Standardization of nucleic acid amplification tests in diagnostic molecular microbiology

Abstract

Controllo di qualità nel laboratorio diagnostico Definizioni Controllo di qualità (quality control)Con il termine controllo di qualità ci si riferisce a quelle misure che devono essere incluse durante ciascuna seduta di laboratorio per verificare che il test stia funzionando adeguatamente. Assicurazione della qualità (quality assurance) definisce quell'insieme di procedure che assicurano che i risultati finali riportati dal laboratorio sono corretti. Scopo del controllo di qualità è quello di assicurare che i risultati generati dal test siano corretti; comunque l'assicurazione della qualità deve essere molto più ampia, prevedendo anche il controllo dell'accuratezza della fase pre-e post-analitica: che il test giusto sia eseguito sul campione giusto e che il giusto risultato e la giusta interpretazione sia inviata alla persona giusta nel tempo giusto. Gestione della qualità (Quality assessment).La gestione della qualità, nota anche come test di efficacia, è uno strumento per determinare la qualità dei risultati generati dal laboratorio. La gestione della qualità è una verifica dell'efficacia dell'assicurazione di qualità e del controllo di qualità. La gestione della qualità può includere valutazione interne o esterne. Variabili che possono alterare la qualità dei risultati. 1. Formazione e aggiornamento del personale del laboratorio; 2. le condizioni dei campioni da esaminare; 3. i controlli usati in ogni corsa; 4. i reagenti; 5. la strumentazione; 6. l'interpretazione dei risultati; 7. la refertazione (trascrizione e presentazione dei risultati). SUMMARYNucleic acid detection by amplification (NAT) assays began to be used in diagnostic microbiology about twenty years ago. Since then, the progress of molecular methods has been continuous and rapid, aimed to obtain more and more sensitive and specific results and automation.To actually achieve such objectives, microbiology laboratories have to use suited quality controls and to participate to external quality control programs. Quality controls for NAT assays need to be adjusted to follow the evolution of the molecular methods.The need of standardization and suited controls for NAT assays became evident approximately by the middle of '90 years.Thus International Standards (IS) were established by the World Health Organization, for the main blood borne viruses. Such preparations had a well known concentration expressed as International Units, a new measure unit for nucleic acid quantitation. Then, IS were used in order to calibrate working reagents and synthetic calibrators. Another tool for standardization are multicentre studies aimed to verify the performances of participating laboratories using different molecular methods, and allow the comparison of inter-laboratory results.The CoSBio of AMCLI, as other European organizations, in the last years promoted, some multicentre studies on NAT assays.The results of such studies demonstrated a good level of diagnostic performances of participating laboratories. However, with the introduction of the real time PCR (RQ-PC...