Three-dimensional co-culture of rat hepatocyte spheroids and NIH/3T3 fibroblasts enhances hepatocyte functional maintenance

Lu, Hongfang; Chua, Koon Jiew; Zhang, Peng‐Chi; Lim, Wei-Seng; Ramakrishna, Seeram; Leong, Kam W.; Mao, Hai‐Quan

doi:10.1016/j.actbio.2005.04.003

Cited by 107 publications

(71 citation statements)

References 44 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Cell associated as well as soluble factors (Lu et al 2005;Zinchenko et al 2006a, b) were shown to keep the hepatocyte morphologically and functionally differentiated. The hepatocyte is in intricate contact with spiny extensions of the hepatic stellate cell, its nearest cell neighbour.…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Maintaining hepatocyte differentiation in vitro through co-culture with hepatic stellate cells

Krause

Saghatolislam

Koenig

et al. 2009

In Vitro Cell.Dev.Biol.-Animal

View full text Add to dashboard Cite

Primary hepatocytes lose their differentiated functions rapidly when in culture. Our aim was to maintain the differentiated status of hepatocytes in vitro by means of vital hepatic stellate cells (HSCs), their soluble and particulate factors and lipid extracts. Hepatocytes were placed into collagen-coated culture dishes in the presence of HSCs at different ages of pre-culture, with or without direct cell to cell contacts, at different cell ratios and in monoculture with cellular HSC components in place of vital cells. Changes in morphology and enhancement of phosphoenolpyruvate carboxykinase (PCK) activity by glucagon were used to determine the differentiated status of hepatocytes in 2d-short-term culture. HSCs proved able to maintain the differentiated function of hepatocytes in coculture either by direct cell contacts or via factors derived from HSC-conditioned medium. In comparison, however, without cellular contact to hepatocytes five to ten times as many HSCs were necessary to increase the PCK activity to the same degree as in the presence of intercellular contacts. Whereas stimulation in the presence of HSC/hepatocyte contacts was independent of HSC culture age only quiescent, resting HSCs (precultured for 1-2 d) were able to stimulate hepatocytes significantly via soluble factors. Culturing of hepatocytes with a lipid extract or a particulate fraction from HSCs clearly displayed a very strong beneficial effect on enzyme activity and morphology. HSCs maintain hepatocyte function and structure through preferentially cell-bound signalling and transfer of lipids.

show abstract

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Maintaining hepatocyte differentiation in vitro through co-culture with hepatic stellate cells

Krause

Saghatolislam

Koenig

et al. 2009

In Vitro Cell.Dev.Biol.-Animal

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…Используя поверхность, включающую галактозу, Lu H.F. с соавторами [30] предложили метод ко-культивирования первичных сфероидов крысиных гепатоцитов с мышиными фибробластами NIH/3T3. Сфероиды были приготовлены путем культивирования гепатоцитов в течение 3 дней на галактозилированной мембране из поливинилидендифторида [30].…”

Section: долгихunclassified

“…На 13-й день секреция альбумина в кокультуре была СОЗДАНИЕ ИМПЛАНТИРУЕМОЙ БИОИСКУССТВЕННОЙ ПЕЧЕНИ 432 в 5,1 (в бессывороточной среде) и в 17,8 (в сывороточной среде) раз выше по сравнению с монокультурой. Аналогично этому, энзиматическая активность цитохрома Р450, индуцированная 3-метил-холантреном, была в 5,5 и в 3,1 раз выше в ко-культуре по сравнению с монокультурой [30].Полимеры, соединяющие преимущества синтетических и природных материалов, могут быть созданы привязкой пептидов, происходящих из экстрацеллюлярного матрикса (ECM), к e-аминогруппам лизина (сополимер полимолочной кислоты и лизина) [57].Недавно было показано, что интегрин играет существенную роль в выживании гепатоцитов мыши, хотя гепатоциты способны выживать и на матриксах, не узнающих интегрин, таких как поли-L-лизин (PLL) и поли-(N-п-винилбензил-4-О-бета-D-галактопиранозил-D-глюконамид) (PVLA-) в течение нескольких дней без сыворотки [58]. В другой работе эти авторы показали, что ламинин играет важную роль в поддержании функций гепатоцитов.…”

