Strengthening the Effectiveness of the Candidate Influenza Vaccine by Combining Conserved Sequences of Hemagglutinin and M2 protein

Abstract

1 ФГБУ «НИИ гриппа» Минздрава России, Санкт-Петербург 2 ФГУ «ФИЦ «Фундаментальные основы биотехнологии» РАН, Москва Усиление эффективности кандидатной вакцины против гриппа сочетанием консервативных последовательностей гемагглютинина и М2 белка Резюме Разработка универсальной вакцины против гриппа -вакцины, направленной на все субтипы вирусов гриппа человека, -является наиболее актуальной современной задачей в специфической профилактике гриппа. В настоящей статье дана сравнительная характеристика специфической активности нескольких вариантов рекомбинантного вакцинного белка, включающего антигенные детерминанты вируса гриппа -эктодомен белка М2 (M2е) и фрагмент второй субъединицы гемагглютинина (аминокислотная последовательность 76 -130). В качестве белка-носителя и адъюванта был выбран флагеллин -белок Salmonella typhimurium как полноразмерный, так и с делетированной гипервариабельной частью. На экспериментальных животных показана высокая иммуногенность препаратов и способность предотвращать летальность при инфицированнии вирусом гриппа. Наибольшей протективностью обладал гибридный Abstract (the amino acid sequence 76 -130). Flagellin -Salmonella typhimurium protein was used as carrier protein and as adjuvant. We use two forms of flagellin: full size and with deleted hypervariable region. The proteins showed high immunogenicity, and the ability to prevent lethal infection of influenza virus in mice. and M2e on the C-terminus (protein Flg-HA2-4M2e) demonstrated the most protective properties. It provides 100% survival immunized mice that were challenge with a high dose of influenza A (H3N2) -10 LD50. Proteins containing only full sized flagellin with M2e or flagellin truncated form with M2e at the C-terminus and HA2 within the hypervariable region, protected 75% of animals from lethal infection. Protein Flg-HA2-4M2e is promising for further study as a vaccine. The development of universal influenza vaccine -a vaccine directed to all subtypes of human influenza A viruses -is the really actual problem task. This paper presents the comparative characteristic of the specific activity of various recombinant proteins consisting of antigenic determinants of influenza A virus -the ectodomain of the M2 protein (M2e) and a fragment of the second subunit of the hemagglutinin