Ubiquitylation of BAG-1 suggests a novel regulatory mechanism during the sorting of chaperone substrates to the proteasome.

Alberti, Simon; Demand, Jens; Esser, Claudia; Emmerich, Niels; Schild, Hansjörg; Höhfeld, Jörg

doi:10.1016/s0021-9258(19)54981-x

Cited by 12 publications

(15 citation statements)

References 0 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Thus, BAG-1 provides the proteasome with the capability to recruit Hsp70 and consequently degrade its cargo clients. A ternary complex involving BAG-1, Hsp70 and CHIP has been isolated, and BAG-1 is capable of stimulating CHIP mediated degradation of some proteins (Alberti et al, 2002). The co-chaperone HspBP1, in turn, competes with BAG-1 for binding to the ATPase domain of Hsp70 (Alberti et al, 2004).…”

Section: Role Of the C-terminus Hsp70-interacting Protein (Chip) In Pdmentioning

confidence: 99%

Etiology and Pathophysiology of Parkinson's Disease

Rana¹

2011

View full text Add to dashboard Cite

is a Canadian neurologist who specializes in the field of Parkinson's disease and Movement Disorders. He is a fellow of the Royal College of Physicians and Surgeons of Canada. After completing his neurology residency training, Dr. Rana undertook a clinical fellowship in Parkinson's disease and Movement Disorders at the University of Ottawa, Canada. He is currently the director of the Parkinson's Clinic of Eastern Toronto and Movement Disorders Centre located in Toronto, Canada. He is also founder of World Parkinson's Education Program. He is the author of "Frequently Asked Questions About Parkinson's Disease", which is a series of thirteen brochures about Parkinson's disease, translated in many languages and used in several countries around the world. Dr. Rana has also written the following books: "A Synopsis of Neurological Emergencies", "An Aid to Neuro-ophthalmology", "An introduction to Essential Tremor", "50 Ways Parkinson's Could Affect You", and "What is Parkinson's disease in Arabic?".

show abstract

Section: Role Of the C-terminus Hsp70-interacting Protein (Chip) In Pdmentioning

confidence: 99%

Etiology and Pathophysiology of Parkinson's Disease

Rana¹

2011

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Η BAG1 και η CHIP επίσης αλληλεπιδρούν µεταξύ τους και έχει προταθεί ότι µπορούν να πάρουν υποστρώµατα από το σύστηµα HSC70/HSP90 και να τα οδηγήσουν στο πρωτεόσωµα για αποικοδόµηση. Ακόµα η CHIP µπορεί να προσδέσει πολυµερή ουµπικουιτίνης στην BAG1, κάτι που φαίνεται να βοηθά τη σύνδεση της BAG1 µε το πρωτεόσωµα (Alberti et al, 2002). Τέλος, αυτά τα βοηθητικά συνοδά µόρια φαίνεται να επιτελούν και άλλες λειτουργίες που δε σχετίζονται µε την αποικοδόµηση των πρωτεϊνών (Song et al, 2001).…”

Section: A44 το όψιµο ευκαρυωτικό δίκτυο των µοριακών συνοδώνunclassified

Δομή, έκφραση και λειτουργική ανάλυση του θερμοεπαγόμενου γονιδίου hsp83 της μεσογειακής μύγας, Ceratitis Capitata

