Restoration of spermatogenesis in infertile male chickens after transplantation of cryopreserved testicular cells

Benešová, Barbora; Mucksová, Jitka; Kalina, Jiří; Trefil, Pavel

doi:10.1080/00071668.2014.974506

Cited by 7 publications

(7 citation statements)

References 55 publications

Supporting

Mentioning

Contrasting

Unclassified

Order By: Relevance

“…М е т о д ы г е н е т и ч е с к о й м о д и ф и к а ц и и к л е т о к п т и ц. Для получения генетически модифицированных особей используют, как правило, комплекс методов и методических подходов, учитывая объект исследований, выбор клеток-мишеней для введения рекомбинантной ДНК и способ генетической трансформации клеток-мишеней. Можно выделить три основные стратегии создания генетически модифицированной птицы: введение генетических конструкций непосредственно в эмбрион (27,28) или в органы и ткани взрослых особей (29,30); трансфекция клеток-мишеней в культуре in vitro и их последующая трансплантация в эмбрион или органы-мишени (31,32); трансформация спермиев in vitro и осеменение самок трансформированной спермой (33).…”

unclassified

GENOME EDITING: CURRENT STATE AND PROSPECTS FOR USE IN POULTRY (review)

Волкова¹

2021

S-h. biol.

View full text Add to dashboard Cite

В настоящее время достигнут значительный прогресс в области генетической модификации сельскохозяйственной птицы. Разработаны методы и методические подходы по введению рекомбинантных генов в клетки птиц. Их эффективность варьирует в зависимости от объекта исследований, клеток-мишеней, выбранных для введения рекомбинантной ДНК, и способа их трансформации. В качестве клеток-мишеней для внесения направленных модификаций рассматриваются клетки бластодермы, примордиальные зародышевые клетки, сперматогонии, спермии, клетки яйцевода. Генетическую трансформацию клеток-мишеней можно осуществить посредством ретровирусных, лентивирусных и аденовирусных векторов, электропорации, липофекции. Выделяют три основные стратегии создания генетически модифицированной птицы: введение генетических конструкций непосредственно в эмбрион (J. Love с соавт., 1994; Z. Zhang с соавт., 2012) или в отдельные органы и ткани взрослых особей (Д.В. Белоглазов с соавт., 2015; S. Min с соавт., 2011); трансфекция клеток-мишеней в культуре in vitro и их последующая трансплантация в эмбрион или органы-мишени (M.-C. van de Lavoir с соавт., 2006; B. Benesova с соавт., 2014); трансформация спермиев in vitro и осеменение самок трансформированной спермой (E. Harel-Markowitz с соавт., 2009). Эти подходы применялись при разработке методов редактирования генома клеток птиц. Изучена возможность модификации клеток птиц посредством различных систем редактирования, в частности ZFN (zinc finger nuclease), TALEN (transcription activator-like effector nucleases) и CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced palindromic repeats). К перспективным направлениям использования этой технологии в птицеводстве относятся изучение функций генов (N. Véron с соавт., 2015), получение рекомбинантных протеинов в составе яичного белка (I. Oishi с соавт., 2018), улучшение хозяйственно ценных и продуктивных качеств (J. Ahn с соавт., 2017), повышение устойчивости к инфекционным заболеваниям (A. Koslová с соавт., 2020; R. Hellmich с соавт., 2020). С помощью технологии редактирования генома получены куры с нокаутом генов тяжелой цепи иммуноглобулина (B. Schusser с соавт., 2013; L. Dimitrov с соавт., 2016), овомуцина (I. Oishi с соавт., 2016), миостатина (G.-D. Kim с соавт., 2020), а также с интегрированным геном бетаинтерферона человека (I. Oishi с соавт., 2018). Выведены перепела с нокаутом генов миостатина (J. Lee с соавт., 2020) и меланофилина (J. Lee с соавт., 2019). В ряде исследований показана простота, безопасность и доступность системы редактирования CRISPR/Cas9 для модификации генома сельскохозяйственной птицы, что позволяет рассматривать эту систему как эффективный инструмент для создания и коммерческого использования пород и линий птиц с улучшенными качествами в рамках реализации крупномасштабных селекционных программ по повышению качества птицеводческой продукции. В настоящем обзоре рассмотрены основные методы и методические подходы по генетической модификации сельскохозяйственной птицы, в том числе с привлечением различных систем редактирования генома, а также основные направ...

show abstract

unclassified

GENOME EDITING: CURRENT STATE AND PROSPECTS FOR USE IN POULTRY (review)

Волкова¹

2021

S-h. biol.

