Signaling TLR/RLR-mechanisms of immunomodulating action of ingavirin and thymogen preparations

Abstract

Objective: to study drugs ingavirin and thymogen as activators of signal TLR and RLR reactions in a sensitive cell model of THP-1 monocytes and blood cells of donors.Materials and methods . Investigated drugs ingavirin (imidazolylethanamide pentanedioic acid – 6-[2-(1H-imidazol-4-yl)ethylami- no]-5-oxohexanoic acid; Valenta Pharmaceutics, Russia) and thymogen (alpha-glutamyl-tryptophan; Cytomed, Russia), registered in Russia as medicines. The expression of TLR/RLR receptor genes was determined under the action of ingavirin 50–300 μg/ml and thymogen 0.1–5 μg/ml (24 h, 37 °C) using quantitative RT-PCR. The level of fluid cytokines was determined using ELISA kits (Vec- tor-Best, Russia) in the culture fluid. Transfection of small inhibitory RNA (siRNA) MAVS was performed using the reagent Lipofect- amine 2000 (Invitrogen). The immunophenotype of the THP-1 cell line was determined by flow cytometry with labeled monoclonal antibodies FITC CD14 and PE CD34 (BD Biosciences) on a FACSCanto II instrument (Becton Dickinson).Results . For the first time, it has been shown that ingavirin (imidazolylethanamide) and thymogen (dipeptide Glu-Trp) preparations are activators of the immune TLR/RLR receptors and their signaling factors genes in the cultures of monocytic leukemia THP-1 and blood of healthy donors. In these cellular systems, ingavirin and thymogen preparations elicited similar immune responses and stimulated the expression of genes: endosomal TLR3/7/8/9 receptors, RIG1/MDA5 cytoplasmic sensors and NFκB1 and MAVS signaling factors. Induced cells secrete inflammatory cytokines of TNF-α and IL1-β. Ingavirin in THP-1 cell culture monocytes caused a decrease in CD34+ blast cells. Activation the genes of MAVS and co-receptor B2M of the main histocompatibility complex (MHCII) by ingavirin were interrelated. Transfection of siRNA MAVS reduced the level of homologous mRNA MAVS and heterologous mRNA B2M. Conclusion . The results obtained suggest that the antiviral and immunomodulating properties of the drugs ingavirin and thymogen are associated with the activation of a group of TLR/RLR signaling pathways of the innate and adaptive immunity and the differentiation of hematopoietic cell precursors.

Analysis of chicken macrophage functions and gene expressions following infectious bronchitis virus M41 infection

“…Host immune response is divided into innate immunity and acquired immunity [ 59 ]. TLRs and RLRs are two types of PRR in the innate immune system [ 60 ]. TLR3 and TLR7 are both involved in IBV infection, which is consistent with previous studies [ 16 , 61 ], and TLR3 may play a key role in IBV-induced viral immune mechanisms.…”

Pharmacotherapy for acute respiratory infections caused by influenza viruses: current possibilities

“…при заражении вирусами гриппа A/Puerto-Rico/8/34 (H1N1) (PR8wt) и его мутантом delNS1 (делеция гена NS1) альвеолярных эпителиальных клеток человека (а549) и клеток MDCK (Madin Darby canine kidney -линии клеток почки собаки) обнаружено, что препарат способен усиливать синтез иФН-рецепторов и повышать чувствительность клеток к сигналам иФН, ингибируемым неструктурным белком NS1 вируса гриппа, способен стимулировать выработку инфицированными клетками противовирусных эффекторных белков PKR и Мха, что приводит к устранению подавляющего эффекта вируса гриппа в отношении иФН [76]. в исследовании клеточной модели моноцитов линии ТНр-1 (острый моноцитарный лейкоз) и клеток крови здоровых доноров показано, что препарат обладал эффектами, схожими с тимогеном, которые опосредовались путем стимуляции экспрессии генов эндосомальных рецепторов TLR 3, 7, 8, 9, цитоплазматических сенсоров RIG1/MDA5 и сигнальных факторов NFκB1 и MAVS [77]. предполагается наличие прямого противовирусного действия -взаимодействие с нуклеопротеином вирусов гриппа а и в с последующим нарушением репликации [75,78].…”

Some opportunities for immunotherapy in coronavirus infection

“…Первый компонент, натриевая соль глутамилтриптофана (глу-трп), обладает свойствами тимомиметика, способен стимулировать экспрессию эндосомальных TLR 3, 7, 9 и снижать выработку TNFα и IL-6A в культурах клеток F231 [2,4]. Другой компонент -2-бензилбензимидазол гидрохлорид (бендазол) ингибирует NF-κB, причем бензимидазольный каркас выполняет функцию фармакофора [9].…”