Θεοδωράκη¹

View full text Add to dashboard Cite

Με στόχο την απομόνωση του γονιδίου hsp83 της μεσογειακής μύγας, πραγματοποιήθηκε διαλογή μιας cDNA βιβλιοθήκης από προνύμφες 3ου σταδίου, με ανιχνευτή το δεύτερο εξώνιο του hsp83 ομόλογου γονιδίου της Drosophila auraria. Από τη διαλογή αυτή προέκυψαν αρκετοί αλληλεπικαλυπτόμενοι κλώνοι, ο μεγαλύτερος των οποίων (CM-1) είχε μέγεθος 2.593 kb και περιελάμβανε ένα ανοιχτό αναγνωστικό πλαίσιο 715 αμινοξέων, από τη μετάφραση του οποίου προκύπτει ένα πολυπεπτίδιο προβλεπόμενου μοριακού βάρους 81,74 kDa. Η προβλεπόμενη αμινοξική αλληλουχία έδειξε πολύ μεγάλη ταυτότητα με όλα τα μέλη της οικογένειας HSP90 και ειδικότερα με τις HSP83 ομόλογες πρωτεΐνες της Drosophila. Επιπλέον, η προβλεπόμενη αμινοξική αλληλουχία περιείχε όλες τις συντηρημένες περιοχές των μελών της οικογένειας των HSP90 και στο καρβοξυτελικό της άκρο, έφερε το πενταπεπτίδιο MEEVD, το οποίο είναι χαρακτηριστικό όλων των κυτταροπλασματικών ισομορφών αυτής της οικογένειας. Με βάση αυτά τα αποτελέσματα ο κλώνος CM-1, ονομάστηκε Cchsp83. Ο κλώνος αυτός, εκτός από ολόκληρη την κωδική περιοχή του γονιδίου, περιείχε μέρος της 5’ μη μεταφραζόμενης περιοχής και ολόκληρη την 3’ μη μεταφραζόμενη περιοχή του hsp83 γονιδίου της μεσογειακής μύγας. Ανάλυση κατά Southern σε γονιδιωματικό DNA με διάφορα ένζυμα περιορισμού και κατάλληλους cDNA ανιχνευτές, έδειξε ότι το Cchsp83 γονίδιο υπάρχει σε ένα μόνο αντίγραφο στο γονιδίωμα της μεσογειακής μύγας. Ανάλυση “Northern” έδειξε την ύπαρξη ενός μεταγράφου με μέγεθος 2,7 kb περίπου. Το Cchsp83 γονίδιο, χαρτογραφήθηκε με in situ υβριδοποίηση σε μία θερμοεπαγόμενη χρωμοσωματική διόγκωση των πολυταινικών χρωμοσωμάτων των σιελογόνων αδένων του εντόμου (6R:94C). Η μελέτη του προτύπου έκφρασης του γονιδίου Cchsp83 έγινε σε επίπεδο RNA με RT-PCR σε ολικό RNA και σε επίπεδο πρωτεΐνης με ανάλυση Western σε ολικά πρωτεϊνικά εκχυλίσματα. Αντισώματα για την CcHSP83 αναπτύχθηκαν μετά από έκφραση ενός σημασμένου με 6 His τμήματος του Cchsp83 cDNA (490-690aa) σε βακτήρια E. coli. Η αντίδραση του Cchsp83 γονιδίου στην αύξηση της θερμοκρασίας είναι πολύ γρήγορη και ευαίσθητη. Μετάγραφα του γονιδίου ανιχνεύονται μετά από 5 λεπτά θερμικού στρες και σε θερμοκρασίες αρκετά χαμηλές (300C). Η επαγωγή του γονιδίου γίνεται μέγιστη μετά από 30-60 λεπτά θερμικού στρες στους 37-390C. Η επαναφορά της έκφρασης του γονιδίου στα φυσιολογικά επίπεδα μετά από θερμικό στρες είναι αργή, αφού για να γίνει αυτό απαιτούνται 4 ώρες ανάκαμψης στους 250C, μετά από μόλις 30 λεπτά θερμικού στρες στους 380C. Αναπτυξιακή μελέτη του προτύπου έκφρασης του Cchsp83 έδειξε ότι το γονίδιο εκφράζεται σε όλη τη διάρκεια της ανάπτυξης της μεσογειακής μύγας. Στους 250C τόσο τα επίπεδα του RNA, όσο και τα επίπεδα της πρωτεΐνης, είναι υψηλά στα εμβρυικά στάδια, χαμηλά στα προνυμφικά και μέτρια στα νυμφικά και ενήλικα στάδια. Μετά από θερμικό στρες στους 380C, τα επίπεδα των μεταγράφων αυξάνονται αρκετά, ιδιαίτερα στα στάδια που σε φυσιολογικές συνθήκες είναι χαμηλά. Όσον αφορά στα επίπεδα της πρωτεΐνης, τα αποτελέσματα ήταν παρόμοια μετά από θερμικό στρες στους 350C, αλλά όχι στους 37-390C, όπου δεν παρατηρήθηκε καθόλου επαγωγή. Το γεγονός αυτό υποδηλώνει ότι σε υψηλές θερμοκρασίες καταστέλλεται η ωρίμανση ή και η μετάφραση του Cchsp83 RNA. Με στόχο την απομόνωση των ρυθμιστικών περιοχών του γονιδίου Cchsp83 της μεσογειακής μύγας, πραγματοποιήθηκε διαλογή μιας χρωμοσωματικής λEMBL-4A βιβλιοθήκης, με ανιχνευτή το δεύτερο εξώνιο του hsp83 ομόλογου γονιδίου της Drosophila auraria. Από τη διαλογή αυτή απομονώθηκαν δύο κλώνοι, ένας από τους οποίους περιελάμβανε μέρος της κωδικής περιοχής, την 5’ μη μεταφραζόμενη περιοχή και 3,5 kb της 5’ ανοδικής περιοχής του γονιδίου Cchsp83. Σύγκριση της γονιδιωματικής αλληλουχίας με τη cDNA αλληλουχία, αποκάλυψε την ύπαρξη ενός μικρού εσωνίου 275 bp ανάμεσα στην 5’ μη μεταφραζόμενη περιοχή και στην αρχή της κωδικής περιοχής του γονιδίου. Βιοπληροφορική ανάλυση και πειράματα 5’ RACE, υποδηλώνουν ότι το σημείο έναρξης της μεταγραφής του γονιδίου βρίσκεται 144 bp ανοδικά του 5’ άκρου του εσωνίου και 23 bp καθοδικά ενός τυπικού στοιχείου TATA (ΤΑΤΑΑΑΤΑ). Δύο πιθανά στοιχεία απόκρισης στη θερμοκρασία (HSEs) εντοπίστηκαν στην εγγύς 5’ περιοχή του γονιδίου, 35 και 330 bp ανοδικά του στοιχείου TATA.