View full text Add to dashboard Cite

show abstract

“…В последующем был опубликован ряд работ по эффективности трансплантации донорских половых клеток у различных видов сельскохозяйственных животных, в частности свиней (20,21), овец (22), коз (23), быков (24). Для сельскохозяйственной птицы работы были выполнены на петухах (25,26) и перепелах (27).…”

unclassified

Генетическая Модификация Половых Клеток Петухов С Использованием Различных Методических Подходов

Ветох¹,

Волкова²,

Иолчиев³

et al. 2020

s-h. biol.

View full text Add to dashboard Cite

Половые клетки гонад самцов сельскохозяйственной птицы рассматриваются в качестве перспективных клеток-мишеней для введения рекомбинантной ДНК с целью направленного внесения модификаций их генома. Наибольший интерес представляет модификация предшественников половых клеток и ранних половых клеток -примордиальных зародышевый клеток (ПЗК) и сперматогониев. В случае их трансплантации и успешной колонизации в гонадах реципиентов возможно получение значительной популяции трансформированных зрелых половых клеток (спермиев), которые могут быть использованы для осеменения самок и получения потомства с внесенными генетическими модификациями. Новизна настоящего исследования заключалась в разработке и оптимизации отдельных этапов локальной трансформации сперматогенных клеток петухов посредством трансфекции ПЗК эмбрионов и сперматогогенных клеток семенников на ранних стадиях дифференцировки. Нашей целью была оценка эффективности генетической трансформации половых клеток петухов с использованием различных методических подходов. Исследования выполняли на курах (Gallus gallus domesticus) породы русская белая. Примордиальные зародышевые клетки выделяли из 6-суточных эмбрионов. Трансформацию полученной культуры ПЗК осуществляли посредством электропорации с применением системы Neon («Thermo Fisher Scientific», США). Для трансфекции использовали плазмиду ZsGreen1-N1 («Addgene», США) с геном ZsGreen под CMV промотором. Трансформированные клетки в количестве 400, 700 и 1000 вводили в дорсальную аорту 2,5-суточных эмбрионов. Эмбрионам контрольной группы в дорсальную аорту вводили ростовую среду DMEM. Трансформацию сперматогенных клеток петухов in vivo осуществляли посредством введения лентивирусного вектора непосредственно в семенники однократно в возрасте 3 или 4 мес и двукратно -в 3 и 4 мес. Вирусный препарат в концентрации 110 7 КОЕ/мл вводили из расчета 0,5 мл на семенник. Лентивирусный вектор содержал репортерный ген ZsGreen под CMV промотором. Для оценки эффективности колонизации и развития донорских примордиальных зародышевых клеток в гонадах реципиентов, а также результативности трансформации сперматогенных клеток in vivo были получены и проанализированы гистологические срезы семенников опытных самцов. В качестве контроля использовали нетрансгенных петухов, подобранных по принципу аналогов (возраст, порода). Для оценки возможности получения трансгенного потомства отбирали петухов с донорскими (введение в эмбрионы донорских ПЗК) и собственными (введение в семенники вирусного препарата) трансформированными половыми клетками, которых далее использовали для осеменения самок. Оценивали оплодотворяющую способность семени опытных петухов и долю эмбрионов с экспрессией гена ZsGreen. Эффективность трансформации клеток-мишеней определяли по экспрессии репортерного гена ZsGreen с использованием микроскопа Nikon Ni-U («Nikon», Япония). Культура эмбриональных клеток кур, полученная на первом этапе эксперимента, состояла из нескольких типов клеток. Доля ПЗК не превышала 3 %. Посредством разделения разных типов эмбриональных клеток по адгези...

show abstract

“…4.4. DISCUSSÃO Estudos prévios têm demonstrado que o galo doméstico (Gallus gallus) representa um excelente recipiente para transplantes intra e interespecíficos de células-tronco espermatogoniais (SSCs) de aves filogeneticamente próximas (Lee et al, 2006;Trefil et al, 2006;Trefil et al, 2010;Pereira et al, 2013;Roe et al, 2013;Benesova et al, 2014). Estes achados nos motivaram a investigar se o ambiente testicular do galo garante a colonização e desenvolvimento de células germinativas utilizando um modelo filogeneticamente mais distante.…”

Section: Avaliação Microscópica Das Células Transplantadasunclassified

“…Adicionalmente, outro fator preponderante no sucesso do transplante interespecífico é a capacidade das células germinativas diferenciarem e manterem a capacidade fecundante mesmo após a criopreservação/descongelamento e transplante. Dessa forma, apesar de comprovada a capacidade de diferenciação e fertilização das SSCs criopreseravadas após o transplante alogênico em galos (Benesova et al, 2014), atualmente, os métodos de criopreservação e descongelamento não são completamente seguros para as células tronco testiculares (Gholami et al, 2013). Um exemplo disso é a alta queda na viabilidade das espermatogônias tronco testiculares de galos durante o processo de criopreservação/descongelamento (Benesova et al, 2014).…”

