The ATPase core of a clathrin uncoating protein.

Chappell, Thomas G.; Konforti, Boyana; Schmid, Sandra L.; Rothman, James E.

doi:10.1016/s0021-9258(19)75848-7

Cited by 248 publications

(33 citation statements)

References 16 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…Recent biochemical evidence suggests that HSP70 and P72 are involved in the translocation of nascent polypeptides across membranes of the endoplasmic reticulum and mitochondria (7,12,28,47). HSP70 and P72 have also been shown to interact with clathrin, the cellular protooncogene p53, and the viral trans-activating proteins of adenovirus (E1A) and SV40 (T antigen) (4,5,13,34,37,38,44). Finally, we have demonstrated that HSP70 displays a number of cell cycle-specific interactions with other proteins (23).…”

mentioning

confidence: 63%

Mutational analysis of the human HSP70 protein: distinct domains for nucleolar localization and adenosine triphosphate binding.

Milarski

Morimoto

1989

The Journal of Cell Biology

169

View full text Add to dashboard Cite

Abstract. The human HSP70 gene was modified in vitro using oligonucleotide-directed mutagenesis to add sequences encoding a peptide from the testis-specific form of human lactate dehydrogenase (LDH) to the carboxy terminus of HSP70. The peptide-tagged HSP70 can be distinguished from the endogenous HSP70 protein using an LDH peptide-specific antiserum in indirect immunofluorescence assays of cells transiently transfected with an expression vector conmining the tagged HSP70 gene regulated by the human HSP70 promoter. A series of deletion mutants within the HSP70 protein coding region were generated. Using double-label indirect immunofluorescence with the LDH peptide-specific antiserum and HSP70-specific mAbs, we compared the intracellular distribution of the deletion mutants to that of endogenous HSP70. We have determined that sequences in the carboxy terminus of HSP70 are necessary for proper nucleolar localization after heat shock. In contrast, sequences in the amino terminus of HSP70 are responsible for the ATP-binding ability of the protein. Mutants that were unable to bind ATE however, still displayed nucleolar association, indicating that ATP binding is apparently not required for interaction with substrate. Additional support that HSP70 appears to be composed of at least two domains follows from the results of trypsin digestions of wild type and mutant HSP70. Protease digestion of the mutant HSP70 proteins identified a region of HSP70 that, when deleted, affected HSP70 conformation.

show abstract

mentioning

confidence: 63%

Mutational analysis of the human HSP70 protein: distinct domains for nucleolar localization and adenosine triphosphate binding.

Milarski

Morimoto

1989

The Journal of Cell Biology

169

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…DNA sequence analysis of the sscl-2 mutant revealed a single nucleotide difference compared to the wild-type sequence (see Materials and Methods), a C:G"~T:A transition at the codon for amino acid 419 of the mature protein. The resulting proline ~ serine (CCA --" TCA) change is in the putative peptide binding domain of hsp70s (Chappell et al, 1987). This proline residue is very highly conserved, present in all of the hsp70s whose DNA sequence has been determined so far (Fig.…”

Section: The Single Mutations In Sscl-2p and Sscl-3p Map To Different Domains Of Hsp70mentioning

confidence: 99%

A dual role for mitochondrial heat shock protein 70 in membrane translocation of preproteins.

Gambill

Voos

Kang

et al. 1993

The Journal of Cell Biology

258

296

View full text Add to dashboard Cite

Abstract. The role of mitochondrial 70-kD heat shock protein (mt-hsp70) in protein translocation across both the outer and inner mitochondrial membranes was studied using two temperature-sensitive yeast mutants. The degree of polypeptide translocation into the matrix of mutant mitochondria was analyzed using a matrix-targeted preprotein that was cleaved twice by the processing peptidase. A short aminoterminal segment of the preprotein (40-60 amino acids) was driven into the matrix by the membrane potential, independent of hsp70 function, allowing a single cleavage of the presequence. Artificial unfolding of the preprotein allowed complete translocation into the matrix in the case where mutant mt-hsp70 had detectable binding activity. However, in the mutant mitochondria in which binding to mt-hsp70 could not be detected the mature part of the preprotein was only translocated to the intermembrane space. We propose that mt-hsp70 fulfills a dual role in membrane translocation of preproteins. (a) Mt-hsp70 facilitates unfolding of the polypeptide chain for translocation across the mitochondrial membranes. (b) Binding of mt-hsp70 to the polypeptide chain is essential for driving the completion of transport of a matrix-targeted preprotein across the inner membrane. This second role is independent of the folding state of the preprotein, thus identifying mt-hsp70 as a genuine component of the inner membrane translocation machinery. Furthermore we determined the sites of the mutations and show that both a functional ATPase domain and ATP are needed for mt-hsp70 to bind to the polypeptide chain and drive its translocation into the matrix.

show abstract

“…Η ανθρώπινη Hsp70 είναι μια πρωτεΐνη 640 αμινοξέων (Sriram et al, 1997). Η ανάλυση της δομής της έδειξε ότι αποτελείται από δύο περιοχές (Εικόνα 1.8), μια υψηλά συντηρημένη Ν-τελική περιοχή με δράση ATPάσης (Chappell et al, 1987;DeLuca-Flaherty et al, 1988;Feige and Polla, 1994) των 44 kDa (Chappell et al, 1987;DeLuca-Flaherty et al, 1988;Günther and Walter, 1994) που προσδένει νουκλεοτίδια (Heck et al, 2011) και φέρει ομολογία με την ακτίνη (Flaherty et al, 1991;Feige and Polla, 1994;Heck et al, 2011) και την εξοκινάση (Flaherty et al, 1990). Η περιοχή αυτή βρέθηκε να είναι ανθεκτική σε πρωτεόλυση (Günther and Walter, 1994), ενώ αποτελείται από δύο λοβούς με μια βαθιά αύλακα ανάμεσά τους, στη βάση της οποίας προσδένεται το ATP (Flaherty et al, 1990).…”

