The irradiation parameters investigation of photodynamic therapy on yeast cells

Prates, Renato Araújo; Silva, Eriques Gonçalves; Yamada, Aécio M.; Suzuki, Luis C.; Paula, Claudete Rodrigues; Ribeiro, Martha S.

doi:10.1117/12.763059

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“…Another group, 54 using a porphyrin-derivative photosensitizer, reported a light dose-dependent 46 log 10 reduction in viable count of P. gingivalis. Prates et al 55 were able to achieve 2-3 log 10 reductions from control in planktonic cultures of A. actinomycetemcomitans with malachite green and energy doses of 6-9 J cm À2 . Another group 56 evaluated the effectiveness of aPDT in vitro on biofilms comprised primarily of the oral bacteria Actinomyces israelii, F. nucleatum, P. gingivalis and Prevotella intermedia.…”

Section: Apdt and Periodontal Disease -In Vitro Studiesmentioning

confidence: 98%

Chapter 13. Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) for Oral Infections

Pratten¹,

Benhamou²,

Street³

2011

Photodynamic Inactivation of Microbial Pathogens

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Section: Apdt and Periodontal Disease -In Vitro Studiesmentioning

confidence: 98%

Chapter 13. Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) for Oral Infections

Pratten¹,

Benhamou²,

Street³

2011

Photodynamic Inactivation of Microbial Pathogens

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“…Aliquots of 1 mL of yeast suspension with PS were putted in a 24-well plate and subsequently irradiated with light, resulting fluence-rates of 30mW/cm² and 40mW/cm² (table 1). Aliquots were collected before and during the irradiation, and serially diluted in PBS to generate dilutions of 10 -1 to 10 -5 times the original concentration [30]. Ten micro liters aliquots of each dilution were streaked onto a sabouraud plaque in triplicate and incubated for 48h at 30°C to allow colony formation [31].…”

Section: Photodynamic Therapy Studies and Colony-forming Units (Cfu) mentioning

confidence: 99%

Cryptococcus neoformans capsule protects cell from oxygen reactive species generated by antimicrobial photodynamic inactivation

et al. 2011

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Antimicrobial photodynamic inactivation (APDI) is based on the utilization of substances that can photosensitize biological tissues and are capable of being activated in the presence of light. Cryptococcus neoformans is an yeast surrounded by a capsule composed primarily of glucoronoxylomannan that plays an important role in its virulence. This yeast causes infection on skin, lungs and brain that can be associated with neurological sequelae and neurosurgical interventions, and its conventional treatment requires prolonged antifungal therapy, which presents important adverse effects. The aim of this study was to evaluate the protective effect of Cryptococcus neoformans capsule against reactive oxygen species generated by APDI. Cryptococcus neoformans KN99α, which is a strain able to produce capsule, and CAP59 that does not present capsule production were submitted to APDI using methylene blue (MB), rose bengal (RB), and pL-ce6 as photosensitizers (PS). Then microbial inactivation was evaluated by counting colony form units following APDI and confocal laser scanning microscopy (CLSM) illustrated localization as well as the preferential accumulation of PS into the fungal cells. C. neoformans KN99α was more resistant to APDI than CAP59 for all PSs tested. CLSM showed incorporation of MB and RB into the cytoplasm and a preferential uptake in mitochondria. A nuclear accumulation of MB was also observed. Contrarily, pL-ce6 appears accumulated in cell wall and cell membrane and minimal florescence was observed inside the fungal cells. In conclusion, the ability of C. neoformans to form capsule enhances survival following APDI.

show abstract

“…Alguns estudos descrevem a difícil penetração e difusão de fármacos no biofilme, com redução de concentração de até 80%, relatando ser este um dos fatores de resistência 29,30 . A busca de novas modalidades terapêuticas é imperativa, e dentre estas novas propostas encontra-se a terapia fotodinâmica antimicrobiana para redução de C. albicans 15…”

Section: Páginaunclassified

Desenvolvimento de biofilme formado por Candida albicans in vitro para estudo do efeito fotodinâmico

Suzuki¹

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AGRADECIMENTOSAos meus pais, por todo exemplo ministrado durante minha existência, exaltando importância na carreira acadêmica, certamente se não fosse por eles nem pensaria na possibilidade de chegar até aqui. Aos meus irmãos, Cássia e Ricardo pelo exemplo direto imposto a mim, sem o sucesso deles talvez eu teria desistido de muitas coisas. Muito obrigado! À minha orientadora Dra. Martha Simões Ribeiro, sempre confiando em mim e dando essa excelente oportunidade. Sem ela eu nunca teria me transformado em um pesquisador. Ao meu filho Luis Eduardo Martins Suzuki, que me deu forças, orgulho e me impulsionou para que esse trabalho fosse executado. Esse trabalho é para você! Ao IPEN, instituto nobre que enaltece grandiosamente meu trabalho. Ao Renato Araújo Prates, mais do que um amigo e padrinho de casamento, conselheiro, colega de trabalho e prestativo colaborador desse trabalho. À Ilka Tiemi Kato, além de madrinha de casamento uma grande amiga e importantíssima colaboradora do meu mestrado. Ao Dr. Eriques, por fornecer a Candida albicans ATCC 90028 e sempre prestativo: um grande amigo e colaborador deste trabalho. Ao Dr. Aécio Massayoshi Yamada Jr. por me introduzir no IPEN, me ensinando e ajudando no meu crescimento nesse mestrado. Um incentivador dentro do IPEN. À Profa. Lília Coronato Courrol, pela ajuda e fornecimento de conhecimento, materiais e conselhos no seminário de área. Ao Prof. Anderson Zanardi de Freitas e seus alunos Marcus e Marcelo, pelas leituras no OCT e ajuda na interpretação dos resultados. À Marilu, Raul, Lourdes, Elisa, Nelson, Tatá, Bosco e Yolanda (in memorian), por criarem meu filho durante a realização deste trabalho. Aos meus colegas do IPEN, Juca e Cacau, por tornarem minha jornada de pesquisa dentro do CLA muito mais agradável do que eu imaginaria. Aos sempre muito prestativos agentes Luis, Rubens e Amâncio: amizade e companheirismo durante minhas solitárias visitas nos fins de semanas de experimentos. Aos Profs. Niklaus Ursus Wetter, Nilson Dias Vieira Junior e Denise Maria Zezell, por me aconselharem diversas vezes e me acolherem muito calorosamente dentro do CLA. Ao Prof. Gessé Eduardo Calvo Nogueira, chefe da divisão de aplicação de lasers. Uma pessoa muito estimada por todos no CLA. À Profª Sonia Licia Baldochi, gerente do CLA. Doralice, Elsa e Sueli, minhas amigas nesse instituto. À dona Marta, por me acolher no CLA e sempre me fornecer um café quando eu mais necessitava durante meus experimentos."A educação tem raízes amargas, mas os seus frutos são doces." Aristóteles "Se alguém procura a saúde, pergunta-lhe primeiro se está disposto a evitar no futuro as causas da doença; em caso contrário, abstém-te de o ajudar." Sócrates

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The irradiation parameters investigation of photodynamic therapy on yeast cells

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Cryptococcus neoformans capsule protects cell from oxygen reactive species generated by antimicrobial photodynamic inactivation

Desenvolvimento de biofilme formado por Candida albicans in vitro para estudo do efeito fotodinâmico

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