Relative quantification of Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola, Tannerella forsythia and Aggregatibacter actinomycetemcomitans high-risk bacterial species in Romanian patients evaluated for periodontal disease

Abstract

Three bacterial species pertaining to the red complex (Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola, and Tannerella forsythia) and Aggregatibacter actinomycetemcomitans were investigated in relation to the incidence and severity of periodontal disease. A total of 259 patients were included in this study, 179 being diagnosed with periodontal disease. The gingival crevicular fluid samples were obtained from periodontal pockets and the presence and levels of target bacteria were assessed following DNA extraction and real-time quantitative PCR.Our results account for significant positive associations between the number of bacterial species from the red complex coexisting within a patient and several clinical signs (gingival bleeding, inflammation and bone deterioration). A similar positive association was found between bacterial load of the red complex species and the clinical Case Type diagnostic of the periodontal disease, as well as the probing depth with the most evident results for T. denticola. In conclusion, our study, a first for the Romanian population, confirms previous results found elsewhere and finds a possible regional pathogenic specificity for T. denticola as a major factor for periodontitis severity.

Métodos de diagnóstico molecular en la práctica odontológica.

“…3,19,20 Este método también se ha aplicado para medir el número de bacterias en enfermedades periodontales en muestras como saliva y el líquido del surco gingival (GCF, [líquido crevicular gingival]), las muestras pueden ser utilizadas después de estar almacenadas por mucho tiempo. 2,11 Constantin y colegas 21 realizaron un estudio para detectar bacterias presentes en la enfermedad periodontal. 21 Toma de muestra: las muestras se tomaron del líquido crevicular gingival utilizando cinco puntas de papel estériles, cada una insertada en una bolsa periodontal diferente y mantenida allí durante aproximadamente 10 segundos, las puntas de papel se transportaron a un solo tubo estéril a fin de enviarlas al laboratorio para la extracción de DNA y la cuantificación bacteriana.…”

“…2,11 Constantin y colegas 21 realizaron un estudio para detectar bacterias presentes en la enfermedad periodontal. 21 Toma de muestra: las muestras se tomaron del líquido crevicular gingival utilizando cinco puntas de papel estériles, cada una insertada en una bolsa periodontal diferente y mantenida allí durante aproximadamente 10 segundos, las puntas de papel se transportaron a un solo tubo estéril a fin de enviarlas al laboratorio para la extracción de DNA y la cuantificación bacteriana. 21 Extracción de DNA: el DNA se extrajo según las instrucciones de Constantin y colegas.…”

“…21 Toma de muestra: las muestras se tomaron del líquido crevicular gingival utilizando cinco puntas de papel estériles, cada una insertada en una bolsa periodontal diferente y mantenida allí durante aproximadamente 10 segundos, las puntas de papel se transportaron a un solo tubo estéril a fin de enviarlas al laboratorio para la extracción de DNA y la cuantificación bacteriana. 21 Extracción de DNA: el DNA se extrajo según las instrucciones de Constantin y colegas. 21 Para la identificación de cada bacteria se amplificó un fragmento del gen rRNA (RNA ribosomal) 16S utilizando los siguientes cebadores (Tabla 3).…”

“…21 Extracción de DNA: el DNA se extrajo según las instrucciones de Constantin y colegas. 21 Para la identificación de cada bacteria se amplificó un fragmento del gen rRNA (RNA ribosomal) 16S utilizando los siguientes cebadores (Tabla 3). 21…”

“…21 Para la identificación de cada bacteria se amplificó un fragmento del gen rRNA (RNA ribosomal) 16S utilizando los siguientes cebadores (Tabla 3). 21…”