Steroidumwandelnde Enzyme aus Mikroorganismen X. Anreicherung einer 4‐En‐3‐oxosteroid‐5α‐Reduktase aus Mycobacterium smegmatis sowie Abtrennung und Anreicherung des Apoenzyms mit Hilfe der Affinitätschromatographie

Abstract

Steroidumwandelnde Enzyme aus Mikroorganismen X. Anreicherung einer 4-En-3-oxosteroid-5oc-Reduktase aus Mycobacterium smegmatis sowie Abtrennung und Anreicherung des Apoenzyms mit Hilfe der Affinitatschromatographie P. ATRAT, V. DEPPMEYER, H. GROH und C. HORHOLD Technische Assistenz: L. MOLLER und U. TINNEY (Eingegangen a m 11. 8. 1978) The 4-en-3-oxosteroid-5a-reductase from Mycobacterium smegmatis mas bound biospecifically on the affinant containing an immobilized testosterone ligand. The enzyme obtained by elution with ethylene glycol and urea in a 32 fold purity has a S. A. of 8.73 x p~i androstenedione min-1 mg-'.The coenzyme (FAD) could be separated from the immobilized enzyme substrate complex on the affinity matrix, in the presence of (NH,),SO, a t p H 3.0. After elution of the apoenzyme 979, of the initial enzyme activity was obtained by incubation with FAD. The reactivated enzyme results in a 40 fold enrichment.