendung radioaktiver Isotope entwickelt: Kommerziell erhältliche MB/BacT-Kulturflaschen wurden mit geeigneten Konzentrationen von Antituberkulotika versetzt, anschließend mit einer Mykobakterien-Testsuspension (MacFarland Nr. 1) beimpft und im MB/BacT-System bebrütet. Bei der Untersuchung von Pyrazinamid (PZA) wurde außerdem der pH-Wert in den Kulturflaschen mit 2? 4 auf 5,5 abgesenkt. Eine Antituberkulotika-freie Kulturflasche, die mit der 1:100 verdünnten Testsuspension beimpft wurde, diente als Kontrolle (1%-Kontrolle). Wenn vom MB/BacT-System in dieser Kontrollflasche Wachstum erkannt wurde (nach ca. 7 Tagen), wurde die Untersuchung beendet und der bis zu diesem Zeitpunkt in den Antituberkulotika-haltigen Kulturflaschen festgestellte Wachstumsstatus bewertet. Für ausgewählte M. tuberciilosis-Stämme wurden die MHK-Werte folgender Antituberkulotika bestimmt: Ethambutol (EMB), Isoniazid (INH), Rifampicin (RMP), Streptomycin (SM), Dihydrostreptomycin, Protionamid und PZA. Die Testung von 16 M. tuberculosis-Stämmen und 3 Stämmen atypischer Mykobakterien gegenüber EMB (2,5 mg/1), INH (1,0 mg/1), RMP (2,0 mg/1), SM (2,0 mg/1) und PZA (50 mg/1) ergab die gleichen Empfindlichkeitsbewertungen, wie sie mit Referenzmethoden (Verdünnungstest mit Löwenstein-Jensen-Medium, BACTEC 460TB) erhalten wurden. Schlüsselwörter: Mikrobielle Empfindlichkeitstestung/Methodik; Mycobacterium tuberculosis/Medikamenteneffekte; Antituberkulotika. 1 Teile dieser Arbeit wurden auf der 48. Jahrestagung der DeutschenSummary: A method for susceptibility testing of mycobacteria using isotope-free fluid culture media was developed. Commercially available MB/BacT process bottles supplemented with antituberculotics in adequate concentrations were inoculated with a mycobacteria test Suspension (MacFarland No.l) and loaded into the System. In case of testing pyrazinamide (PZA), the medium in the culture bottles was acidified to pH 5.5 by 2? 4 . bottle without antituberculotics inoculated with a 1:100 dilution of the test suspension served äs a control (1% control). At the time the MB/BacT recognized growth in the control bottle, the test was terminated (after approximately 7 days) and the growth Status of the bottles containing antituberculotics was determined. The minimum inhibitory concentrations of ethambutol (EMB), isoniazid (INH), rifampicin (RMP), streptomycin (SM), dihydrostreptomycin, prothionamid, and PZA were determined for selected strains of M. tuberculosis. The susceptibility testing of 16 strains of M. tuberculosis and 3 mycobacteria other than tubercle bacilli to EMB (2.5 mg/1), INH (1.0 mg/1), RMP (2.0 mg/1), SM (2.0 mg/1), and PZA (50 mg/1) exhibited the same susceptibility patteras äs Standard methods (dilution method with Löwenstein-Jensen medium, BACTEC 460 TB).