Section: Avaliação Microscópica Das Células Transplantadasunclassified

“…Dessa forma, apesar de comprovada a capacidade de diferenciação e fertilização das SSCs criopreseravadas após o transplante alogênico em galos (Benesova et al, 2014), atualmente, os métodos de criopreservação e descongelamento não são completamente seguros para as células tronco testiculares (Gholami et al, 2013). Um exemplo disso é a alta queda na viabilidade das espermatogônias tronco testiculares de galos durante o processo de criopreservação/descongelamento (Benesova et al, 2014). Além disso, o processo de criopreservação induz lesões criogênicas que interrompem a função biológica normal destas células.…”

Section: Avaliação Microscópica Das Células Transplantadasunclassified

See 1 more Smart Citation

>b<Conservação de germoplasma de cracídeos ameaçados por meio de transplantes interespecíficos de células germinativas>/b<

Blank¹

View full text Add to dashboard Cite

Metamorfose. Esses quatro anos são definidos por essa palavra. Nunca imaginei morar ou passar por aqui, mas agora sou grato a tudo que São Paulo me proporcionou. Foram quatro anos de distância, ausência e muita saudade, mas apesar disso, o amor sempre fez parte do meu dia a dia. Amor. Palavra que ilumina, aquece e dá valor a vida de qualquer um e, apesar da distância, sei que foi transmitida todos os dias até mim, pela minha família e por aqueles que me abraçaram. Por esta razão, agradeço ao Amor incondicional da minha família. Foi muito difícil ficar longe de vocês, porém, isso só aconteceu porque sempre me incentivaram a correr atrás dos meus objetivos! Mãe, obrigado por ser a melhor professora do mundo, pois me ensinou a ser uma pessoa cada vez melhor. Se cheguei onde estou, devo isso a senhora e ao seu amor incondicional. Irmã, agora mamãe da Lívia, fico triste em não ter acompanhado essa fase da sua vida, porém feliz em ver que você realizou seu sonho de ser mamãe. Obrigado irmã, por sempre acreditar nos meus sonhos! Meus irmãos, obrigado por me persuadir a sofrer com o São Paulo FC! Assim, aprendi que a vida não é feita apenas de vitórias e que derrotas, também constroem nosso caminho. Durante esses quatro anos de doutorado muitas conquistas e surpresas ocorreram, porém, foi neste último ano que algo realmente especial aconteceu. Tudo foi tão rápido e intenso que hoje não me vejo longe de você, obrigado ANA CLARA por compartilhar seu amor comigo, TE AMO. Não obstante, agradeço a sua mãe Claudia e a sua irmã Natália. Apesar de todo meu esforço e estudo, este trabalho nunca seria realizado sem meu orientador e amigo, Professor Ricardo. Professor, muito obrigado pela oportunidade. Sou muito grato por todos os debates e ensinamentos que me proporcionaram aprendizado! Entre os papers, as aulas e as atividades de laboratório, vocês sempre estiveram ao meu lado. Sem vocês, meus amigos, eu não teria desenvolvido esse trabalho! Brunão, Daniel, Diego, Andressa, Gabriel, Rapha, Mônica e Bobbie, muito obrigado pela irrestrita ajuda, conselhos e amizade! Gostaria de agradecer a morada dos pássaros, pelo acolhimento nos meus primeiros anos em São Paulo. Com esse nome tive a certeza que tudo daria certo. E também, por ter conhecido pessoas tão maravilhosas que levarei para toda a vida. Thiago, Pedro, Gustavo, Erivelton, Esdras, Marilady, Gizele, Hadassa e Léo, muito obrigado pela Amizade! Professor Marcílio (Marcilião), meu amigo, parceiro do pôquer e dos quitutes. Obrigado por todos os ensinamentos, principalmente na estatística, e também por compartilhar sua generosidade e humildade! Agradeço a estrutura que possibilitou tudo isso: o VRA e seus professores

show abstract

Restoration of spermatogenesis in infertile male chickens after transplantation of cryopreserved testicular cells

Cited by 7 publications

References 55 publications

GENOME EDITING: CURRENT STATE AND PROSPECTS FOR USE IN POULTRY (review)

GENOME EDITING: CURRENT STATE AND PROSPECTS FOR USE IN POULTRY (review)

Генетическая Модификация Половых Клеток Петухов С Использованием Различных Методических Подходов

>b<Conservação de germoplasma de cracídeos ameaçados por meio de transplantes interespecíficos de células germinativas>/b<

Contact Info

Product

Resources

About