TRANSMISI, EKSPRESI, DAN DISTRIBUSI GEN HORMON PERTUMBUHAN IKAN PATIN SIAM PADA IKAN LELE AFRIKA (Clarias gariepinus) TRANSGENIK F-2

Abstract

Salah satu keberhasilan pembentukan ikan transgenik ditandai dengan kemampuan dari individu transgenik tersebut untuk mewariskan transgen pada keturunannya. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi transmisi dan ekspresi transgen (PhGh) dari generasi F-1 ke F-2 serta mengetahui distribusi transgen pada berbagai organ. Deteksi transgen dilakukan pada larva, benih, dan berbagai organ ikan lele generasi F-2 (pituitari, otak, timus, jantung, limfa, hati, ginjal, lambung, usus, gonad, otot, kulit insang, dan sirip ekor) menggunakan metode PCR. Ekspresi transgen pada larva dan organ ikan lele transgenik F-2 dideteksi menggunakan metode reverse transcriptasepolymerase chain reaction (RT-PCR). Level ekspresi pada organ dianalisis menggunakan metode qPCR, gen β-aktin digunakan sebagai kontrol internal. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa sebanyak 65 ekor induk betina transgenik F-1 positif membawa transgen di sirip ekor, hanya 18 ekor (27,69%) induk betina yang positif membawa transgen di telur. Sedangkan pada induk jantan hanya 19 ekor (46,34%) yang positif membawa transgen di sperma, dari 41 ekor yang positif membawa transgen di sirip. Transgen dapat terdeteksi pada larva dan sirip ekor ikan lele transgenik F-2 dengan persentase transmisinya adalah 8,11%-50% dengan rata-rata transmisi transgen sebesar 18,85%. Deteksi dan distribusi transgen ditemukan pada larva dan organ pituitari, hati, ginjal, gonad, otot, otak, timus, jantung, limfa, lambung, usus, insang, dan sirip ekor, tetapi transgen tidak ditemukan pada kulit ikan. Level ekspresi transgen tertinggi ditemukan pada hati sebesar 7,3±2,2 pg/μg cDNA – 9,2±2,7 pg/μg cDNA; sedangkan ekspresi terendah ditemukan pada ginjal berkisar 0,19±0,01 pg/μg cDNA – 0,2±0,03 pg/μg cDNA; dan insang sebesar 0,2±0,01 pg/μg cDNA.

TRANSMISI GEN PhGH DAN PERFORMA PERTUMBUHAN IKAN LELE AFRIKA (Clarias gariepinus) TRANSGENIK GENERASI KETIGA

“…Hasil penelitian menunjukkan bahwa transmisi transgen pada ikan lele dari F1 ke F2 dari 6 pasang induk berkisar 8,11%-50% dengan rata-rata transmisi transgen adalah 18,85%. Transmisi transgen pada ikan lele dari F1 ke F2 hampir sama jika dibandingkan dengan transmisi transgen pada ikan lele F0 ke F1 (Marnis et al, 2014a). Pertumbuhan ikan lele transgenik F2 dua kali lebih besar dibandingkan ikan lele kontrol (non-transgenik) (Marnis et al, 2015).…”

“…Transmisi transgen dari induk F 2 ke F 3 (9,4%) ini lebih rendah jika dibandingkan transmisi transgen dari F 1 ke F 2 sebesar 18,85% (Marnis et al, 2014a) dan transmisi founder F 0 ke F 1 sebesar 38,22% (Marnis et al, 2014b). Transmisi transgen dari generasi ke generasi semakin menurun.…”

“…Hasil penelitian ini lebih rendah dari F 2 yang memiliki pertumbuhan 75% dibandingkan kontrol (Marnis et al, 2014a) dan performa pertumbuhan F 1 sebesar 53% lebih tinggi dibanding kontrol (Marnis et al, 2013). Performa pertumbuhan ikan lele transgenik tiap generasi cenderung menurun dibandingkan dengan generasi sebelumnya.…”