Untersuchungen zur Ernährungsphysiologie von Labyrinthula coenocystis Schmoller

Abstract

Friihere Untersuchungen hatten ergeben, dal3 Laby rinthula coenocystis in zweigliedrigen Reinkulturen mit verschiedenen Bakterien-und Hefearten, desgleichen rnit abgetoteten Putterzellen, nicht jedoch mit steril filtrierten Bestandteilen aus abgetotetenFutterzellen gehalten werden kann (KLIE u. SCHWARTZ 1963, KLIE 1965). Zur weiteren Charakteristik der Ernahrungsanspriiche wurden zunachst im Desintegrator zertrummerte E . coli-Zellen, mit Quarzsand zerriebene Hefen, Penicillin-Spharoplasten gramnegativer Bakterien und Lysozym-Protoplasten von Micrococcus lysodeikticus als Nahrsubstrat gepriift. Eine Aufgliederung der Futterorganismen in bestimmte Zellfraktionen erschien notwendig, urn festzustellen, ob die fiir Lab. coenocystis wesentliehe Stoffgruppe in Zellwandstrukturen oder Zellinhaltsstoffen zu suchen ist. SchlieRlich gingen wir dazu iiber, Medien ohne geformte Bestandteile fiir die Reinkultur von Labyrinthula aufzubauen. Material, Methoden und ErgebnisseI. Medien m i t g e f o r m t e n N a h r b o d e n b e s t a n d t e i l e n 1 . Bakterien-und Hefezellen a) Praparationsmethoden Desintegration von E. coli-Zellen Abzentrifugierte, einmal rnit physiologischer NaC1-Losung gewaschene Zellen einer 18 h-Schiittelkultur von E . coli B in Fleischbouillon bei 37 "C wurden in physiologischer NaCl-Losung suspendiert (Titer lo1* Zellen/ml) und wahrend 10 min bei + 2 "C unter Zusatz von Glaskugeln und DNase im MIcKLE-Desintegrator bei 50 cycles/min zerstort. Das Rohrchen war bis zu einer Hohe von 1,5 cm rnit BALLoTrm-Perlen Nr. 12 (= 9,6 g) gefullt und enthielt 4 ml Bakteriensuspension. Die weitere Aufarbeitung der Bakterienzellen erfolgte nach der bei SALTON (1964) angegebenen Methode. Die abzent,rifngierten Zellwande wurden durch Behandlung mit O,l%iger Trypsin-Losung in 0,05 M Phosphatpuffer pH 7,s (18 h bei 37 "C) von anhaftenden Protcinen befreit und als autoklavierte Leitungswassersuspension dem Seewasseragar aufgetropft.' Elektronenrnikroskopische Aufnahmen bestat'igen. daW diese Vorbehandlung eine weitgehend gereinigte Zellwandfraktion liefert. I n Parallelversuchen haben wir eine in gleicher Weise hergestellte Zellwandfraktion ohne vorherige Trypsinbehandlung verfuttert, nachdem sie abwechselnd je zweimal mit 1 11 KaC1-Losang und aqua desk gewaschen worden war. . Allgem. Mikro-%rit,rlhrift f. Allg. Btikrobiologic, Ed. 9, €1. 1 biologie. 3301 Stockheim iiber Braunschweig, Mascheroder Weg 1.