Larvae of the black fly morphospecies Simulium vittatum from Colorado, Montana, Nebraska, and New Hampshire were cytologically identified as either the IS-7 or the IIIL-1 cytospecies. DNA was PCR amplified from cytotyped larvae using eight 10-mer primers, labeled with 33 P, and run on polyacrylamide gels. The entire data set of 96 amplicons produced incomplete separation of the two cytospecies when subjected to neighbor-joining and maximum parsimony analyses. However, when analyzed within geographical regions, separate species status was supported. Bootstrap support for distinctness of the two cytospecies was best in Colorado where they were collected in true sympatry. The IS-7 cytospecies was more polymorphic in the western states, where it differed most from IIIL-1, which was most variable in the eastern states. The frequencies of the 17 most common amplicons in the two cytospecies were inversely correlated. A model of speciation derived from the molecular evidence suggests that IS-7 evolved in the west and spread eastward, whereas IIIL-1 later originated in the east and spread westward.Keywords: Simulium vittatum, cytospecies, RAPD analysis, molecular markers, population structureE 47 ( 2 0 0 4 ) 2
RésuméDes larves de morpho-espèces de la mouche noire Simulium vittatum provenant du Colorado, du Montana, du Nebraska ou du New Hampshire ont fait l'objet d'un examen cytologique et ont été classifiées comme appartenant aux cyto-espèces IS-7 ou IIIL-1. L'ADN de ces larves typées a été amplifié par PCR à l'aide de huit amorces décanucléotidiques marquées au 33P et les amplicons ont été séparés sur gel de polyacrylamide. Le jeu de données complet, comprenant 96 amplicons, a été analysé par les méthodes « neighbour-joining » et de parcimonie. Ces analyses ont révélé une sépa-ration incomplète des deux cyto-espèces. L'appui par réitération (« bootstrap ») à l'hypothèse de l'existence de deux cyto-espèces distinctes était le plus élevé au sein de la population du Colorado où elles ont été trouvées en sympatrie véritable. La cyto-espèce IS-7 était plus polymorphe dans les états occidentaux, où elle différait le plus du type IIIL-1, laquelle était plus variable dans les états orientaux. Les fréquences des 17 amplicons les plus communs au sein des deux cyto-espèces étaient inversement corrélées. Un modèle de la spéciation, fondé sur les données moléculaires, suggère que le type IS-7 serait apparu dans l'ouest et se serait répandu vers l'est, tandis que le type IIIL-1 serait survenu plus tard dans l'est et se serait déplacé vers l'ouest.