unclassified

“…Сфероиды были приготовлены путем культивирования гепатоцитов в течение 3 дней на галактозилированной мембране из поливинилидендифторида [30]. Была также показана улучшенная функция гепатоцитов, кокультивированных с NIH/3T3 в сфероидах на подложке из альгинат галактозилированного хитозана [31].…”

unclassified

See 2 more Smart Citations

The modern creation technologies of implanted bioartificial liver

Dolgikh

2010

BIOMED KHIM

View full text Add to dashboard Cite

ОБЗОРЫУДК 616.1.\9-055.5 ©Долгих СОВРЕМЕННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ СОЗДАНИЯ ИМПЛАНТИРУЕМОЙ БИОИСКУССТВЕННОЙ ПЕЧЕНИ. М.С. ДолгихФГУ Научно-исследовательский институт трансплантологии и искусственных органов Федерального агентства высокотехнологичной медицинской помощи, Москва, Щукинская 1, тел.: 8-499-190-45-31 (42-67); эл. почта: Biolab@online.ruТрансплантация печени остается наиболее эффективным методом лечения острых болезней печени. Перспективным средством терапии печеночной недостаточности может быть трансплантация гепатоцитов. Представленный обзор анализирует экспериментальные подходы и перспективы использования зрелых гепатоцитов для создания имплантируемого модуля биоискусственной печени с целью лечения печеночной недостаточности.Ключевые слова: клеточная терапия, гепатоциты, трансплантация, печеночная недостаточность.ВВЕДЕНИЕ. Совершенствование методов лечения острой и хронической печеночной недостаточности (ПН) является актуальной задачей современной медицины. По данным ВОЗ, смертность от хронической ПН занимает 5 место среди других патологий. Смертность от острой недостаточности печени достигает 70-80% [1,2]. Ортотопическая и вспомогательная (когда сохраняется собственная печень) трансплантация печени остается наиболее эффективным методом помощи пациенту при необратимом повреждения этого органа [1,2].Возрастающая во всем мире нехватка донорского материала, а также значительные экономические затраты, связанные с пересадкой печени, необходимость иммуносупрессии и большой риск для реципиентов приводят к необходимости развивать клеточные технологии и методы тканевой инженерии.Для лечения заболеваний печени разрабатываются клеточные технологии: экстракорпоральная искусственная печень, клеточная трансплантация и тканевая инженерия. Перспективным средством терапии печеночной недостаточности может быть трансплантация гепатоцитов, особенно в случае метаболических болезней печени, для коррекции которых требуется меньшее количество трансплантируемых клеток. Генная терапия печени позволит селективно лечить нарушения, связанные с дефицитом определенных белков (например, альфа-1-антитрипсина), тирозинемии и других. В этом случае предполагаемый подход будет заключаться в комбинации трансфера гена ex vivo и аутотрансплантации трансфицированных гепатоцитов. Во всех случаях необходимым требованием является адекватная поддержка выживания и пролиферации гепатоцитов и обеспечение стабильности их специфических функций.1. ПРОБЛЕМЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ГЕПАТОЦИТОВ. Для эффективной трансплантации необходимо выделить гепатоциты из печени и накопить их путем культивирования в достаточном количестве для пересадки. При выделении гепатоцитов большое количество клеток гибнет, а у выживших -изменяются адгезивные свойства клеточной поверхности, так что их прикрепление на культуральном пластике с целью дальнейшего 425 культивирования и накопления происходит с большими потерями. При длительном культивировании гепатоциты теряют ряд своих функциональных свойств. Хотя некоторые функции гепатоцитов, такие как секреция альбумина, более стабильны, другие, ка...

show abstract

Generation and Application of3DCulture Systems in Human Drug Discovery and Medicine

Rashidi

Hay

2016

Stem Cells in Toxicology and Medicine

View full text Add to dashboard Cite

Three-dimensional co-culture of rat hepatocyte spheroids and NIH/3T3 fibroblasts enhances hepatocyte functional maintenance

Cited by 107 publications

References 44 publications

Maintaining hepatocyte differentiation in vitro through co-culture with hepatic stellate cells

Maintaining hepatocyte differentiation in vitro through co-culture with hepatic stellate cells

The modern creation technologies of implanted bioartificial liver

Generation and Application of3DCulture Systems in Human Drug Discovery and Medicine

Contact Info

Product

Resources

About