Study of Applicability of the Bifunctional System “Ethidium Bromide + Hoechst-33258” for DNA Analysis

Abstract

Changes in absorbance and fluorescence excitation and emission spectra in the ultraviolet and visible regions of the system containing ethidium bromide (EtBr) and Hoechst-33258 (Ht) were investigated depending on various DNA quantities and the composition of the medium. It is noted that spectral properties of this system are determined by interactions of EtBr and Ht both with nucleic acid and with one another (for example, joint sorption of EtBr and Ht on DNA may involve fluorescent resonance energy transfer between the dye molecules). Thus, different modes of EtBr and Ht specificity to substrate and assay conditions suggest that combined use of these dyes provides some additional effects that may be interesting in terms of structure-functional study of nucleic acid. Some of these effects are considered in this paper.

New biotesting method with the application of modern impedance technologies

“…Вследствие этого ранее нами было предложено, в частности, оценивать при подобном биотестиро-вании также нелетальные изменения структуры генома тестовых организмов (в том числе пространст-венной -значимо меняющейся даже в зависимости от характера жизнедеятельности одного и того же организма) с помощью специально разработанной системы специфичных флуорофоров с согласованны-ми спектральными и комплексообразующими с ДНК свойствами [15][16][17][18]. А в последнее время при осу-ществлении исследований по биотестированию с помощью одноклеточных микроорганизмов мы стали также проводить анализ их «кривых роста» с применением импедансных технологий, достаточно точно, надежно и удобно реализуемых для подобных целей в настоящее время, в частности, в таких микробио-логических кондуктометрических анализаторах, как «BacTrac» или «Rabit», выпускаемых компаниями «SY-LAB GmbH» (Австрия) и «Don Whitley Scientific Limited» (Великобритания) соответственно, зареги- …”