The MobA-Linked Primase Is the Only Replication Protein of R1162 Required for Conjugal Mobilization

Henderson, Dorian; Meyer, Richard J.

doi:10.1128/jb.181.9.2973-2978.1999

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“…1a). The primase is not strictly required for mobilization, but contributes to complementary strand synthesis in both donor and recipient cells (Henderson & Meyer, 1999;Becker & Meyer, 2002;Parker & Meyer, 2002).…”

Section: Mob Q Relaxosomes Mob Q Relaxasesmentioning

confidence: 99%

Conjugative DNA metabolism in Gram-negative bacteria

et al. 2010

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Bacterial conjugation in Gram-negative bacteria is triggered by a signal that connects the relaxosome to the coupling protein (T4CP) and transferosome, a type IV secretion system. The relaxosome, a nucleoprotein complex formed at the origin of transfer (oriT), consists of a relaxase, directed to the nic site by auxiliary DNA-binding proteins. The nic site undergoes cleavage and religation during vegetative growth, but this is converted to a cleavage and unwinding reaction when a competent mating pair has formed. Here, we review the biochemistry of relaxosomes and ponder some of the remaining questions about the nature of the signal that begins the process.

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Section: Mob Q Relaxosomes Mob Q Relaxasesmentioning

confidence: 99%

Conjugative DNA metabolism in Gram-negative bacteria

et al. 2010

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“…4). We assumed that the mutation would not affect conjugative replication, where strand separation is brought about by transfer and does not require the plasmid helicase (Henderson and Meyer, 1999). A plasmid heteroduplex was constructed as before, with the mutation on the strand first transferred, and the normal base on the complementary strand (Fig.…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 99%

“…The plasmid replication proteins required for mobilization were identified by constructing a set of strains containing the self‐transmissible mobilizing vector R751 (Willetts and Crowther, 1981), all the proteins required for plasmid mobilization, and different combinations of the plasmid replication proteins (Henderson and Meyer, 1999). Cells of these strains were then transformed by electroporation with a plasmid that does not encode any replication proteins, but does contain both the origin of replication ( oriV ) and the origin of transfer ( oriT ) of R1162.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

“…By using the electroporation–transfer system, we found that the plasmid‐encoded primase RepB, but neither the helicase RepA nor the DnaA analogue RepC, was required for transfer (Henderson and Meyer, 1999). A reasonable interpretation is that the priming mechanism for vegetative replication is used to initiate synthesis of the complement to the transferred strand.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

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Selection of plasmid molecules for conjugative transfer and replacement strand synthesis in the donor

Parker

Meyer²

2002

Molecular Microbiology

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SummaryPlasmid selection and strand replacement synthesis in donor cells during conjugative transfer was examined by a procedure involving electroporation of test plasmid DNA, containing a base pair mismatch, into donor cells prior to mating. Multiple copies of the plasmid were transferred from a donor cell that allowed vegetative replication of the plasmid. Under conditions non-permissive for vegetative replication, there were further rounds of transfer after a lag period. Strand replacement in the donor did not depend solely on the initiation mechanism for vegetative replication, indicating a conjugation-specific mechanism was also available. The lag period between first and second rounds of transfer argues against the transfer of multiple copies into recipients by the spooling of copies generated on a master molecule by rolling-circle replication.

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“…Las tres proteínas son requeridas para la movilización: MobA corta y liga la hebra transferida (Bhattacharje et al, 1992) a través de una actividad localizada en su extremo N terminal. En su extremo C terminal tiene actividad primasa (similar a la actividad RepB') que está relacionada con el amplio rango de huéspedes de los plásmidos IncQ (Henderson y Meyer, 1999). La proteína MobC por su parte interviene en la localización y separación de las hebras en el oriT (Zhang y Meyer, 1997) y la proteína MobB estabiliza el complejo de las proteínas Mob en el oriT y tiene también funciones adicionales en la transferencia que han sido poco caracterizadas (Perwez y Meyer, 1999).…”

Section: Funciones De Transferencia En Los Plásmidos Tiunclassified

Identificación y caracterización molecular de plásmidos transmisibles por conjugación de aislamientos locales en Sinorhizobium meliloti

Pistorio¹

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El uso de cepas inoculantes -tanto salvajes como recombinantes- requiere controlar la capacidad simbiótica de los rizobios así como los riesgos derivados de su liberación en suelos de cultivo (estudios de la evaluación de riesgos, risk assesment). Dicho control resulta más importante si se considera el creciente desarrollo y la aparición en el mercado de nuevas cepas recombinantes. En particular, prevenir la diseminación de información genética desde rizobios introducidos al suelo en forma masiva es importante para preservar la estructura genética de las poblaciones salvajes. Eventos de transferencia génica de alta frecuencia desde las cepas introducidas puede conducir a la aparición de nuevos genotipos bacterianos cuya dinámica poblacional y propiedades simbióticas a mediano y largo plazo son difíciles de predecir. En general, es deseable que las cepas utilizadas como inoculantes por sus propiedades simbióticas, se autolimiten a corto y mediano plazo para ayudar a la conservación de la biodiversidad natural. Sobre la misma base de conservación de genotipos naturales es que deben tratar de minimizarse los eventos de transfereneia génica desde las bacterias que, útiles desde el punto de vista agropecuario, sean introducidas a campos de cultivo en forma masiva. Será por tanto importante el desarrollo de estudios de base que permitan a mediano plazo el desarrollo de herramientas genético-moleculares que permitan a mediano plazo mejorar el control de riesgo asociado a la transferencia de germoplasma desde rizobios inoculados. Objetivo General. - Caracterización funcional y molecular de sistemas genéticos involucrados en la transfereneia de plásmidos por conjugación en la bacteria fijadora de nitrógeno y simbionte de alfalfa, Sinorhizobium meliloti. Objetivos específicos, - Búsqueda y aislamiento de plásmidos crípticos movilizables en cepas locales de S. meliloti. - Evaluación de la proporción de cepas de S. meliloti que son portadoras de plásmidos movilizables y/o autotransmisibles. - Estudios de complementación funcional cruzada de funciones helper entre diferentes plásmidos crípticos (Fenómenos de re-movilización y retrotransferencia). - Identificación y caracterización molecular de genes de movilización en plásmidos indígenas

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The MobA-Linked Primase Is the Only Replication Protein of R1162 Required for Conjugal Mobilization

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Conjugative DNA metabolism in Gram-negative bacteria

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