Section: ομοσυνοδές πρωτεΐνες της οικογένειας των Hsp70sunclassified

Η λειτουργία της πρωτεΐνης θερμικού σοκ των 70 kDa (heat shock protein 70: Hsp70) στα θηλαστικά κύτταρα

Kalaitzakis¹,

Καλαϊτζάκης²

View full text Add to dashboard Cite

Ένας μεγάλος κύκλος φτάνει στο τέλος του! Ήταν Δεκέμβριος του 2003 (9 χρόνια πριν), όταν ο φίλος και συνάδελφος Γιώργος Μαρκόπουλος έχοντας ήδη ξεκινήσει πρακτική στο εργαστήριο Γενικής Βιολογίας, ήρθε ένα πρωινό λέγοντάς μου ότι ο μετέπειτα επιβλέπων καθηγητής μου κ. Αγγελίδης Χαράλαμπος ζητούσε κάποιο άτομο για πρακτική. Αμέσως ανταποκρίθηκα θετικά, δεδομένου του γεγονότος ότι αρέσκομαι ιδιαιτέρως σε τεχνικά και εργαστηριακά ζητήματα και ήρθα σε συννενόηση με τον κ. Αγγελίδη, οπότε ξεκίνησα πρακτική στο εργαστήριό του. Μετά την πρακτική, το 2005, ήρθε η ώρα της διπλωματικής μου εργασίας για το πτυχίο του τμήματος Βιολογικών Εφαρμογών & Τεχνολογιών στο οποίο φοιτούσα. Τελειώνοντας τη διπλωματική μου εργασία, ο κ. Αγγελίδης μου πρότεινε να συνεχίσουμε τη συνεργασία μας στα πλαίσια μιας διδακτορικής διατριβής. Χωρίς σκέψη, απάντησα θετικά. Έτσι, φτάνουμε στο 2012, εννέα χρόνια μετά και ήρθε η μεγάλη ώρα να υποστηρίξω την μακρόχρονη και κοπιώδη εργασία μου στα πλαίσια της διατριβής αυτής.Τα χρόνια αυτά στο εργαστήριο ήταν γεμάτα εμπειρίες, πότε ευχάριστες, πότε δυσάρεστες, αλλά όταν σε ευχαριστεί το περιβάλλον και αυτό που κάνεις, ξεχνάς τα πάντα και σου μένουν μόνο καλές αναμνήσεις. Επιπλέον, μέσα στα χρόνια αυτά, γνώρισα πολλούς συναδέλφους και έκανα αρκετές φιλίες. Δυστυχώς όμως, ολοκληρώνω τον κύκλο αυτό με μια πίκρα στο στόμα, δεδομένης της σημερινής κατάστασης του Πανεπιστημίου, το οποίο μετά λύπης βλέπω καθημερινά να βυθίζεται λόγω της σημερινής κατάστασης! Στα πλαίσια της παραμονής μου στο εργαστήριο Γενικής Βιολογίας, θα πρέπει να ευχαριστήσω αρκετούς ανθρώπους, αρκετούς από τους οποίους μπορεί και να ξεχάσω, λόγω του μεγάλου χρονικού διαστήματος παραμονής στο χώρο και για το λόγο αυτό ζητώ προκαταρκτικά συγγνώμη.Αρχικά, θα πρέπει να ευχαριστήσω το άτομο που με έφερε αρχικά στο εργαστήριο, το φίλο και συνάδελφο διδάκτορα Μαρκόπουλο Γεώργιο, χωρίς τη συμβολή του οποίου δεν θα είχα ίσως την ευκαιρία αυτή, αλλά και για τη βοήθεια σε πειραματικά αδιέξοδα και για τις συζητήσεις που είχαμε σε σχέση με τα εργαστηριακά και μη θέματα.Ακολούθως, θα πρέπει να ευχαριστήσω αρκετά άτομα με τα οποία συνεργαστήκαμε όλα αυτά τα χρόνια και με βοήθησαν με τον ένα ή με τον άλλο τρόπο, είτε σε τεχνικά ζητήματα, είτε σε υλική βοήθεια, είτε ακόμη και σε ηθική υποστήριξη με τις συζητήσεις που είχαμε κατά καιρούς. Ευχαριστώ λοιπόν για τους λόγους αυτούς σε τυχαία σειρά και με ιεράρχηση βάσει ιδιότητας τις μεταπτυχιακές φοιτήτριες Κασμερίδου Ευαγγελία και Κολιού Μαρία, τους υποψηφίους διδάκτορες

show abstract

The ATPase core of a clathrin uncoating protein.

Cited by 248 publications

References 16 publications

Mutational analysis of the human HSP70 protein: distinct domains for nucleolar localization and adenosine triphosphate binding.

Mutational analysis of the human HSP70 protein: distinct domains for nucleolar localization and adenosine triphosphate binding.

A dual role for mitochondrial heat shock protein 70 in membrane translocation of preproteins.

Η λειτουργία της πρωτεΐνης θερμικού σοκ των 70 kDa (heat shock protein 70: Hsp70) στα θηλαστικά κύτταρα

Contact Info

Product

Resources

About