show abstract

“…Καθώς οι BAG-1 ισοµορφές περιέχουν ένα ULD θεωρείται ότι εµπλέκονται στη ρύθµιση του συστήµατος ουβικουιτίνης . Η BAG-1 µπορεί να προσδεθεί άµεσα σε συστατικά του µηχανισµού ουβικουιτινίωσης (Alberti et al 2002, Luders et al 2000a. Η σύζευξη της ουβικουιτίνης απαιτεί τη διαδοχική δράση τριών ενζύµων, ενός ενζύµου ενεργοποίησης (Ε1), ενός ενζύµου σύζευξης (Ε2), και λιγασών ουβικουιτίνης (Ε3s) .…”

Section: εισαγωγήunclassified

“…Η σύζευξη της ουβικουιτίνης απαιτεί τη διαδοχική δράση τριών ενζύµων, ενός ενζύµου ενεργοποίησης (Ε1), ενός ενζύµου σύζευξης (Ε2), και λιγασών ουβικουιτίνης (Ε3s) . Οι E3s παίζουν ένα σηµαντικό ρόλο στην επιλεκτικότητα αυτής της διαδικασίας και ο ρόλος της BAG-1 εδραιώνεται περισσότερο από τις παρατηρήσεις ότι προσδένεται σε δύο µόρια µε 'E3' δραστηριότητα, τα Siah και CHIP (Alberti et al 2002).…”

Section: εισαγωγήunclassified

Ανοσοβιολογική Μελέτη Της Χρήσης Πεπτιδίων Και Μονοκλωνικών Αντισωμάτων Στην Επιλεκτική Χημειοθεραπεία Του Καρκίνου

Νιάρχος¹

View full text Add to dashboard Cite

Intracellular transfer of antisense oligonucleotides could be utilized for the development of new therapeutic approaches. Cellular uptake is greatly enhanced by conjugation of oligonucleotides to cell-penetrating peptides (CPPs), with minimal cytotoxicity observed. A novel CPP, BagP, derived from the normally expressed human protein Bag-1, was evaluated for its potential to ferry intracellularly, biologically-active oligonucleotides. An antisense oligonucleotide against c-myc, AACGTTGAGGGGCAT (antimyc-aug), was conjugated for this reason to BagP. The [BagP+antimyc-aug] conjugate was found to penetrate all cell lines tested at varying degrees. The internalization of the conjugate was found to silence c-myc, causing a severe decrease in the proliferation rate of the cells, that was further supported by a decrease found on the level of intracellular c-Myc protein.

show abstract

Ubiquitylation of BAG-1 suggests a novel regulatory mechanism during the sorting of chaperone substrates to the proteasome.

Cited by 12 publications

References 0 publications

Etiology and Pathophysiology of Parkinson's Disease

Etiology and Pathophysiology of Parkinson's Disease

Δομή, έκφραση και λειτουργική ανάλυση του θερμοεπαγόμενου γονιδίου hsp83 της μεσογειακής μύγας, Ceratitis Capitata

Ανοσοβιολογική Μελέτη Της Χρήσης Πεπτιδίων Και Μονοκλωνικών Αντισωμάτων Στην Επιλεκτική Χημειοθεραπεία Του Καρκίνου

Contact Info

Product

Resources

About