Transplante autólogo de limbo conjuntival e de limbo córneo-conjuntival no tratamento das queimaduras químicas oculares em coelhos

Abstract

Objetivo: Analisar e comparar a recuperação da córnea após queimadura química ocular, em olhos de coelhos tratados com transplante autólogo de limbo conjuntival e limbo córneo-conjuntival. Métodos: Um total de 35 coelhos foi submetido a uma queimadura química unilateral da córnea e limbo, com solução de hidróxido de sódio (NaOH) 1 mol -1 . Após 30 dias da queimadura, foram constituídos 3 grupos. Os coelhos do Grupo 1(12) não foram operados e foram utilizados como controle. Os coelhos do Grupo 2 (12) foram submetidos a um transplante autólogo, utilizando limbo conjuntival do olho contralateral. Os coelhos do Grupo 3 (11) foram submetidos a um transplante autólogo, utilizando limbo córneo-conjuntival do olho contralateral. Foram estudados os seguintes itens: indução e regressão da neovascularização corneana, tempo de reepitelização corneana, alteração da transparência corneana e estudo do fenótipo corneano, empregando-se métodos de rotina hematoxilina-eosina (HE), método do ácido periódico -Schiff (PAS) e reação da peroxidase-antiperoxidase (PAP), utilizando anticorpos monoclonais. Resultados: Não houve diferenças estatisticamente significantes, nas variáveis estudadas, quando comparados os dois grupos operados. Houve diferenças estatisticamente significantes, em todas variáveis estudadas, quando comparados os grupos operados com o grupo controle. Notou-se diminuição gradativa do número de células caliciformes, reconhecidas pelo PAS e aumento gradativo do número de células epiteliais corneanas, reconhecidas pelo anticorpo monoclonal AE5, configurando-se, aos 90 dias de pós-operatório, um fenótipo predominantemente epitelial corneano na superfície corneana, independentemente da técnica cirúrgica utilizada. O grupo controle mostrou extensa necrose do epitélio corneano em todos os casos. Conclusões: Os transplantes autólogos de limbo conjuntival e de limbo córneo-conjuntival produziram os mesmos resultados clínicos e fenotípicos epiteliais em um modelo experimental de queimadura química em olhos de coelhos, configurando-se, aos 90 dias de pós-operatório, um fenótipo predominantemente epitelial corneano. O grupo controle mostrou defeitos epiteliais persistentes, aumento da neovascularização corneana, diminuição da transparência e fenótipo da superfície corneana tipicamente conjuntival. Comparison between conjunctival limbus and keratoconjunctival limbus autografts in the treatment of ocular chemical burns in rabbits

Cytological features of live limbal tissue donor eyes for autograft or allograft limbal stem cell transplantation

“…Limbal tissue has been generally dissected respecting the epithelial depth and the dissection can include tissue from the peripheral cornea and adjacent conjunctiva (8) . Some authors had used only perilimbic conjunctival graft for their ocular surface reconstruction surgery in order to preserve donor limbus and described good results at their period of follow-up (11) . Besides, recent reports of a possible stem cell rich area adjacent to the cornea can influence the selection of the donor site for limbal grafts in the future (14,15) .…”

“…In the last case, there is the possibility to find a human leukocyte antigen (HLA) matched donor and avoid the use of systemic immunosuppression (9) . Two experimental studies have demonstrated that extensive removal of basal limbal epithelium induced corneal vascularization and conjunctivalization in rabbits (10,11) . Nevertheless, there is a general impression by corneal surgeons that limbal donation is a safe procedure with few side effects on the donor eye.…”

Modelo de angiogênese inflamatória em córnea de coelho induzida pela cauterização alcalina pontual

“…A cauterização da córnea com NaOH tem sido usada, mormente, para induzir neovascularização inflamatória com a finalidade de reproduzir desordens oculares, como queimaduras alcalinas e síndrome de Stevens-Johnson, nas quais ocorre a perda das células germinativas localizadas no epitélio limbarprecursoras das células do epitélio corneano e, portanto, responsáveis pela sua regeneração -e que podem evoluir com o fenômeno de "conjuntivalização" do epitélio corneano 18,20 . O animal utilizado geralmente é o camundongo e a técnica consiste na instilação de cerca de 2 ìl de NaOH 0,15 mM na superfície corneana, seguida da remoção do epitélio da córnea e da região limbar, onde se encontram as células germinativas 17,18 .…”

“…O objetivo era dosar, posteriormente, VEGF em lisados de córnea e usar tais dosagens como controle positivo, para comparações com aquelas obtidas nos demais grupos do estudo 19 . Em outro modelo, dessa vez para queimaduras químicas oculares em coelhos, uma peça de papel filtro, em forma de meia-lua, com diâmetro de 7,5 mm, foi utilizada para provocar uma lesão alcalina em toda a superfície corneana, bem como no limbo 20 .…”

Modelos de neovascularização corneana em coelhos: análise morfológica

“…Não somente os modelos mecânicos associados ao n-Heptanol, mas também modelos de queimadura química com NaOH 1 mol -1 tem sido utilizados (11,17) para produção de córneas vascularizadas, revelando-se reprodutíveis e provocando lesões à superfície ocular de modo homogêneo. Entretanto, há de se questionar em tais modelos, o potencial maior de dano aos tecidos mais profundos, estroma corneano profundo e, talvez, câmara anterior, ocasionada pela penetração do agente pelos tecidos oculares.…”