Transzformációs és további molekuláris módszerek alkalmazása az Ampelomyces hiperparazita gombák biológiájának tanulmányozására

Abstract

A lisztharmat-Ampelomyces interakció általános bemutatása Az Ampelomyces nemzetség gombáinak életciklusa és mikoparazitizmusuk mechanizmusa Az Ampelomyces-fajok taxonómiai bizonytalanságai és egyes Phoma-szerű mikoparaziták az Ampelomyces nemzetségbe való téves besorolása Az Ampelomyces spp. gazdaspecificitásának kérdései Az Ampelomyces spp. genetikai változatossága Az Ampelomyces-törzsek felhasználása a lisztharmat-fertőzések elleni biológiai védekezésben Mikoparazita gombák transzformálása fluoreszcens fehérjék génjeivel Funkcionális genetikai vizsgálatok célzott génkiütéssel mikoparazita gombákban Ampelomyces spp. egy természetes ökoszisztémában Diagnosztikai határérték meghatározása Ampelomyces spp. természetes mintákból való qPCR-rel való kimutatásához CÉLKITŰZÉSEK ANYAG ÉS MÓDSZERAmpelomyces-törzsek molekuláris filogenetikai vizsgálata Ampelomyces-törzsek transzformációja ATMT módszerrel és a transz-formánsok jellemzése Funkcionális vizsgálatok GFP-expresszáló Ampelomyces-törzsekkel Célzott génkiütés megvalósítása az RS1-a Ampelomyces-törzsben Az Ampelomyces-DNS jelenlétének kimutatására alkalmas qPCR módszer diagnosztikai határértékének meghatározása EREDMÉNYEKAz Ampelomyces-törzsek filogenetikai viszonyai négy lókusz szekvenciái alapján GFP-transzformáció és a transzformánsok jellemzése GFP-expresszáló Ampelomyces-törzsekkel végzett funkcionális vizsgálatok eredményei Célzott génkiütés megvalósítása az RS1-a törzsben Az Ampelomyces-DNS kimutatására alkalmas qPCR módszer diagnosztikai határértéke EREDMÉNYEK ÉRTÉKELÉSEAz Ampelomyces-törzsek nemzetségen belüli filogenetikai viszonyai négy lókusz alapján Az egyes Ampelomyces genotípusok gazdagombákkal való asszociációja Az Ampelomyces-törzsek transzformálhatók ATMT-vel A GFP-expresszió megkönnyíti az Ampelomyces-törzsek vizualizációját Az élesztő rekombinációs klónozás felhasználása plazmid-konstrukciók összeállítására Célzott génkiütés megvalósítása homológ rekombinációval egy Ampelomyces-törzsben Ampelomyces spp. terepi mintákból való kimutatására alkalmas qPCR diagnosztikai határértéke