Regulatory B Cells Are Functionally Impaired in Patients Having Hemophilia A With Inhibitors

Abstract

Development of inhibitors remains a major clinical complication in patients with hemophilia A receiving replacement therapy with factor VIII (FVIII). Understanding the immune mechanisms involved in the development of inhibitors can provide valuable information about pathways to human tolerance. Recent evidence indicates that B regulatory (Breg) cells play a pivotal role in controlling the production of antibodies (Abs) while promoting follicular T helper (Tfh) cells and monocytes, expressing the low-density lipoprotein receptor-related protein (LRP/CD91), which is involved in FVIII intake from the circulation. We studied circulating levels of Breg cells along with Tfh cells and the expression of LRP/CD91 on monocytes in patients with hemophilia A using 8-color flow cytometry and cell culture. Compared to healthy controls, patients with hemophilia A with inhibitors showed a severe reduction in levels of Breg cells and produced less interleukin-10 when activated via the CD40 signaling pathway. In addition, patients with hemophilia A with inhibitors exhibited an overexpression of LPR/CD91 on monocytes and normal levels of Tfh cells. Levels of Breg cells were not significantly related to LPR/CD91 although negative associations were evidenced. Collectively, these results provide new insights into the role of Breg cells and LPR/CD91 in the development of inhibitors in patients with hemophilia A.

Levels of regulatory T cells and invariant natural killer cells and their associations with regulatory B�cells in patients with non-Hodgkin lymphoma

“…Surface and intracellular staining. Immunostaining was performed as recently reported (10). Briefly, in a 96-well polystyrene plate, appropriate amounts of each surface monoclonal antibody and 2x10 6 of PBMC were incubated in the dark for 30 min at 4˚C.…”

Hemofilia: abordaje diagnóstico y terapéutico

“…Uno de los mayores desafíos en el tratamiento de la hemofilia es el desarrollo de anticuerpos neutralizantes o inhibidores [33]. Estos son aloanticuerpos tipo Inmunoglobulina G (IgG) contra los factores de coagulación viii y ix, que pueden ser inducidos por la terapia sustitutiva con estos factores, los cuales neutralizan rápidamente la acción de los mismos, lo que hace ineficaz la terapia de reemplazo y expone a los pacientes a complicaciones importantes, aumento en los costos de manejo y en la morbimortalidad [5].…”

“…Su presencia es más frecuente en individuos con hemofilia A, con una prevalencia del 12 a 35 %, mientras que en la B es de tan solo del 1 al 4 %. De igual modo, se presenta en el 25 al 50 % de los pacientes con hemofilia severa y usualmente se manifiesta en los primeros 50 días de tratamiento [5,33].…”

“…A pesar de que los mecanismos mediante los cuales se generan estos anticuerpos han sido estudiados ampliamente, aún se desconoce por qué algunos individuos son más propensos que otros a desarrollar esta condición [33]. Se ha relacionado la aparición de inhibidores con algunos factores genéticos, como: etnicidad, inmunofenotipo de antígenos leucocitarios humanos (Human Leukocyte Antigen, hla), defecto molecular en las citoquinas, al igual que con factores no genéticos, como: tipo de producto usado, edad de la primera infusión, vacunaciones, transfusiones previas, entre otros [5].…”

“…La iti hace referencia a la exposición constante a dosis, a menudo altas, de concentrados del factor viii durante meses o incluso años, con el propósito de inducir tolerancia [33].…”