Trennung von Tocopherolen und Tocotrienolen durch HPLC

Abstract

Die jeweils vier Tocopherole (T) und Tocotrienole (T3) sowie Plastochromanol-8 (P-8) und BHA wurden bei der HPLC an einer Diol-SBule durch Elution rnit n-Hexan/tert-Butylmethylether (96 + 4, vlv) vollsthndig voneinander getrennt. Sogar fur die stellungsisomeren /3und y-Tocopherole und -Tocotrienole gelang die 'Tkennung bis zur Grundlinie. Die Arbeitsweise wurde mit Erfolg an mehreren pflanzlichen &en erprobt, die direkt ohne Aufarbeitung injiziert wurden. Fur Getreide wurde eine vereinfachte Extraktionsmethode entwickelt und der Gehalt an T, T3 und P-8 von 9 Getreidearten bestimmt. Das Trennsystem war Uber sechs Monate hinweg stabil.1. E i n l e i t u n g Die a-, p-, y-und 8-Tocopherole und -Tocotrienole unterscheiden sich erheblich in ihren Wirkungen als Vitamine und Antioxidantien. l h r Verteilungsmuster gibt Hinweise zur Qualitat und Lagerfghigkeit von Lebensmitteln, aber auch (neben der Triglycerid-, Fettsaureund Sterinverteilung) zur Identifizierung einzelner Speiseole und zum Nachweis von Verfalschungen'.Die Gehalte an Tocopherolen (T) und Tocotrienolen (T3) in Fetten und Olen konnen durch HPLC mit dem Fluoreszenz-oder auch dem UV-Detektor bestimmt werden. An unpolaren Sgiulenfullungen wie RP-Material (C, und CIS) werden allerdings die Isomeren 8und y-T sowie pund y-T3 uberhaupt nicht voneinander getrennt.AuBerdem miissen T und T3 vor der Bestimmung in Fetten und Olen angereichert werden, 2.B. durch Verseifung der Triglyceride oder eine diinnschicht-bzw. saulenchromatographische Vorreinigung. Dabei sind immer Verluste und oxidative Veranderungen zu befurchten. Das Ausfrieren der Triglyceride' ist fur Routinearbeiten zu umsthdlich. Bei der HPLC an polaren SHulenfOllungen storen dagegen Triglyceride auch dann nicht, wenn sie in groBem UberschuB vorliegen, denn sie werden sofort nach der Totzeit eluiert. Fette und Ole kiinnen deshalb direkt zur HPLC eingespritzt werden.An Kieselgel'" wurden mit Elutionsgemischen wie n-Hexanltert-Butylmethylether (96 + 4), n-Hexanmioxan (96 + 4) oder n-HexanlEssigsaureethylester (96.5 + 3.5) die vier T und vier T3 getrennt, aber Plastochroma-1101-8 (P-8) wurde von p-T3 oder y-T iiberlagert3. BeiElution rnit IsooctaxdIsopropanol (99.5 + 0.5) stiirte P-8 zwar nicht die Bestimmung der T oder T3, aber p-T3 und y-T wurden nicht getrennt3. An Kieselgel mit gebundenen Cyanogruppen wurde mit n-Hexan und n-HexadDioxan (98+2) keine Auflosung der Isomerenpaare erreicht', an Kieselgel rnit gebundenen Aminogruppen wurde lediglich die Trennung der vier T und a-, y-und 8-T3 rnit n-Hexan/Isopropanol (98+2) beschriebed. Auch Kieselgel mit gebundenen Nitrogruppen und n-HexadDioxan (96 + 4 und 94 + 6)

Effect of pretreatment on the proximate composition, physicochemical characteristics and stability of <em>Moringa peregrina</em> oil

“…The samples in the measurement of 20 μL were injected by a Merck 655-A40 autosampler (Merck-Hitachi, Darmstadt, Germany) onto a diol phase HPLC section 25 cm × 4.6 mm ID (Merck, Darmstadt, Germany) at a flow rate of 1.3 mL/min. The portable phase was 99 mL n-heptane + 1 mL tert-butyl methyl ether (Balz et al 1992).…”

Physico-chemical properties, fatty acid and tocopherol composition of oils from some Sudanese oil bearing sources

“…The HPLC analysis was conducted using a Merck-Hitachi low-pressure gradient system, fitted with an L-6000 pump, a Merck-Hitachi F-1000 Fluorescence Spectrophotometer (detector wavelengths for excitation 295 nm, for emission 330 nm) and a D-2500 integration system; 20 µL of the samples were injected by a Merck 655-A40 Autosampler onto a Diol phase HPLC column 25 cm x 4.6 mm ID (Merck, Darmstadt, Germany) using a flow rate of 1.3 mL/min. The mobile phase used was n-heptane/tert, butyl methyl ether (99+1, v/v) (Balz et al, 1992).…”

A study of the fatty acid and tocochromanol patterns of some Fabaceae (Leguminosae) plants from Turkey I

“…Tocochromanols were determined by highperformance liquid chromatography (HPLC) according to the procedure of Balz et al (1992). An aliquot of a solution of 50 mg oil in 1 ml heptane was injected into an HPLC system via a Rheodyne valve with a sample loop volume of 20 µl.…”

“…Calibration was done by external standards with α-, β-, γ-and δ-tocopherol (Calbiochem, Bad Soden, Germany). Tocotrienols are calculated with the same response factors as the corresponding tocopherols and plastochromanol-8 was calculated with the same response factor as gamma-tocopherol (Balz et al, 1992).…”