The development of RAD51C, Cystatin A, p53 and Nrf2 luciferase-reporter assays in metabolically competent HepG2 cells for the assessment of mechanism-based genotoxicity and of oxidative stress in the early research phase of drug development

Review of current and “omics” methods for assessing the toxicity (genotoxicity, teratogenicity and nephrotoxicity) of herbal medicines and mushrooms

“…by measurement of alkaline phosphatase (Nieminen et al, 2002). The Vitotox test has a high predictivity for bacterial mutagenicity and the number of false-positive scores due to cytotoxicity is relatively low (Westerink et al, 2009(Westerink et al, , 2010.…”

“…Upon DNA damage and ␤-Gal expression, the substrate d-luciferino-␤-galactopyranoside liberates luciferin that is luminometrically measured (Westerink et al, 2009). The RadarScreen assay has a high predictivity for clastogenicity; the number of false-positive scores due to cytotoxicity is relatively low (Westerink et al, 2009(Westerink et al, , 2010.…”

Mutagenicity, genotoxicity and gene expression of Rad51C, Xiap, P53 and Nrf2 induced by antimalarial extracts of plants collected from the middle Vaupés region, Colombia

“…Antes de la extracción de ARN, las células HepG2 se trataron durante 24 horas con los cuatro extractos etanólicos, y como controles positivos se emplearon las sustancias genotóxicas óxido de 4-notroquinolina (4NQO), benzo(a)pireno (B(a)P), y etopósido, y el inductor de estrés oxidativo terbutil hidroperóxido (t-BuOOH) (9,(19)(20)(21)(22)(23)(24).…”

“…En concordancia con estos resultados, Westerink, et al, encontraron una inducción de luminiscencia dos veces mayor que en el control, en ensayos de genes reporteros en Rad51C, P53 y el CST3, este último con funciones biológicas similares a las del Xiap, ya que ambos suprimen la apoptosis al inhibir la caspasa 3 (9,38). El gen Xiap también se sobreexpresó como reacción al tratamiento con B(a)P, compuesto perteneciente a la familia de los hidrocarburos aromáticos policíclicos.…”

“…Sin embargo, la obtención de un medicamento para el tratamiento de la malaria a partir de plantas del departamento del Vaupés requiere una serie de estudios que garanticen su eficacia y su seguridad, mediante pruebas farmacológicas y toxicológicas in vitro e in vivo (8,9). En ese contexto, se evaluó el potencial mutagénico en cepas de Salmonella typhymurium (test de Ames), el genotóxico (ensayo cometa) y la expresión de los genes Rad51C, Xiap, P53 y Nrf2 en células HepG2 tratadas con cuatro extractos etánolicos preparados a partir de las plantas reportadas como antipalúdicos por los médicos tradicionales de la región del Vaupés y que presentaron una actividad antiplasmódica promisoria in vitro.…”