Untersuchungen über die Möglichkeit zur serologischen Differenzierung von Clostridium species mittels Enzym‐Immun‐Verfahren

Abstract

Investigation on Serotyping and Diagnosis of Clostridiu by Enzyme-Immuno-AssayA method for serotyping and diagnosis of 30 selected Clostridia strains of 12 different species hy an enzyme-immuno-assay using polystyrene balls as a solid phase is described and tested for its efficiency. The reference strains and the homologous test strains could be differentiated from the heterologous in principle. A reliable detection of the several serotypes of CI. pefringens was not perfectly to achieve with the conjugates used here, cross-reaction with CI. chuuvoei could be removed by absorption. The conjugate of CI. bifermentuns reacted with CI. sordellii and CI. difficile too, and must be absorbed prior any diagnostic application with vegetative cells of the corresponding strains.Concerning the antigenic relationships between the Clostridia strains used here, the results of ELLNER and GREEN (7, 8) as well as of POXTON and BYRNE (14) could be reconfirmed. Moreover the applied technique offers the possibility to come to a more detailed result concerning the degree of antigenic relationship. The developed method is a valuable tool for the differentiation of pathogenic Clostridia and within the group Cl. bifermentanslC1. sordellii/Cl. difficile a rapid diagnosis at the species level could be achieved. Some limitations by cross-reactions are given, but results can be improved by absorption of the conjugates. REICHE und BOHMDie Diagnostik der Clostridien basiert derzeit auf der Erfassung morphologischer Parameter, von Stoffwechseleigenschaften und auf den Ergebnissen des Tierversuchs (Toxinbildungsvermogen) (16). Die Anwendung gaschromatographischer oder serologischer Techniken setzt sich nur zogernd durch (1 7). Gerade dem Enzym-Immun-Verfahren kommt wegen des geringen Zeitbedarfs und der relativ einfachen Durchfiihrung mit bereits vorhandenen Laborgeraten immer mehr Bedeutung in der serologischen Diagnostik zu.Basierend auf den Erkenntnissen von BOHM et al. (2, 3, 4, 5 ) wurde ein Festphasen-Enzym-Immun-Verfahren entwickelt und erprobt. Im Rahmen der Untersuchungen von NIEDERW~HRMEIER (13) und REICHE (15) wurde unter anderem gepruft, inwieweit dieses Verfahren zur serologischen Differenzierung von Pseudomonadaceae, Ban'llaceae und Clostridium species eingesetzt werden kann. In folgenden Arbeiten werden die mit dieser Technik gemachten Erfahrungen und erzielten Ergebnisse mit Keimen der Gattung Clostrzdium zusammengefafit sowie mit denen von BATTY und WALKER (I), ELLNER und GREEN (7, 8) sowie POXTON und BYRNE (14) verglichen. Material und Methoden Verwendete Clostridien-StammeDie verwendeten Clostridium spp. sind in der Tabelle 1 zusammengefadt. Die Differenzierung der Feldstamme erfolgt mittels biochemischer und gaschromatographischer Verfahren. Herstellung der AntigeneDie Anziichtung des Zellmaterials erfolgt in Anaerobier-Bouillon nach SCHAEDLER. Die Kulturrohrchen werden bei 37°C solange anaerob bebrutet bis sich eine deutliche Trubung des Mediums bzw. ein grauweider Niederschlag am Boden des Rohrchens gebildet hat. Dann werden...

Similarity in the EDTA-Soluble Antigens of Clostridium Chauvoei and C. Septicum

“…No attempt was made in this study to define the serological relation between C. chauvoei and C. perfringens which was previously reported by some workers (Poxton & Byrne, 1984;Reiche & Bohm, 1991).…”